71205-M
Benzonase® Nuclease HC
Purity > 90%, Serratia marcescens, buffered aqueous glycerol solution
Sinonimo/i:
Endonucleasi
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About This Item
Numero CAS:
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352202
NACRES:
NA.54
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Nome del prodotto
Nucleasi Benzonase® HC, purezza > 90%,
Origine biologica
Serratia marcescens
Livello qualitativo
Ricombinante
expressed in E. coli
Saggio
>90% (SDS-PAGE)
Stato
buffered aqueous glycerol solution
Produttore/marchio commerciale
Novagen®
Condizioni di stoccaggio
OK to freeze
Concentrazione
≥250 units/μL
applicazioni
research use
Temperatura di conservazione
−20°C
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Descrizione generale
La Benzonase® è un'endonucleasi geneticamente modificata prodotta da Serratia marcescens. Degrada tutti i tipi di DNA e RNA (a singolo o a doppio filamento, lineare e circolare) mentre è priva di attività proteolitica. È efficace in un′ampia gamma di condizioni e possiede un′attività specifica straordinariamente elevata. L′enzima digerisce completamente gli acidi nucleici a oligonucleotidi 5′-monofosfato lunghi 2-5 basi (al di sotto del limite di ibridazione), condizione ideale per la rimozione degli acidi nucleici dalle proteine ricombinanti, in conformità alle linee guida della FDA per la contaminazione con acidi nucleici. La capacità della Benzonase di idrolizzare rapidamente gli acidi nucleici la rende un enzima eccellente per la riduzione della viscosità, il che consente di ridurre i tempi di processamento ed ottenere un aumento di resa proteica. L′enzima è compatibile con i reagenti per l′estrazione delle proteine BugBuster® e PopCulture® e può quindi essere aggiunto a tali reagenti per eliminare la viscosità e rimuovere gli acidi nucleici dagli estratti di E. coli.
L′enzima è costituito da due subunità da 30 kDa ciascuna. E′ attivo in un intervallo di pH compreso tra 6 e 10, tra 0 e 42 °C e per l′attivazione necessita della presenza di Mg2+ 1-2 mM. L′enzima è attivo anche in presenza di detergenti ionici e non ionici, agenti riducenti, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e urea (l′attività relativa dipende dalle condizioni specifiche). L′attività è inibita da cationi monovalenti > 150 mM, fosfato > 100 mM, solfato di ammonio > 100 mM o da guanidina HCl > 100 mM.
La nucleasi Benzonase è disponibile in grado ultrapuro (> 99% in SDS-PAGE) e puro (> 90%) alla concentrazione standard di 25-29 U/μL o elevata (HC) di 250 U/μL. Entrambe le preparazioni sono prive di proteasi rilevabili e hanno un′attività specifica > 1 × 106 U/mg di proteina. Il grado di purezza > 99% viene analizzato per la presenza di endotossine e contiene < 0,25 EU/1.000 unità. Questo prodotto è fornito come soluzione al 50% di glicerolo filtrata su filtro da 0,2 μm . Conservare a -20 C.
Endotossine totali: < 0.25 EU/1,000 units. Purity : > 90% con SDS-PAGE.
L′enzima è costituito da due subunità da 30 kDa ciascuna. E′ attivo in un intervallo di pH compreso tra 6 e 10, tra 0 e 42 °C e per l′attivazione necessita della presenza di Mg2+ 1-2 mM. L′enzima è attivo anche in presenza di detergenti ionici e non ionici, agenti riducenti, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e urea (l′attività relativa dipende dalle condizioni specifiche). L′attività è inibita da cationi monovalenti > 150 mM, fosfato > 100 mM, solfato di ammonio > 100 mM o da guanidina HCl > 100 mM.
La nucleasi Benzonase è disponibile in grado ultrapuro (> 99% in SDS-PAGE) e puro (> 90%) alla concentrazione standard di 25-29 U/μL o elevata (HC) di 250 U/μL. Entrambe le preparazioni sono prive di proteasi rilevabili e hanno un′attività specifica > 1 × 106 U/mg di proteina. Il grado di purezza > 99% viene analizzato per la presenza di endotossine e contiene < 0,25 EU/1.000 unità. Questo prodotto è fornito come soluzione al 50% di glicerolo filtrata su filtro da 0,2 μm . Conservare a -20 C.
Endotossine totali: < 0.25 EU/1,000 units. Purity : > 90% con SDS-PAGE.
Applicazioni
Utilizzato per rimuovere gli acidi nucleici dai campioni di proteine.
Azioni biochim/fisiol
Digerisce DNA ed RNA nativi o denaturati con calore.
Attenzione
Benzonase® Nuclease è un'endonucleasi geneticamente modificata prodotta da Serratia marcescens. Degrada tutte le forme di DNA ed RNA (a singolo o doppio filamento, lineare e circolare) mentre è priva di attività proteolitica. È efficace in un′ampia gamma di condizioni e possiede un′attività specifica straordinariamente elevata. L′enzima digerisce completamente gli acidi nucleici a oligonucleotidi che terminano con un 5′-monofosfato, della lunghezza di 2-5 basi (al di sotto del limite di ibridazione), condizione ideale per la rimozione degli acidi nucleici derivanti da proteine ricombinanti, che garantisce la conformità alle linee guida della FDA per la contaminazione con acidi nucleici. La capacità di Benzonase di idrolizzare rapidamente gli acidi nucleici fa dell′enzima una scelta eccellente per la riduzione della viscosità al fine di ridurre il tempo di trattamento e aumentare la resa proteica. Per esempio, l′enzima è compatibile con i reagenti per l′estrazione delle proteine BugBuster e PopCulture e può quindi essere aggiunto a questi reagenti per eliminare la viscosità e rimuovere gli acidi nucleici dagli estratti di E. coli.
L′enzima è costituito da due subunità da 30 kDa ciascuna. Agisce entro un intervallo di pH tra 6 e 10 e di temperatura tra 0 e 42 °C e necessita di 1-2 mM di Mg2+ per l′attivazione. L′enzima è attivo anche in presenza di detergenti ionici e non ionici, agenti riducenti, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e urea (l′attività relativa dipende da condizioni specifiche). L′attività è inibita da > 150 mM di cationi monovalenti, > 100 mM di fosfato, > 100 mM di solfato di ammonio o da > 100 mM di cloridrato di guanidina.
Nucleasi Benzonase è disponibile in grado ultrapuro (> 99% con SDS-PAGE) e puro (> 90%) alla concentrazione standard di 25-29 U/µL e a una concentrazione elevata (HC) di 250 U/µL. Entrambe le preparazioni sono prive di proteasi rilevabili e hanno un′attività specifica > 1 × 106 U/mg di proteina. Il grado di purezza > 99% viene analizzato in relazione alle endotossine e contiene< 0.25 EU/1000 units. The product is supplied as a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol. Store at -20°C.
Endotossine totali:< 0.25 EU/1,000 units.Purezza: > 90% con SDS-PAGE.
L′enzima è costituito da due subunità da 30 kDa ciascuna. Agisce entro un intervallo di pH tra 6 e 10 e di temperatura tra 0 e 42 °C e necessita di 1-2 mM di Mg2+ per l′attivazione. L′enzima è attivo anche in presenza di detergenti ionici e non ionici, agenti riducenti, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) e urea (l′attività relativa dipende da condizioni specifiche). L′attività è inibita da > 150 mM di cationi monovalenti, > 100 mM di fosfato, > 100 mM di solfato di ammonio o da > 100 mM di cloridrato di guanidina.
Nucleasi Benzonase è disponibile in grado ultrapuro (> 99% con SDS-PAGE) e puro (> 90%) alla concentrazione standard di 25-29 U/µL e a una concentrazione elevata (HC) di 250 U/µL. Entrambe le preparazioni sono prive di proteasi rilevabili e hanno un′attività specifica > 1 × 106 U/mg di proteina. Il grado di purezza > 99% viene analizzato in relazione alle endotossine e contiene< 0.25 EU/1000 units. The product is supplied as a 0.2 µm filtered solution in 50% glycerol. Store at -20°C.
Endotossine totali:< 0.25 EU/1,000 units.Purezza: > 90% con SDS-PAGE.
Definizione di unità
Un′unità è definita come la quantità di enzima che provoca un A260 di 1,0 in 30 minuti, che corrisponde alla digestione completa di 37 μg di DNA.
Note legali
BUGBUSTER is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
POPCULTURE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 2
Certificati d'analisi (COA)
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