Az Escherichia coli megkülönböztetése a kólibaktériumoktól
Jvo Siegrist
AnalytiX Volume 8 Article 5
BIOKÉMIAI Vizsgálatok, mint higiéniai indikátorok
Az Escherichia coli és a coliform baktériumok a higiéniai állapot fontos indikátorszervezetei.
A 2008 augusztusában az Egyesült Államokban felfedezett E. coli-szennyezett marhahús országos visszahívást váltott ki. Kiderült, hogy a forrás egy olyan beszállító volt, amely korábban már előfordult szennyezett marhahústermékekkel. A marhahúsban található E. coli gyakori forrásai az ürülékkel szennyezett állati tetemek, a vízellátás és/vagy egyéb higiéniai problémák. Még Svájcban is, ahol az ivóvíz szokatlanul tiszta, ritkán előfordulnak trágya által okozott székletszennyezéses esetek. Az ilyen kórokozók kimutatása kritikus fontosságú a higiénia fenntartása szempontjából.
- Az E. coli
- A E. coli jellemzői E. coli baktérium
- Teszttermékek a megkülönböztetéshez és azonosításhoz /a>
- Reagensek a differenciáláshoz és az azonosításhoz
Az E. COLI
E. coli egy aerob, pálcika alakú, mozgékony, Gram-negatív bélbaktérium, amely laktózt és más szénhidrátokat fermentál (1. táblázat). A kimutatás azért lehetséges, mert a baktérium a dextróz (D-glükóz) fermentálásával vegyes savakat (pl. tej-, ecet- és hangyasav) termel, amelyek metilvörös indikátor hozzáadásával láthatóvá válnak. A E. coli jelenlétének kimutatására számos más módszer is létezik. Voges és Proskauer például talált egy tesztet az acetoin és a 2,3-butándiol kimutatására, amelyek a Klebsiella és az Enterobacter glükóz erjesztésekor keletkeznek. Lúgos körülmények között ez a két vegyület diacetillé oxidálódik. A diacetil ezután reakcióba lép a kreatinnal (egy guanidin-származékkal), és rózsaszínes-vöröses színű vegyületként jelenik meg, vagy a-naftollal reagál, és cseresznyepiros színűnek tűnik.
Ezeknek a mikroorganizmusoknak a megkülönböztetésére és azonosítására rendelkezésre álló biokémiai tesztek széles skáláját kínáljuk.
1. táblázat: Szénhidrátok megkülönböztetésére szolgáló korongok (25 korongból álló egyedi csomagban; vagy 10 x 25 korongból álló csomagméretben kaphatók). Kulcs: [+] = pozitív reakció, sárga szín; [-] = negatív reakció az alábbiakban felsoroltak szerint.
Megjegyzés:
Az 1. szénhidrát az adonitolt, az arabinózt, a cellobiózt, a dextrózt és a dulcitolt jelöli
A 2. szénhidrát a fruktózt, a galaktózt, az inozitot, a laktózt és a maltózt
.br> A 3. szénhidrát a mannit, a mannóz, a melibióz, a raffinóz és a ramnóz
A 4. szénhidrát a szalicin, a szorbit, a szacharóz, a trehalóz és a xilóz
A E. coli baktérium jellemzői
A kölcsönhatások alapján néhány más jellemző enzim is kimutatható. A triptofánáz a triptofánt piruváttá, indollá és ammóniává hasítja; reagensek (Kovac és DMCA) segítségével a kutatók az indoltermelődést detektálhatják (1. ábra). A ß-galaktozidázt ONPG-vel (2-Nitrofenil ß-D-galaktopiranozid), egy kromogén szubsztráttal detektálják, amely a hasítás után sárgává válik. Továbbá a nitrát nitritté történő redukciós képessége kimutatható szulfanilsav és a-naftilamin hozzáadásával, ami vörös csapadékot (prontoszil) eredményez. Végül a lizin a E. coli lízin dekarboxiláz segítségével kadaverinre bomlik le. A lúgos reakció eredményeként az indikátor (brómkrezol-lila) színe sárgáról lilára változik.
1. ábra.Kovac-indolreakció (balról jobbra: üres, negatív, pozitív)
2. ábra.TSI agar: A balról balra lévő táptalaj organizmusok nélkül, majd a cső alján és a ferde felületen szélsőséges reakció; a második csőben balról a E. coli organizmusokra jellemző reakció látható.
Érdekes differenciálási eredményeket kaptunk a TSI Agar-fólia beoltásával. A laktóz, a szacharóz és a glükóz fermentációja során történő savképződés miatt a pH-szint általában csökken. A pepton lúgos termékeinek oxidatív dekarboxilációja esetén azonban a pH emelkedik. A pH-érték emelkedését jelzi a fenolvörös, amely savas környezetben narancsvörösről sárgára változik, lúgosításkor pedig mélyvörösre színeződik. E. coli a kémcső alján savas reakciót (sárga) és gázképződést, a ferde felületen pedig savas reakciót (sárga) mutat.
A E. coli fontos biokémiai reakcióinak áttekintése a 2. táblázatban található.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?