Diferenciační a identifikační média pro salmonely

Dnešní použití klasických kultivačních metod k identifikaci Salmonella, silného patogenu přenášeného potravinami

Kontaminace salmonelou je celosvětově druhou nejčastější příčinou onemocnění přenášených potravinami. Kontrola výskytu ohnisek Salmonella je důležitým úkolem pro potravinářské regulační orgány, restaurace a potravinářský průmysl obecně.

Rodina Salmonella zahrnuje více než 2 300 sérotypů bakterií, ale dva typy, Salmonella enteritidis a Salmonella typhimurium, jsou zodpovědné za přibližně polovinu všech lidských infekcí. Většina ohnisek nákazy Salmonella pochází z mléčných, drůbežích a masných výrobků, ale Salmonella se může množit téměř na všech potravinách. Zvláště rizikové je kuřecí maso, vejce a výrobky z nich.

Obrázek 1. Bakterie salmonely

Mikrobiologická kontrola v potravinářském průmyslu hraje zásadní roli při prevenci výskytu Salmonella. Testy a média používaná k identifikaci Salmonella využívají jedinečných aspektů fyziologie nebo biochemie Salmonella ve srovnání s jinými rody v rámci čeledi Enterobacteriaceae. Například bakterie rodu Salmonella jsou většinou fakultativní anaeroby, oxidáza negativní, kataláza pozitivní a gramnegativní tyčinky. Většina kmenů je pohyblivá a fermentuje glukózu s produkcí kyseliny i plynu. Média používaná v současné době k rozlišení a identifikaci Salmonella jsou stále založena na detekci fermentace sacharidů indikované indikátorem pH (viz také Tabulka 1 o schopnosti fermentace sacharidů), detekci proteolytické aktivity, produkci sirovodíku a selektivitě. Většina moderních médií také kombinuje některé z těchto detekčních systémů, aby byla média spolehlivější. Seznam nejběžnějších selektivních a diferenčních médií je uveden v tabulce 2.

Tabulka 1. Typická schopnost salmonel fermentovat sacharidy

	Kvašení		Kat. No.
Sacharidy	Kyselina	Kabohydrátové disky
Adonitol	-	-	55876
Arabinóza	+/-	+/-	80372
Celobióza	-	-	56481
Dextroza	+	+/-	63367
Dulcitol	+/-	+/-	73044
Fruktóza	+/-	+/-	53901
Galaktóza	+	+/-	89608
Inositol	+/-	+/-	89614
Laktóza	-	-	28816
Maltóza	+	+/-	77653
Mannitol	+	+/-	94438
Manosa	+/-	+/-	94445
Melibióza	+	+	93196
Rafinóza	-	-	94226
Rhamnose	+/-	+/-	93999
Salicin	-	-	92971
Sorbitol	+	+/-	93998
Sacharóza	-	-	94309
Trehalóza	+	+/-	92961
Xylóza	+	+/-	07411

Tabulka 2.Selektivní a diferenciální média pro salmonely (seznam není úplný. Další informace naleznete na sigma-aldrich.com/salmonella)

Značka	Kočka č.	Jméno
Sigma-Aldrich	A0715	Andrade Peptone Water
Sigma-Aldrich	28943	Andrade peptonová voda, Vegitone
Sigma-Aldrich	95388	Bismutit-sulfitový agar
Sigma-Aldrich	15835	BPL agar
Sigma-Aldrich	70134	Brilliant Green Agar, modifikovaný
Sigma-Aldrich	16026	Brilliant Green Phenol Red Lactose Sucrose Agar
Sigma-Aldrich	36408	Bromkrezolový purpurový bujón
Sigma-Aldrich	22520	China Blue Lactose Agar
Sigma-Aldrich	55420	CLED agar
Sigma-Aldrich	70135	DCLS Agar
Sigma-Aldrich	90035	DCLS Agar No. 2
Sigma-Aldrich	D2935	Dekarboxylázová bujónová báze, Moeller
Sigma-Aldrich	D7809	Deoxycholát citrátový agar
Sigma-Aldrich	E5399	Endo agar
Sigma-Aldrich	70137	ENDO Agar (Base)
Sigma-Aldrich	16447	Glukózo-bromkrezolový fialový agar
Sigma-Aldrich	51490	Hektoen Enteric Agar
Sigma-Aldrich	60787	Kliglerův agar
Sigma-Aldrich	61792	Leifson Agar
Sigma-Aldrich	66304	Lysin dekarboxylázový bujón
Sigma-Aldrich	62915	Lyzinový železitý agar
Sigma-Aldrich	70143	Mac Conkey Agar No 1
Sigma-Aldrich	19352	Mac Conkey Agar č. 1, Vegitone
Sigma-Aldrich	M8302, 94216	MacConkey Agar s krystalovou violetí, chloridem sodným a 0.15% žlučových solí
Sigma-Aldrich	70144	MacConkeyův bujón
Sigma-Aldrich	75717, 16377	MacConkey bujón fialový
Sigma-Aldrich	63014	MacConkey MUG Agar
MacConkey MUG Agar	51405	MacConkey-Agar (bez soli)
Sigma-Aldrich	69965	Mosselův bujón
Sigma-Aldrich	43052	Muller-Kauffmann tetrathionátový bujón, báze (ISO)
Sigma-Aldrich	75315	OF Test Nutrient Agar
Sigma-Aldrich	81648	Pril® Mannitol Agar
Sigma-Aldrich	04584	Rappaport Vassiliadis Broth acc. podle normy DIN EN ISO 6579:2002
Sigma-Aldrich	17173	Rappaport Vassiliadisův bujón, modifikovaný
Sigma-Aldrich	R0773	Rappaport Vassiliadis Medium
Sigma-Aldrich	92322	Rappaport Vassiliadis medium (báze), modifikované, polotuhé
Sigma-Aldrich	84368	Agar pro salmonely podle Önöze
Sigma-Aldrich	84370	Bujón k obohacení salmonel
Sigma-Aldrich	70153	Selenitový bujón (základní)
Sigma-Aldrich	84922	Sigma-Aldrich
Sigma-Aldrich	85438	SIM Medium
Sigma-Aldrich	85463	Simmons Citrate Agar
Sigma-Aldrich	85640	SS-Agar
Sigma-Aldrich	86352	TBG Broth
Sigma-Aldrich	88151	Tetrathionátový bujón
Sigma-Aldrich	88148	Bujón pro obohacení tetrathionátu podle Mullera-Kauffmanna
Sigma-Aldrich	44940	Trojnásobný cukerný železitý agar
Sigma-Aldrich	51463	Močovinový bujón
Sigma-Aldrich	42376	Fialově červený žlučový agar, Vegitone
Sigma-Aldrich	70189, 79873	Fialově červený žlučový glukózový agar
Sigma-Aldrich	17213	Fialově červený žlučový glukózový agar bez laktózy
Sigma-Aldrich	53605	Fialově červený žlučový glukózový agar bez laktózy, Vegitone
Sigma-Aldrich	41270	Fialově červený žlučový laktózo-dextrózový agar
Sigma-Aldrich	95273	VRB MUG Agar
Sigma-Aldrich	95586	XLD Agar
Sigma-Aldrich	76721	XLT4 Agar (Base)

Naše současná technologie navíc nabízí chromogenní média, která umožňují ještě spolehlivější a rychlejší identifikaci, protože detekují charakteristický enzym salmonel. Tyto reakce jsou založeny na štěpení chromogenního substrátu, které vede k viditelné změně barvy (viz tabulka 3).

Tabulka 3.Chromogenní média pro salmonely

Značka	Kočka č.	Jméno
Sigma-Aldrich	00563	HiCrome™ MM Agar
Sigma-Aldrich	90918	HiCrome™ RajHansovo médium, modifikované
Sigma-Aldrich	78419	HiCrome™ Salmonella Agar
Sigma-Aldrich
05538	HiCrome™ Salmonella Agar, vylepšený
Sigma-Aldrich	84369	Salmonella Chromogen Agar
Sigma-Aldrich	01993	Sada chromogenního agaru pro salmonely

Obrázek 2. HiCrome™ Salmonella Agar, vylepšený

Detekce sirovodíku Produkce sirovodíku mikroorganismy, jako je Salmonella

Velké množství bakterií může produkovat H₂S v malém množství z aminokyselin obsahujících síru v sacharidovém prostředí. V kombinaci s octanem olovnatým vytvoří H₂S černou sraženinu, čímž vznikne viditelná černě zbarvená reakce na papírovém proužku. Metoda s octanem olovnatým je velmi citlivá a umožňuje detekci stopových množství sirovodíku.

Test s proužky: Naočkujte peptonovou vodu (kat. č. 70179) podezřelým organismem. Mezi zátku a vnitřní stěnu zkumavky vložte nad naočkované médium papírový proužek octanu olovnatého a inkubujte při 35 °C po dobu 18-24 hodin. Pozitivní reakce se projeví zčernáním spodní části proužku. V případě negativní reakce by se nemělo objevit žádné zčernání (viz obrázek 3).

Obrázek 2.1. Testované organismy Testované organismy

Obrázek 3. Testovací proužky na sirovodík

Obrázek 4. Rychlý test založený na detekci rRNA

Materiály

Litujeme, vyskytla se neočekávaná chyba.

Network error: Failed to fetch