Molekulární klonování a exprese proteinů
Cílem molekulárního klonování je vložit gen zájmu (GOI) do plazmidového vektoru, což je kruhový kus DNA, který obsahuje různé prvky usnadňující klonování, selekci klonů a expresi proteinů. Výzkumníci často používají restrikční enzymy DNA a ligázu k vložení GOI in-frame do expresního vektoru pro následnou expresi proteinu. Tento vektor se pak vloží do buňky, která bude exprimovat protein kódovaný GOI, nebo se exprese proteinu provádí pomocí systémů bezbuněčné syntézy proteinů.
Po expresi proteinu lze studovat jeho funkci, protože ovlivňuje buněčnou signalizaci, morfologii nebo jiné aspekty v buňce. Případně lze protein exprimovat ve velkém množství, purifikovat a použít v mnoha navazujících aplikacích. Chcete-li získat další informace, prozkoumejte naši komplexní nabídku spolehlivých činidel a zdrojů, které jsou k dispozici v rámci klonování & expresní pracovní postupy pro systémy exprese proteinů hmyzu, bakterií a savců.
Přečtěte si více informací o
Související zdroje produktů
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
Cell-free protein synthesis rapidly produces recombinant proteins without cells, utilizing translation machinery from different cell types for efficiency.
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
- Brochure: Genomics
Streamline your molecular biology workflow.
Restrikční enzymy a enzymy modifikující DNA
Při molekulárním klonování vědci často používají dva obecné typy enzymů - restrikční enzymy pro řezání DNA a modifikační enzymy pro provádění modifikací nukleových kyselin, často před krokem ligace. Prozkoumejte naši širokou nabídku restrikčních enzymů a dalších modifikujících enzymů, jako je alkalická fosfatáza, proteáza, T7 RNA polymeráza, ribonukleáza A a T4 DNA ligáza, pro všechny vaše výzkumné potřeby.
Bezbuněčné expresní systémy a expresní vektory využívající promotory CMV a technologii značek FLAG®
Naše portfolio klonovacích a expresních systémů zlevňuje a zefektivňuje genetické inženýrství tím, že poskytuje kolekci univerzálních vektorů se zjednodušenými protokoly a klonovacími sadami. Vyberte si z naší široké nabídky klonovacích &; expresních systémů, včetně našeho Systém pro bezbuněčnou syntézu nebo expresi proteinů, jako je například sada pro bezbuněčnou expresi proteinů nové generace (pšeničné klíčky) (produkt č. CFPS700) a souprava ALiCE® (kat. č. AL0103000). Kromě toho objevte bakteriální a savčí expresní vektory FLAG® pro periplazmatickou nebo cytoplazmatickou expresi v přechodných nebo stabilních transfekčních systémech a s jistotou exprimujte svůj FLAG®.sup>® nebo sekvenci 3X FLAG® na N- nebo C-konci s místem pro štěpení enterokinázy (Ek), které v případě potřeby odstraní fúzní značku.
Novagen® pET System, SnapFast™ Vektory, Simplicon™ vektory a systémy pro expresi proteinů UCOE™
Všechny systémy E. coli expresní vektory a expresní vektory pro hmyz poskytují rezistenci vůči ampicilinu pro snadnou selekci pozitivních transformantů. Objevte systém Novagen® pET, zlatý standard pro klonování a expresi rekombinantních proteinů v bakteriální expresi. Rodina vektorů SnapFast™, vyvinutá společností Oxford Genetics, nabízí rychlý a snadný protokol umožňující přenos GOI z jednoho vektoru do druhého pomocí řezných míst SnapFast™, čímž vznikají vektory kompatibilní s hmyzími, kvasinkovými, bakteriálními & savčími expresními systémy. S naší technologií expresních vektorů UCOE™ (Ubiquitous Chromatin Opening Element) můžete dosáhnout gramů proteinu za méně než 30 dní ve stabilně transfekovaných savčích buňkách. Expresní technologie UCOE™ zabraňuje umlčení transgenu a poskytuje konzistentní, stabilní a vysokou úroveň genové exprese, až 20krát vyšší než konvenční vektory, bez ohledu na místo chromozomální integrace. Systém pro expresi proteinů Simplicon™ In Vivo je neintegrující genom, laditelný a syntetický samoreplikující se expresní systém na bázi RNA, který vytváří okamžitou, vysoce trvalou expresi proteinů více genů do transfekovaných lidských buněk bez rizika integrace genomu. Další informace naleznete v našem videu technologie Simplicon™ využívané pro efektivní generování lidských iPSC.
Reagencie a zdroje pro transformaci bakterií a kvasinek
Bakteriální transformace je proces vkládání cizí DNA do bakterií pomocí metod, jako je tepelný šok a elektroporace. Naše portfolio kompetentních buněk je navrženo pro optimální expresi proteinů i pro ty nejnáročnější rekombinantní proteiny. Prohlédněte si náš průvodce výběrem kompetentních buněk a vyberte si z řady nových bakteriálních kompetentních buněk pro širokou škálu aplikací, včetně exprese proteinů, rutinního nebo náročného klonování a generování knihoven. Kromě toho má exprese rekombinantních proteinů v Saccharomyces cerevisiae mnoho výhod, například jednoduché protokoly, použití základních činidel a škálovatelnost. Prozkoumejte mnoho dostupných produktů pro transformaci kvasinek jako součást pracovního postupu exprese proteinů. Naše kompetentní buňky NovaBlue®, optimalizované pro účinnost transfekce a uchování plazmidů, podporují vynikající přípravu knihoven a stabilitu plazmidů. Kompetentní buňky Novagen® jsou navíc navrženy tak, aby usnadňovaly správné skládání proteinů, zvýšenou rozpustnost nebo expresi cytotoxických proteinů. Mezi nejoblíbenější značky patří systémy Rosetta™, Origami™ a Overnight Express™.
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?