Detekce a diferenciace Staphylococcus Aureus na Baird Parker Agaru

Jvo Siegrist

Product Manager Microbiology,

AnalytiX Volume 10 Article 4

Baird Parker Agar se používá k izolaci a diferenciaci koagulázopozitivních stafylokoků v potravinách a léčivých přípravcích podle metody Bairda Parkera.

Jako zdroj dusíku pro organismus se do média přidává kaseinový pepton a masový extrakt. Kvasničný extrakt poskytuje dusík i další důležité živiny, jako je komplex vitaminu B12. Médium obsahuje lithium a tellurit, které inhibují většinu kontaminující mikroflóry, zatímco glycin a pyruvát zvyšují růst stafylokoků. Stafylokoky mohou redukovat tellurit na tellurid, což má za následek šedé až černé zbarvení kolonií. Po přidání vaječného žloutku se médium stává žlutým a mírně neprůhledným. Kolem kolonií koaguláza-pozitivního Staphylococcus aureus se vytvoří čiré halo a při další inkubaci může vzniknout neprůhledná zóna v důsledku reakce vaječného žloutku s lecitinázou (lipolytická aktivita). Předpokládá se, že šedočerné kolonie a aureola na tomto médiu svědčí o koagulázopozitivních stafylokocích, protože byla zjištěna vysoká korelace mezi koagulázovým testem a lipofilní aktivitou. Staphylococcus aureus a některé kmeny Staphylococcus saprophyticus (Shaw et al.[5]) mohou vykazovat obě tyto vlastnosti, ale lze je od sebe snadno odlišit podle rozdílné doby, kdy se halo vytvoří.

Baird Parker Agar Base

K detekci koagulázové aktivity lze použít Baird Parker Agar s králičím plazmatickým fibrinogenem. Koagulázopozitivní organismy se jeví jako šedé až černé kolonie v důsledku redukce telluritu a jako neprůhledné halo v důsledku přeměny fibrinogenu na fibrin koagulázou. Měly by se počítat pouze destičky s méně než 100 charakteristickými koloniemi. Použití tohoto média eliminuje potřebu dodatečného testu na koagulázu.

Médium:

• 1.05406
• 79893
• 41712

Doplňky:

• emulze z vaječného žloutku s telluritem (kat. výst. Č. 75208)
• RPF Supplement (doplněk králičí plazmy s fibrinogenem; kat. č. 05939)
• Egg-Yolk Tellurite Emulsion Sterile, 20% 1.03785.0001

Mikroorganismy pro testování výkonnosti:

Číslo materiálu	Druh produktu (všechny koncentrace)	Číslo WDCM.	CFU
CRM06571L-10EA	Staphylococcus aureus	Podrobněji:	Staphylococcus aureus	30-120
CRM06571M-10EA	Staphylococcus aureus	Podrobněji: Staphylococcus aureus	500-50 000
VT000357-10EA	Staphylococcus aureus	50 000-150 000
VT000322-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	15-80
VT000323-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	80-130
VT000324-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	130-300
VT000326-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	1,000-10,000
VT000327-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00032	50 000-150 000
VT000342-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	15-80
VT000343-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	80-130
VT000346-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	1,000-10,000
VT000347-10EA	Staphylococcus aureus subsp. aureus	00034	50 000-150 000

Číslo materiálu	Výběrový druh	Číslo WDCM.	CFU
VT000127-10EA	Escherichia coli	00012	50 000-150 000
VT000137-10EA	Přípravek na výrobu a použitíEscherichia coli	00013	50,000-150,000

Materiál č.	Specifický druh	WDCM č.	CFU
VT001596-10EA	Staphylococcus saprophyticus	00159	1,000-10,000

Odkazy

1. BAIRD-PARKER AC. 1962. AN IMPROVED DIAGNOSTIC AND SELECTIVE MEDIUM FOR ISOLATING COAGULASE POSITIVE STAPHYLOCOCCI. 25(1):12-19. https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.1962.tb01113.x

2. Köhler W. 1975. E. H. Lennette, E. H. Spaulding and J. P. Truant (Editors), Manual of Clinical Microbiology (2nd Edition). 970 S., 241 Abb., 189 Tab., 1 Tafel. Washington 1974: American Society for Microbiology. $ 15.00. Z Allg Mikrobiol. 15(4):303-303. https://doi.org/10.1002/jobm.19750150418

3. Schau H. 1986. J. F. MacFaddin, Media for Isolation - Cultivation - Identification - Maintenance of Medical Bacteria, Volume I. XI + 929 S., 163 Abb., 94 Tab. Baltimore, London 1985. Williams and Wilkins. $ 90.00. ISBN: 0-683-05316-7. J Basic Microbiol. 26(4):240-240. https://doi.org/10.1002/jobm.3620260414

4. Niskanen A, Aalto M. 1978. Comparison of selective media for coagulase-positive enterotoxigenic Staphylococcus aureus.. 35(6):1233-1236. https://doi.org/10.1128/aem.35.6.1233-1236.1978

5. Shaw C, Stitt JM, Cowan ST. 1951. Staphylococci and their Classification. Journal of General Microbiology. 5(5):1010-1023. https://doi.org/10.1099/00221287-5-5-1010

6. ISO 6888-1:1999; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulasepositive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/23036

7. ISO 6888-2:1999; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 2: Technique using rabbit plasma fibrinogen agar medium.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/25571.html

8. ISO 6888-3:2003; Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the enumeration of coagulasepositive staphylococci (Staphylococcus aureus and other species) – Part 3: Detection and MPN technique for low numbers.. [Internet]. Available from: https://www.iso.org/standard/33147.html