Kultivační média pro kompendiální metody

Farmakologické zkoušky jsou standardizované metody pro mnoho farmaceutických surovin a hotových výrobků. Testování a dodržování těchto norem podrobně popsaných v rámci kompendiálních metod je základním požadavkem pro celosvětový vývoj, uvolňování a distribuci farmaceutických složek a léčivých přípravků. Kompendiální zkoušky se provádějí za účelem stanovení kompatibility a bezpečnosti léčiv nebo pro běžnou kontrolu kvality. 

MIKROBIOLOGICKÁ KONTROLA KVALITY NESTERILNÍCH VÝROBKŮ

Tři mezinárodně nejvýznamnější lékopisy (Ph Eur/JP/USP) zveřejnily v roce 2009 harmonizované verze svých kapitol o mikrobiologickém zkoušení nesterilních výrobků. Kromě toho je vydání Čínského lékopisu z roku 2016 z větší části harmonizováno, pokud jde o složení média a kritéria výkonnosti, ačkoli je třeba provádět zkoušky na podporu růstu s kmeny z čínské sbírky kmenů. Tyto metody se zabývají celkovým aerobním počtem (TAMC a TYMC) a testem na specifikované mikroorganismy.

Naše portfolio kultivačních médií pro mikrobiální vyšetření nesterilních výrobků je v souladu s harmonizovaným lékopisem. Vzhledem k tomu, že se kompendiální metody mění, můžete si být jisti, že je důkladně sledujeme a veškeré změny ve složení nebo testování výkonnosti budou rychle implementovány, takže se nebudete muset obávat o shodu našich médií s předpisy. 

Nabízíme výběr produktů pro všechna kultivační média a látky potřebné pro:

• Příprava vzorků
• Testy na stanovení počtu mikroorganismů
• Testy na stanovené mikroorganismy

Vyberte si z naší nabídky produktů pro podporu vašich kompendiálních lékopisných zkoušek:

• Ředicí média
• Dehydratovaná kultivační média (DCM)
• Kultivační média - destička připravená k použití
• Kultivační média - tekutina připravená k použití
• Neutralizační činidla

MIKROBIOLOGICKÁ KONTROLA KVALITY NESTERILNÍCH VÝROBKŮ

Tři mezinárodně nejvýznamnější lékopisy (Ph Eur/JP/USP) vydaly v roce 2009 harmonizované verze svých kapitol o mikrobiologickém vyšetření nesterilních výrobků. Kromě toho je vydání Čínského lékopisu z roku 2016 z větší části harmonizováno, pokud jde o složení média a kritéria výkonnosti, ačkoli je třeba provádět zkoušky na podporu růstu s kmeny z čínské sbírky kmenů. Tyto metody se zabývají celkovým aerobním počtem (TAMC a TYMC) a testem na specifikované mikroorganismy.

Naše portfolio kultivačních médií pro mikrobiální vyšetření nesterilních výrobků je v souladu s harmonizovaným lékopisem. Vzhledem ke změnám kompendiálních metod si můžete být jisti, že je důkladně sledujeme a veškeré změny ve složení nebo testování výkonnosti budou rychle implementovány, takže se nebudete muset obávat o soulad našich médií s předpisy. 

FARMAKOPEJSKÉ KOMPENDIÁLNÍ TESTOVÁNÍ

Regulační orgány musí zavést testování léčivých přípravků a řídit se příslušnými lékopisnými metodami nebo validovanými metodami.

Evropské ředitelství pro kvalitu léčiv a zdravotní péče (2017)

Evropský lékopis. 9. vydání. Kapitola 2.6.12 Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: Kapitola 2.6.13 Mikrobiologické zkoušení nesterilních výrobků: Zkouška pro specifikované výrobky. Strasbourg, Francie. 

Japonské ministerstvo zdravotnictví, práce a sociálních věcí (2016)

Japonský lékopis. 17. vyd. Kapitola 4.05 Mikrobiologická limitní zkouška I. Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: Celkový počet životaschopných aerobů a II. Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: Zkouška pro specifikované výrobky. Japonské ministerstvo zdravotnictví, práce a sociálních věcí. Tokio, Japonsko. 

Farmakopeální úmluva Spojených států amerických (2014)

Farmakopea Spojených států amerických 38/Národní lékopis 33, Supp. 2. Kapitola <61> Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: Kapitola <62> Mikrobiologické vyšetření nesterilních výrobků: Zkouška na stanovené výrobky. Rockville, Md., USA.

PŘÍPRAVA PRO KOMPENZAČNÍ ZKOUŠKU 

Výběr použitého ředicího média a přísad závisí na vlastnostech zkušebního vzorku. Výrobky s antimikrobiálními vlastnostmi lze neutralizovat použitím neutralizačních činidel. 

Tabulka 1. Produkty používané jako ředidla a neutralizační činidla při přípravě vzorků.

Střední/ Substance	Předpokládané použití
Buffered Sodium Chloride Roztok peptonu o pH 7.0 Roztok fosfátového pufru pH 7.2 Sojový bujón s kaseinem	Ředidla pro všechny netukové výrobky, rozpustná nebo nerozpustná ve vodě
Polysorbát 80	Produkty nerozpustné ve vodě; Přidává se na pomoc při suspendování látek s špatnou smáčivostí tukových produktů. Neutralizuje QAC, jód a parabeny
Izopropylmyristát	Ředidla pro mastné výrobky
Lecitin	Transdermální náplasti. Neutralizují kvartérní amoniové sloučeniny (QAC), parabeny a bis-biguanidy
Vodík siřičitan sodný	Neutralizující glutaraldehyd a rtuťnaté látky
Glycin	Přípravek na neutralizaci glutaraldehydu a rtuťnatých látek
Neutralizace aldehydů
Tioglykolát	Neutralizace rtuťnatých látek
Thiosíran	Neutralizuje rtuťnaté látky, halogeny a aldehydy

KOMPENZAČNÍ METODY PRO MIKROBIÁLNÍ ENUMERACI

Mikrobiální početní testy jsou kvantitativní metody pro stanovení úrovně kontaminace mezofilních bakterií a plísní, které rostou za aerobních podmínek ve farmaceutickém výrobku. Testy zahrnují zjišťování celkového počtu aerobních mikroorganismů (TAMC) a celkového počtu kvasinek a plísní (TYMC). Nejběžnější metodou sčítání je membránová filtrace, počet na destičkách nebo nejpravděpodobnější počet (MPN), přičemž výběr metody závisí na testovaném výrobku.

Před výběrem metody je třeba prokázat její vhodnost v přítomnosti výrobku. To zahrnuje přípravu vhodných testovacích kmenů, testy podpory růstu kultivačních médií a testy vhodnosti metody počítání v přítomnosti výrobku.

Tabulka 2. Vhodnost média pro testované kmeny

Testovací kmeny	Příprava testovacích kmenů	Podpora růstu	Příprava testovacích kmenů
Staphylococcus aureus/i>	Sojový kaseinový digest agar nebo bujón	Sojový kaseinový digest agar nebo bujón	Sojový kaseinový digest agar (MPN) nebo bujón
Pseudomonas aeruginosa	Agar nebo bujón s obsahem sójového kaseinu	Agar nebo bujón s obsahem sójového kaseinu	Sojový kaseinový digesční agar (MPN) nebo bujón
Bacillus subtilis	Soyaan Casein Digest Agar nebo bujón	Sojový kaseinový digesční agar nebo bujón	Sojový kaseinový digesční agar (MPN) nebo bujón
PodrobnostiCandida albicans	Sabouraudův dextrózový agar nebo bujón	Sojový kaseinový digesční agar (TAMC) Sabouraudův dextrózový agar (TYMC)	Sojový kaseinový digesční agar (TAMC)/p>	Sojový kaseinový digesční agar (TAMC) Sabouraudův dextrózový agar (TYMC)
Sabouraudův dextrózový agar nebo bramborový dextrózový agar a polysorbát 80 (volitelně)	Sojový kaseinový digestový agar (TAMC) Sabouraudův dextrózový agar (TYMC)	/p>	Sojový kaseinový digesční agar (TAMC) Sabouraudův dextrózový agar (TYMC)

Obrázek 1. Schéma pro testování mikrobiálního počtu mezi 1. TAMC: na sójovém kaseinovém digesčním agaru a 2. TYMC: Smíšený růst kvasinek a plísní na Sabourated Dextrose Agar. A) Soybean Casein Digest Agar B) Soybean Casein Digest Broth C) Sabouraud Dextrose Agar D) Sabouraud Dextrose Agar with Chloramphenicol*

*Může být použit k potlačení růstu bakterií ohrožujících překročení kritérií přijatelnosti TYMC.

Testy na specifikované mikroorganismy

V závislosti na mikrobiologické specifikaci jakosti každého nesterilního léčivého přípravku je výrobce povinen stanovit nepřítomnost nebo omezený výskyt následujících sedmi organismů:

1. Gram-negativní bakterie tolerantní k žluči
2. Escherichia coli
3. Salmonella
4. Pseudomonas aeruginosa<./i>
5. Staphylococcus aureus
6. Zlatý stafylokok
Clostridia
7. Candida albicans

Tyto organismy slouží jako obecné indikátorové organismy, ale v závislosti na povaze výrobku, jeho určeném použití, skupině příjemců a způsobu aplikace mohou být relevantní i jiné patogenní mikroorganismy. Následující přehled požadovaných médií se omezuje na výslovné požadavky lékopisu.

Organismus:

Gram-negativní bakterie tolerantní k žluči

Ředění / obohacení:
Sójový kaseinový bujón
Obohacení enterobakterií
Mosselův bujón

Subkultivace:
Violet RedBile Glucose Agar

Organismus:

Escherichia coli

Ředění / obohacení:
Sójový kaseinový bujón
MacConkeyho bujón

Subkultivace:
MacConkey Agar

Organismus:

Salmonella

Ředění / obohacení:
Sójový kaseinový digesční bujón
Rappaport-Vassiliadisův
Salmonella Enrichment Broth

Subkultivace:
Xylose Lysine Deoxycholate Agar

Organismus:

Pseudomonas aeruginosa

Ředění / obohacení:
Sójový kaseinový bujón

Subkultivace:
Cetrimidový agar

Organismus:

Staphylococcus aureus

Ředění / obohacení:
Sójový kaseinový bujón

Subkultivace:
Mannitol Salt Agar

Organismus:

Candida albicans

Ředění / obohacení:
Sabouraudův dextrózový bujón

Subkultivace:
Sabouraudův dextrózový agar

Organismus:

Klostridie

Ředění / obohacení:
Zesílené médium pro klostridie

Subkultivace:
Columbia Agar

.