Typy médií v mikrobiologii
Mnoho bakterií, kvasinek a plísní, které se vyskytují v přírodě, lze pěstovat i v laboratoři. Kultivační média používaná k tomuto účelu musí kromě vody obsahovat živiny, které mikroorganismy potřebují k růstu, zejména
- zdroj energie (obvykle cukry)
- použitelné zdroje prvků potřebných pro biosyntézu a metabolismus (zejména dusík, síru a fosfor)
Tento článek vysvětluje, jak jsou různé typy kultivačních médií v mikrobiologii klasifikovány na základě kritérií, jako jsou:
Konzistence:
Nejčastěji používaná kultivační média pro mikroorganismy jsou tekutá média nebo živné bujóny obsahující živiny. V těchto bujónech mikroorganismy obvykle rostou exponenciálně, dokud není růst omezen buď nedostatečnou dostupností živin, nebo nahromaděním látek inhibujících růst.
Polotuhá média naproti tomu umožňují růst a izolaci jednotlivých mikrobiálních kolonií na jejich povrchu. Každá kolonie pochází z jedné kolonie tvořící jednotku (CFU), obvykle z jedné bakterie. Proto se předpokládá, že všechny buňky v kolonii jsou stejného kmene a druhu. Pevná kultivační média se připravují přidáním 1 až 2 % agaru, směsi agarózy a agaropectinu řasového původu, kterou dokáže rozložit (zkapalnit) jen velmi málo bakterií. Tato média se autoklávují, ochladí na teplotu přibližně 45 °C a následně se nalijí do Petriho misek, kde se ochladí a ztuhnou. Želatinová hmota dodává vodu a živiny mikroorganismům, které jsou naočkovány na povrch agaru.
Polotuhá média se připravují s nižší koncentrací agaru 0,2 až 0,5 %. Mají měkkou, pudinkovou konzistenci a používají se ke kultivaci mikroaerofilních bakterií nebo ke stanovení pohyblivosti bakterií kultivací v bodových zkumavkách a musí se s nimi manipulovat ve svislé poloze. Polotuhá média lze použít k rozlišení tyfu a bacilů tlustého střeva.
Pohodlí:
Média připravená k použití a dehydratovaná média jsou pohodlnou volbou pro mikrobiologické laboratoře. Kapalná média jsou snadno sterilizovatelná a dodávají se v plastových sáčcích, zkumavkách a lahvích různých velikostí, zatímco pevná média se snadno nalévají do Petriho misek a šikmých zkumavek nebo do větších lahví. V případě agarových médií v lahvích je před nalitím na agarové desky nutné jejich opětovné roztavení a ochlazení na 44-47 °C.
Dehydratovaná kultivační média jsou naproti tomu komerčně dostupná v dlouhodobě stabilní formě (až 5 let), buď v prášku, nebo v granulích, které obsahují všechny složky kultivačních médií kromě vody. V mikrobiologické laboratoři se tato dehydratovaná média musí před použitím rozpustit ve vodě a autoklávovat.
Kultivační média na vyžádání -. díky našemu inovativnímu systému ReadyStream®, který znovuobjevil přípravu a dávkování médií, můžete připravit a vydat až 100 litrů předehřátých kultivačních médií na vyžádání. Systém naředí koncentrovaná média sterilní vodou na správnou koncentraci a dávkuje média do vaku na vzorky bez nutnosti dalších kroků.
Naše portfolio zahrnuje širokou škálu dehydratovaných kultivačních médií v prášku nebo granulích. Nabízíme readyplate 90 - a 55mm agarové plotny, lahvičky s tekutými médii, zkumavky nebo ampule o objemu 2 ml, bujóny a oplachové tekutiny pro vaše aplikační potřeby.
Selektivita: Selektivní média, obohacená a obohacující růstová média
Selektivní média umožňují růst pouze určitému spektru organismů, například všem bakteriím rodu Enterobacteriaceae nebo všem bakteriím rodu Salmonella. Selektivity se dosahuje složením média tak, aby bylo optimální pro růst požadovaných mikroorganismů a/nebo nepříznivé pro jiné organismy. To může zahrnovat přidání antibiotik, vysoké koncentrace solí, nízké pH nebo inhibitorů, jako jsou například žlučové soli. Selektivní média v mikrobiologii jsou zvláště užitečná tam, kde je požadovaný organismus pouze jedním z mnoha v inokule. Příkladem selektivního média je agar s manitolovou solí. Obsahuje vysokou koncentraci chloridu sodného, který inhibuje růst většiny organismů, ale umožňuje růst stafylokokům.
Obohacená média jsou naproti tomu poloselektivní: obsahují doplňky, jako je krev, sérum a vaječný žloutek, které zvyšují růst rychlých bakterií mezi těmi nenáročnými. Zatímco obohacená média se obvykle dodávají v agarových destičkách, obohacená média jsou určena pro kultivaci v tekutinách. Tato média také zvýhodňují růst určitého mikroorganismu oproti ostatním ve vzorku. Obohacování se často provádí proto, aby byl k dispozici dostatečný materiál organismu pro následnou detekci, izolaci a/nebo identifikaci.
Objevte vysoce kvalitní mikrobiální kultivační média pro vaše požadavky na mikrobiální testování.
Složení:
Média pro všeobecné použití a syntetická kultivační média
Média pro všeobecné použití (známá také jako základní nebo komplexní média) jsou běžná kultivační média, která mikrobiologické laboratoře používají ke kultivaci širokého spektra mikroorganismů. Obsahují komplexní organické složky, jako jsou kvasinky, živočišný nebo rostlinný materiál, které nejsou chemicky přesně určeny, takže se jejich složení v jednotlivých šaržích mírně liší. Tato média se používají ke kultivaci nestařeckých mikroorganismů, které nepotřebují další růstové živiny. Mezi běžně používaná univerzální média v mikrobiologické laboratoři patří živný agar a bujón, peptonová voda a také tryptický sójový bujón a agar.
Syntetická média jsou naproti tomu zcela složena z látek, které jsou chemicky známé. Tato média se používají ke studiu fyziologie, metabolismu a nutričních požadavků určitých mikroorganismů.
Indikační vlastnosti: Diferenciační média
Diferenciační média (neboli indikační média) obsahují látky, které vedou k tomu, že kolonie určitých organismů získají charakteristický vzhled. Tato média tak umožňují mikrobiologovi rozlišit různé druhy mikroorganismů na stejné agarové plotně. Příkladem diferenciálních médií je krevní agar. Pokud je krevní agar naočkován smíšenou kulturou bakterií, mohou některé z nich produkovat enzymy, které hemolyzují obsažené červené krvinky a vytvářejí kolem kolonií hemolytickou zónu. To pomáhá rozlišit hemolytické a nehemolytické bakterie. Existují také diferenciační média, která obsahují pH indikátory, které mění barvu, pokud například bakteriální druh během růstu produkuje kyselinu, která snižuje pH média.
Objevte vysoce kvalitní mikrobiální kultivační média pro vaše požadavky na mikrobiální testování.
Obsah kyslíku:
Anaerobní bakterie snášejí málo kyslíku nebo nesnášejí žádný kyslík, proto může být nutné snížit obsah kyslíku v jejich médiích fyzikálními nebo chemickými prostředky. Vaření médií a přidávání redukčních činidel, jako je thioglykolát sodný, pomáhá zbavit tato média rozpuštěného kyslíku. Typickým způsobem, jak zabránit přístupu kyslíku během inkubace, je utěsnit média sterilním tekutým parafínem. Anaerobní kultivační média lze také použít ke studiu anaerobního metabolismu fakultativních anaerobů, tj, mikroorganismy, které rostou aerobně, pokud je přítomen kyslík, ale v nepřítomnosti kyslíku přecházejí na fermentaci.
Objevte vysoce kvalitní mikrobiální kultivační média pro vaše požadavky na mikrobiální testování.
Safekeeping:
Přepravní a skladovací média
Vzorky nebo vzorky obsahující mikroorganismy musí být často přepravovány mezi mikrobiologickými laboratořemi nebo skladovány, aby mohly být znovu použity po týdnech, měsících nebo dokonce letech. Zvolená média proto musí zachovat životaschopnost mikroorganismů. Během přepravy mikrobiálních vzorků se koncentrace organismů nesmí měnit, čehož se dosáhne tím, že se zabrání jejich množení. Proto většina transportních médií postrádá obvyklé složky kultivačních médií a obsahuje pouze látky, které nepodporují růst mikrobů, například pufry a soli. Během delšího skladování se bakterie pravidelně podkulturují na čerstvě připravená kultivační média. Pro dlouhodobé uchovávání je možné většinu mikrobů lyofilizovat (vysušit mrazem).
Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.
Nemáte účet?