Referenční standardy NMR

Vhodné pro kvalifikaci přístrojů a ověřování výkonu moderních NMR přístrojů

V posledním desetiletí se rozšířila využitelnost spektroskopie pomocí nukleární magnetické rezonance (NMR). Tradičně byla NMR spektroskopie především kvalitativní metodou používanou pro strukturní identifikaci. Se zavedením přístrojů NMR s vysokým polem (600 MHz a vyšším) se NMR stále častěji používá v kvantitativních aplikacích s citlivostí v řádu částic na miliardu. Tyto aplikace zahrnují vazebné studie pro screening léčiv, identifikaci metabolitů, testování uvolňování cGMP a stopovou analýzu nečistot, například zbytkových rozpouštědel. Současně se od analytických laboratoří vyžaduje, aby prokázaly přísnější kontrolu přístrojů, protože se zvýšila očekávání zákazníků týkající se systémů kvality. Normy ISO-9001 a validace zařízení cGMP vyžadují, aby spektroskopista prokázal konzistentní a spolehlivý výkon přístroje. To vedlo k potřebě používat referenční standardy NMR k zajištění správné výkonnosti přístroje v kvantitativních aplikacích.

Zajištění kvality výkonnosti NMR přístrojů obvykle zahrnuje metody instalační kvalifikace (IQ) a provozní kvalifikace (OQ), které jsme podpořili prodejem svých činidel a standardů NMR. Pro získání smysluplných kvantitativních výsledků je však nezbytná výkonnostní kvalifikace (Performance Qualification, PQ), která umožňuje uživateli rutinně ověřovat výkonnost přístroje. Všechny tři metody zajišťují výkonnost přístroje v každé fázi, od počáteční instalace a provozní funkčnosti ve zvoleném prostředí až po spolehlivý výkon při rutinním používání. Jsme zavedeným dodavatelem standardů a činidel pro komunitu NMR. Nabízíme také širokou škálu NMR referenčních standardů potřebných k ověření výkonu přístroje. Tyto standardy umožňují uživateli sledovat klíčové provozní parametry, jako je pw90, citlivost, rozlišení a tvar čáry (viz Tabulka 1).

Citlivost a pw90

Standard citlivosti ¹H (0.1% ethylbenzen / 0,01% TMS / CDCl₃) je široce používán komunitou NMR k vyhodnocení poměru signálu k šumu (SNR) v rozsahu 3 až 7 ppm pro různé přístroje NMR (viz Obrázek 1). Aby bylo možné přesně vyhodnotit SNR, a tedy i výkonnost přístroje, je třeba se vyhnout falešným píkům z nečistot. Proto je důležité používat vysoce čistá činidla a rozpouštědla. Tento standard se rovněž doporučuje pro stanovení šířky 90stupňového pulzu (pw90), což je zásadní parametr pro každý NMR experiment. Pro ¹³C citlivost je mezi spektroskopisty preferovaným průmyslovým standardem 40% p-dioxan/benzen-d₆. Používá se také pro ¹³C ověření tvaru linie. Mějte na paměti, že některé aspekty vhodnosti systému, jako je tvar čáry a citlivost, jsou také ovlivněny přesností. Ta přímo souvisí s přípravou vzorku a přesností, která je spojena se samokonzistencí mezi integrovanými signály uvnitř molekuly¹. Použití našich referenčních standardů NMR eliminuje nejistotu při přípravě vzorku při hodnocení výkonnosti přístroje. Naše skupina stabilních izotopů má dlouhou historii dodávání NMR referenčních standardů pro kvalifikaci přístrojů. Máme k dispozici vysoce kvalitní materiály, pečlivou přípravu a postupy kontroly kvality, abychom uživateli poskytli spolehlivé a vysoce kvalitní standardy.

Obrázek 1. Náš standard citlivosti na proton (1H) (0,1 % ethylbenzen / 0,01 % TMS / CDCl3)

Tvar čáry

Dalším zásadním parametrem pro NMR spektroskopistu je homogenita magnetického pole, která se projevuje tvarem čáry NMR signálu. K prokázání toho, že NMR přístroj splňuje specifikace tvaru linie uvedené výrobcem, se používá ¹H standard tvaru linie (1% nebo 5% chloroform / aceton-d₆). K dosažení určených hodnot je nutné optimalizované stínování NMR přístroje. Šířka čáry se měří při třech výškách píku: 50 %, 0,55 % a 0,11 % (viz obrázek 2) a naměřené šířky píků se porovnají se specifikacemi výrobce, aby se buď prvotně kvalifikoval přístroj, nebo ověřila jeho výkonnost. Jak již bylo zmíněno, poskytujeme také referenční standardy NMR pro vyhodnocení tvaru signální linie ¹³C (40% p-dioxan / benzen-d₆). Používá se podobně jako standard tvaru protonové čáry k ověření výkonu přístroje. Pokud při rutinním použití tvar čáry nesplňuje očekávání uživatele, může to být způsobeno nehomogenitou pole nebo rezonancí případné nečistoty překrývající analyt. Ověření výkonu pomocí opakovaně použitelného NMR referenčního standardu tyto proměnné odstraňuje a umožňuje spektroskopistovi porovnat výsledky s historickým výkonem přístroje.

Obrázek 2. Protonový (1H) standard tvaru čáry (1% chloroform / aceton-d6)

Rozlišení

Rozlišení přímo ovlivňuje separaci píků, a proto je spojeno s problémy citlivosti a rozšiřování čar. Pro ¹H NMR se rozlišení kontroluje pomocí 1% 1,2-dichlorbenzenu / acetonu-d₆. Ostrost a rozlišení píků jsou důležité pro nízkoúrovňové analýzy, zejména pokud se testuje směs.

Snažíme se poskytovat NMR standardy a činidla nejvyšší kvality a udržovat si vedoucí postavení jako důvěryhodná značka v komunitě NMR. Disponujeme kombinovanými znalostmi a zkušenostmi, které nám umožňují dodávat standardy potřebné k zajištění správné kvalifikace přístrojů a ověření jejich výkonu. Hledáme oddělení, máme nadšení a zdroje pro neustálé rozšiřování nabídky našich produktů. Ačkoli je kvantitativní NMR obvykle spojována s ¹H NMR, stále se rozšiřují aplikace v ¹⁹F NMR a ³¹P NMR. Naše skupina stabilních izotopů také poskytuje referenční standardy NMR pro ověření citlivosti fluoru a fosforu a další aplikace. Referenční standardy NMR jsou také k dispozici v několika velikostech zkumavek od 3 mm x 8" do 10 mm x 8". NMR stále nachází nové a zajímavé aplikace pro řešení dnešních analytických výzev. Spolehněte se na nás, že vám poskytneme relevantní a vysoce kvalitní činidla nezbytná k zajištění spolehlivých NMR analýz. Kromě referenčních standardů nabízíme mnoho dalších produktových řad pro NMR, včetně:

• Deuterovaná rozpouštědla pro NMR (chloroform-d, methanol-d₄,deuteriumoxid, dimethylsulfoxid-d₆) 
• Značené produkty pro syntézu 
• Derivatizační činidla 
• NMR zkumavky, čisticí prostředky a příslušenství (značky Wilmad, Norell, Shigemi) 
• ¹³C a ¹H FT-NMR knihovny s prohlížečem spekter v textové verzi a na CD-ROMu 
• Referenční knihy a software   
  

Prosím, navštivte naši webovou stránku NMR Reference Standard pro úplný seznam produktů.

Odkazy

1. Maniara G, Rajamoorthi K, Rajan S, Stockton GW. 1998. Method Performance and Validation for Quantitative Analysis by1H and31P NMR Spectroscopy. Applications to Analytical Standards and Agricultural Chemicals. Anal. Chem.. 70(23):4921-4928. https://doi.org/10.1021/ac980573i