Protokol o připojení buněk s poly-L-lysinem

Připevnění buněk k povrchu pomocí poly-lysinu

Poly-L-lysin je nespecifický faktor pro přichycení buněk a je užitečný pro podporu přilnavosti buněk k pevným substrátům tím, že zvyšuje elektrostatickou interakci mezi záporně nabitými ionty buněčné membrány a povrchem kultury. Po absorpci na povrch kultury poly-lysin zvyšuje počet kladně nabitých vazebných míst pro buňky. Následující protokol se vztahuje na produkty s čísly P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 a P5899. 

Optimální podmínky musí být stanoveny pro každou buněčnou linii a aplikaci.

1. Přidejte 50 ml sterilní vody vhodné pro tkáňové kultury k 5 mg poly-lysinu.
2. Asepticky pokryjte povrch kultury 1,0 ml/25 cm²  (pouze). Jemně pohupujte, abyste zajistili rovnoměrné pokrytí povrchu kultury.
3. Po 5 minutách odstraňte roztok aspirací a důkladně opláchněte povrch sterilní vodou určenou pro tkáňové kultury.
4. Před zavedením buněk a média nechte zaschnout alespoň 2 hodiny.

*POZNÁMKA: Krok 1 není nutný pro roztoky poly-lysinu (P4707 a P4832).