No, this ready mix has typical cycling parameters for 0.2–2 kb fragments
P2893
JumpStart™ Taq ReadyMix™
Complete optimized reagent for hot-start PCR at 2X concentration
Synonyme(s) :
hot start PCR master mix, hot start master mix, hot start taq master mix, mutiplex PCR
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About This Item
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Produits recommandés
Forme
liquid
Utilisation
sufficient for 100 reactions
sufficient for 400 reactions
Caractéristiques
Multiplex PCR
dNTPs included
hotstart
Concentration
2.5 units/reaction (50 μL reaction volume)
Technique(s)
PCR: suitable
Couleur
colorless
Adéquation
suitable for (quantitative PCR)
Application(s)
agriculture
Conditions d'expédition
wet ice
Température de stockage
−20°C
Catégories apparentées
Description générale
JumpStart™ Taq ReadyMix™ est un mélange maître prêt à l'emploi concentré 2 × qui contient la Taq polymérase JumpStart™, des dNTP purs à 99 %, un tampon de réaction et l'anticorps anti-Taq JumpStart™. La Taq polymérase est une enzyme à démarrage à chaud inactivée par un anticorps. Lorsque la température de la réaction atteint 70 °C, le complexe polymérase/anticorps se dissocie et la Taq polymérase se réactive. Ce complexe anticorps/enzyme permet une mise en place simple et pratique tout en limitant les risques de contamination par rapport aux techniques à démarrage à chaud manuelles.
Application
Le mélange maître JumpStart™ Taq ReadyMix™ a été utilisé dans des applications de qPCR ("quantitative Polymerase Chain Reaction", amplification en chaîne par polymérase quantitative).[1][2] Il a également servi à identifier les types de récepteurs de l'adénosine (AR) présents à la surface de cellules fibroblastiques sous hypoxie.[3] Il convient également aux applications suivantes :
- PCR nécessitant une faible amplification non spécifique
- PCR multiplex
- réduction des dimères d'amorces
Caractéristiques et avantages
- Ce mélange maître garantit une certaine homogénéité entre les réactions
- Réduction du temps de préparation et des risques de contamination associés à la multiplication des pipetages
- Produit conçu pour limiter l'amplification non spécifique et les risques de contamination
- Augmentation de la spécificité et du rendement de la cible
- Réduction des dimères d'amorces
- Raccourcissement du temps de mise en place par rapport aux techniques à démarrage à chaud (HotStart) manuelles ou à billes de cire
- Possibilité de mise en place à température ambiante
- Idéal pour les applications de PCR quantitative à haut débit
Conditionnement
Le volume réactionnel par défaut est de 50 μl.
100RXN est conditionné en 1 X 2,5 ml
400RXN est conditionné en 1 X 10 ml
100RXN est conditionné en 1 X 2,5 ml
400RXN est conditionné en 1 X 10 ml
Autres remarques
JumpStart Taq ReadyMix est une solution préparée associant les performances avantageuses de la PCR à démarrage à chaud à la commodité d′un produit ReadyMix. Le mélange contient de l′ADN polymérase Taq JumpStart, des désoxynucléotides purs à 99 % et un tampon dans un concentré réactionnel 2× optimisé. La Taq polymérase JumpStart est une enzyme à démarrage à chaud inactivée par un anticorps conçue pour réduire au minimum l′amplification non spécifique tout en augmentant le rendement des composés cibles. Contrairement à d′autres méthodes (impliquant une inactivation chimique), la Taq polymérase ne nécessite pas d′étape de pré-incubation avant les cycles, car l′activité polymérase est pleinement restaurée durant le premier cycle de dénaturation de la réaction de PCR. Le mécanisme de démarrage à chaud permet d′effectuer les réactions à température ambiante, ce qui est idéal pour les applications à haute cadence. Pour préparer une réaction de 50 μl, il suffit d′ajouter 25 μl de ReadyMix à la matrice, aux amorces et à l′eau pour obtenir un volume réactionnel final de 50 μl.
Pour préparer un volume réactionnel de 50 μl, il suffit d'ajouter 25 μl de mélange ReadyMix™ à la matrice et aux amorces dans de l'eau de façon à obtenir un volume final de 50 μl.
Ce produit a été validé par PCR quantitative. Il peut cependant nécessiter l'ajout d'une solution de chlorure de magnésium 25 mM (réf. M8787), d'une sonde fluorescente appropriée voire d'un colorant de référence (réf. R4526). Pour en savoir plus sur les produits JumpStart Taq ReadyMix, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/hotstart.
Ce produit a été validé par PCR quantitative. Il peut cependant nécessiter l'ajout d'une solution de chlorure de magnésium 25 mM (réf. M8787), d'une sonde fluorescente appropriée voire d'un colorant de référence (réf. R4526). Pour en savoir plus sur les produits JumpStart Taq ReadyMix, rendez-vous sur www.sigma-aldrich.com/hotstart.
Informations légales
L'utilisation de ce produit est protégée par un ou plusieurs des brevets américains suivants et les revendications des brevets correspondants en dehors des États-Unis : US 8 404 464 et US 7 972 828. L'achat de ce produit inclut une immunité limitée et non transférable contre les poursuites dans le cadre des revendications des brevets susmentionnés.
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
Produit(s) apparenté(s)
Réf. du produit
Description
Tarif
Code de la classe de stockage
10 - Combustible liquids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 2
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
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Protocoles
Protocol using antibody mediated hot start polymerase. Method has short activation period (<1min), and results in higher yields and more specificity over standard PCR methods.
JumpStart™ Taq DNA Polymerase is an antibody-inactivated, hot start enzyme.
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Can the Jumpstart ready mix be used for long range PCR with amplicon size of approximately 20kb
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Can Product P2893, JumpStart™ Taq ReadyMix™, be used with Bio-Rad real-time PCR machines?
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Yes. Bio-Rad's real-time instruments typically require fluorescein as an internal reference dye. We have fluorescein as product F6377 (Fluorescein, sodium salt).
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Can PCR products made with Product P2893, JumpStart™ Taq ReadyMix™, be used for TA cloning?
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Yes, this enzyme does not have 3'-5' exonuclease activity, so there will be 3'A overhangs available for this type of cloning approach.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
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Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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Can Product P2893, JumpStart™ Taq ReadyMix™, be used in real-time PCR?
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Yes. The mixture does not contain any internal reference dye, though. D7440 comes with a vial of our internal reference dye, R4526, which can also be purchased separately.
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What is the fidelity of Taq DNA Polymerase?
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The error rates for polymerases are more accurately presented in terms of ranges since the actual fidelity is condition dependent. The error rate of standard Taq, as reported in the literature, is in a range of 1 in 1.1 × 104 (Tindall, K.R., and Kunkel, T.A., Biochemistry, 27, 6008-6013 (1988)) to 1 in 2.0 × 105 (Lundberg, K.S., Shoemaker, D.D., Adams, M.W., Short, J.M., Sorge, J.A.and Mathur, E.J., Gene, 108(1), 1-6 (1991)). These values would apply to this product.
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