Sacarose em refrigerantes

Determinação reflectométrica após conversão enzimática.

Introdução

A análise química de alimentos e bebidas é realizada para assegurar o consumo seguro e a qualidade e integridade do produto. No controle de qualidade, os produtores de refrigerantes devem monitorar a concentração de açúcar (sacarose) em seus produtos finais e durante o processo de fabricação. Nesta nota de aplicação, descrevemos um método para determinar a sacarose em refrigerantes com o Teste de sacarose Reflectoquant^® e o refletômetro RQflex^® 20.

Método experimental

A sacarose é clivada pela sacarose-fosforilase em frutose e glicose-1-fosfato. A sacarose é clivada pela fosfoglicomutase em frutose e glicose-6-fosfato. A última é, por sua vez, oxidada pela NAD, sob o efeito catalítico da glicose-6-fosfato desidrogenase, em gliconato-6-fosfato. Na presença de diaforase, a NADH formada no processo reduz um sal de tetrazólio em um azul de formazan que é determinado por reflectometria.

Reagentes, instrumentos e materiais

Kits de teste

• Método de teste de sacarose: reflectométrico com tiras de teste e reagente 0,25 - 2,50 g/l Reflectoquant^® (1.16141)

Instrumentos

• Reflectômetro RQflex^® 20 Reflectoquant^® (1.17246)*

*Esta nota de aplicação se refere ao RQ^® 20 e a todos os instrumentos descontinuados (RQflex^® 10, RQflex^® plus).

Preparo de amostras

Dilua a amostra de acordo com o teor de sacarose previsto, por exemplo, para uma diluição de 1:100, pipete 0,5 ml da amostra em um balão volumétrico de 50 ml e complete o volume com água destilada. Recomenda-se que os resultados da medição estejam no meio da faixa de medição. Pode ser necessário repetir a etapa de diluição com uma diluição adicional.

Análise instrumental

• Coloque 10 ml de água destilada, 5 gotas do reagente Sa-1 e 1 ml da amostra diluída de forma correspondente no vidro de teste e agite.
• Pressione o botão de início do refletômetro e, ao mesmo tempo, mergulhe a tira de teste com ambas as zonas de reação na amostra de medição (20 - 26 °C) por aproximadamente 2 segundos.
• Deixe o excesso de líquido escorrer pela borda mais longa da tira para uma toalha de papel absorvente.
• Insira imediatamente a tira de teste no adaptador de tiras.
• A tira de teste é medida no refletômetro após 300 segundos.

O valor de medição [g/l] é salvo automaticamente. (Consulte o manual de operação do RQflex^® e as instruções de uso do Teste de sacarose Reflectoquant^®).

Medição em série

Após a primeira medição, qualquer número de medições adicionais pode ser feito pressionando o botão Iniciar. Isso, no entanto, requer o uso de um cronômetro, considerando que a função de contagem regressiva do refletômetro está disponível apenas para a primeira medição. As zonas de detecção da tira de teste devem ser adequadamente protegidas da luz durante o tempo de reação.

Cálculo

Teor de sacarose [g/l] = valor da medição [g/l] x fator de diluição

Resultados

Tabela 1. Valores de medição para cola (concentração nominal na cola de acordo com o fabricante: 10,6 g/100 ml. Resultado HPLC: 10,5 g/100 ml)

	Volume de refrigerante de cola	Fator de diluição	Teor de sacarose em diluição		Sacarose em 100 de refrigerante de cola
	ml/100 ml		g/l	g/100 ml
Diluição 1	0,30	333	0,32	10,7
Diluição 2	0,50	200	0,55	11,0
Diluição 3	0,75	133	0,76	10,1
Diluição 4	1,00	100	1,02	10,2
Diluição 5	1,25	80	1,20	9,6
Diluição 6	1,50	67	1,60	10,7
Diluição 7	1,75	57	1,71	9,8
Diluição 8	2,00	50	2,16	10,8
Diluição 9	2,25	44	2,24	10,0
			Média	10,3

Tabela 2. Valores de medição para laranjada (concentração nominal na laranjada de acordo com o fabricante 9,4 g/100 ml)

	Volume de laranjada	Fator de diluição	Teor de sacarose em diluição		Sacarose em 100 ml de laranjada
	ml/100 ml		g/l	g/100 ml
Diluição 1	0,30	333	0,28	9,3
Diluição 2	0,50	200	0,45	9,0
Diluição 3	0,75	133	0,68	9,0
Diluição 4	1,00	100	0,85	8,5
Diluição 5	1,25	80	1,09	8,7
Diluição 6	1,50	67	1,43	9,6
Diluição 7	1,75	57	1,50	8,6
Diluição 8	2,00	50	1,91	9,6
Diluição 9	2,25	44	2,11	9,3
Diluição 10	2,50	40	2,24	9,0
			Média	9,1