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WTA2

Sigma-Aldrich

Kit completo de amplificação de transcriptoma total

DNA polymerase included, Complete Kit with optimized enzyme to amplify total RNA in <4 hours, no 3′ bias

Sinônimo(s):

transcriptome amplification kit

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About This Item

Código UNSPSC:
41121800
NACRES:
NA.55

Nível de qualidade

técnica(s)

whole genome amplification: suitable

Condições de expedição

wet ice

temperatura de armazenamento

−20°C

Descrição geral

WTA2 é otimizado para amplificar RNA a partir de amostras fixadas em formalina e embebidas em parafina (FFPE) e outras amostras danificadas ou degradadas. A tecnologia de amplificação de transcriptoma total (WTA) possibilita a amplificação representativa de baixas quantidades de RNA total, na faixa de nanogramas, em menos de 4 horas e sem viés para 3′. Os produtos de amplificação são adequados para aplicações como qPCR, análise de microarray e clonagem. O kit WTA2 contém a polimerase necessária para amplificar a biblioteca de cDNA.

Aplicação

O kit completo de amplificação de transcriptoma total é usado nas seguintes aplicações:
  • Estabelecer um protocolo para a análise simultânea de vírus de DNA e RNA presentes nas fezes de suínos usando sequenciamento profundo controlado por processo.
  • Transcrição reversa e amplificação de cDN
  • Para a síntese e amplificação da biblioteca de cDNA usando RNA genômico liberado de partículas de PPV imunocapturadas
  • Preparação de ácidos nucleicos e sequenciamento profundo (os ácidos nucleicos extraídos foram preparados aleatoriamente para a síntese de cDNA)
Adequado para uso em aplicações a jusante, incluindo:
  • qPCR
  • análise de microarray
  • clonagem

Características e benefícios

  • Consiga uma amplificação de até 10.000 vezes em menos de 4 horas com menos de 30 minutos de trabalho
  • Apenas 20 pg de molde de RNA total são necessários para amplificação de cDNA adequada para perfil de microarray
  • Contém todos os componentes necessários para amplificar cDNA
  • Consiga amplificação linear de éxons e genes expressos sem viés para 3′ ou 5′
  • Amplifica efetivamente o RNA de uma única célula ou em pequena quantidade, inclusive mRNA e RNA total de qualquer animal, planta ou microrganismo

Princípio

O processo de WTA2 tem duas etapas. Na primeira etapa, o RNA da amostra é transcrito reversamente com primers não autocomplementares formados por uma extremidade 3′ quase aleatória e uma extremidade 5′ universal. Durante esse processo, as fitas simples deslocadas funcionam como novos moldes para anelamento e extensão do primer. A biblioteca de cDNA resultante consiste em fragmentos de 100-1000 bases aleatórios e sobrepostos flanqueados por extremidades de sequência universal. A segunda etapa amplifica a biblioteca de cDNA por PCR usando a polimerase de WTA2 e um primer de extremidade universal para formar o produto de WTA2.

Componentes do kit também disponíveis separadamente

Nº do produto
Descrição
SDS

  • Library Synthesis Enzyme

  • Library Synthesis Solution

  • Amplification Mix

  • Library Synthesis Buffer

  • W4502Water, Nuclease-Free Water, for Molecular BiologySDS

  • Amplification Enzyme

  • D7295Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology ReagentSDS

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Código de classe de armazenamento

10 - Combustible liquids


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