11636090910
Roche
Kit de síntese de sonda de DIG para PCR
sufficient for 25 reaction (50 μL final reaction volume)
Sinônimo(s):
Sistema DIG, sonda
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About This Item
Código UNSPSC:
41105500
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uso
sufficient for 25 reaction (50 μL final reaction volume)
Nível de qualidade
fabricante/nome comercial
Roche
técnica(s)
PCR: suitable
temperatura de armazenamento
−20°C
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Descrição geral
O kit de síntese de sonda de DIG para PCR contém uma formulação de digoxigenina (DIG)-11-desoxiuridina trifosfato (dUTP) álcali-lábil. O kit destina-se à geração conveniente e eficiente de sondas de DNA marcadas com DIG que são altamente sensíveis em reação em cadeia da polimerase (PCR). As sondas são marcadas com DIG-11dUTP (álcali-lábil) pelo método de PCR. A razão DIG-dUTP:dTTP é de 1:2.
O kit de síntese de sondas de DIG para PCR contém a mistura de DNA polimerase Expand de alta fidelidade. Essa mistura robusta de enzimas com atividade de revisão de erros (proofreading) polimeriza sondas de 40 pb a 5 kb de comprimento usando 10 pg de DNA plasmidial e 10 ng de DNA genômico como molde. As sondas marcadas com DIG são estáveis por mais de um ano.
O kit de síntese de sondas de DIG para PCR contém a mistura de DNA polimerase Expand de alta fidelidade. Essa mistura robusta de enzimas com atividade de revisão de erros (proofreading) polimeriza sondas de 40 pb a 5 kb de comprimento usando 10 pg de DNA plasmidial e 10 ng de DNA genômico como molde. As sondas marcadas com DIG são estáveis por mais de um ano.
Aplicação
As sondas de DNA marcadas com digoxigenina (DIG) produzidas pelo kit de síntese de sondas de DIG para PCR são adequadas para a detecção de genes com poucas ou uma única cópia de mRNA raro em southern e northern blots. As sondas de DNA marcadas com DIG também foram usadas para marcação de DIG durante a hibridização in situ.
A concentração da mistura de dUTP-nucleotídeos fornecida pode ser ajustada de acordo com o comprimento da sonda. A eficácia da marcação pode ser determinada rapidamente em um gel de agarose.
É possível remover e voltar a adicionar sondas a membranas muitas vezes seguindo o protocolo do folheto informativo contido na embalagem.
Uma reação de marcação de PCR (50 μl) geralmente produz sondas suficientes para 20 ml de solução de hibridização. O kit pode ser usado para cerca de 25 reações (50 μl).
A concentração da mistura de dUTP-nucleotídeos fornecida pode ser ajustada de acordo com o comprimento da sonda. A eficácia da marcação pode ser determinada rapidamente em um gel de agarose.
É possível remover e voltar a adicionar sondas a membranas muitas vezes seguindo o protocolo do folheto informativo contido na embalagem.
Uma reação de marcação de PCR (50 μl) geralmente produz sondas suficientes para 20 ml de solução de hibridização. O kit pode ser usado para cerca de 25 reações (50 μl).
Embalagem
1 kit contendo 6 componentes.
Qualidade
Todo lote do kit de síntese de sondas de DIG para PCR tem sua função testada em PCR. Os produtos de amplificação são testados em southern blots genômicos.
Nas condições de PCR descritas neste folheto informativo, a reação-controle gera um produto de amplificação de 442 pb. Devido a incorporações múltiplas de DIG-dUTP durante o processo de PCR, o peso molecular dos produtos de PCR é significativamente maior em comparação com o produto de PCR não marcado. Um padrão específico de fragmentos é detectado após a hibridização do produto de PCR a 10 μg de DNA genômico humano seguido por detecção quimioluminescente.
Nas condições de PCR descritas neste folheto informativo, a reação-controle gera um produto de amplificação de 442 pb. Devido a incorporações múltiplas de DIG-dUTP durante o processo de PCR, o peso molecular dos produtos de PCR é significativamente maior em comparação com o produto de PCR não marcado. Um padrão específico de fragmentos é detectado após a hibridização do produto de PCR a 10 μg de DNA genômico humano seguido por detecção quimioluminescente.
Somente componentes do kit
Nº do produto
Descrição
- Enzyme Mix, Expand High Fidelity 3.5 U/μl
- PCR DIG Probe Synthesis Mix, containing dATP, dCTP, dGTP (2 mM each) 10x concentrated
- PCR Buffer with MgCl2 10x concentrated
- dNTP Stock Solution, containing dATP, dCTP, dGTP, dTTP (2 mM each), pH 7.0 10x concentrated
- Control Template, plasmid DNA in Tris/EDTA buffer, pH 8.0. The 5-kb plasmid contains the cDNA for the human tissue-type plasminogen activator (tPA) 20 pg/μl
- Control PCR Primer Mix, containing 50 pmol of each primer, control PCR primer 1 and 2 2 mM each
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Nº do produto
Descrição
Preços
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Aquatic Chronic 3
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
Certificados de análise (COA)
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