DIUTPS-RO
Roche
Digoxigenina-11-dUTP, estável em álcalis
Sinônimo(s):
Digoxigenina-11-dUTP, álcali-lábil
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About This Item
Código UNSPSC:
41105500
Produtos recomendados
Ensaio
≥85% (HPLC)
Nível de qualidade
forma
solution
peso molecular
Mr 1090.7
embalagem
pkg of 125 μL (11558706910 [1 mM])
pkg of 5 × 125 μL (11570013910 [5x1 mM])
pkg of 25 μL (11093088910 [1 mM])
fabricante/nome comercial
Roche
λmax
222 and 292 nm
22430 and 8780
temperatura de armazenamento
−20°C
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Descrição geral
Digoxigenina-11-dUTP, estável em álcalis, é fornecida em solução de sal tetralítio 1 mM.
Aplicação
A digoxigenina-11-dUTP, estável em álcalis, foi usada para marcar sondas para
hibridização in situ fluorescente (FISH) e reação em cadeia da polimerase (PCR)
Observação: Quando esse nucleotídeo é submetido a 0,1-0,5 de NaOH entre +15 ºC e +25 °C, a porção DIG permanece ligada. Portanto, é ideal para uso em DNA marcado com DIG que precisa sobreviver à exposição a tratamento alcalino. Porém, caso pretenda fazer uma sonda marcada com DIG que possa ser removida por desnaturação com álcalis (p. ex., durante remoção e reteste de blots), não utilize esse preparado estável em álcalis. Em vez disso, use a forma instável em álcali-lábil de DIG-11-dUTP.
hibridização in situ fluorescente (FISH) e reação em cadeia da polimerase (PCR)
Observação: Quando esse nucleotídeo é submetido a 0,1-0,5 de NaOH entre +15 ºC e +25 °C, a porção DIG permanece ligada. Portanto, é ideal para uso em DNA marcado com DIG que precisa sobreviver à exposição a tratamento alcalino. Porém, caso pretenda fazer uma sonda marcada com DIG que possa ser removida por desnaturação com álcalis (p. ex., durante remoção e reteste de blots), não utilize esse preparado estável em álcalis. Em vez disso, use a forma instável em álcali-lábil de DIG-11-dUTP.
Ações bioquímicas/fisiológicas
A digoxigenina (DIG)-11-desoxiuridina trifosfato (dUTP) substitui a desoxitimidina trifosfato (dTTP) na reação de marcação de DNA preparado com primers aleatórios ou na tradução de talhos (“nicks”) em uma proporção de 35% de DIG-11-dUTP e 65% de dTTP. A DIG-11-dUTP também pode substituir a dTTP na marcação durante a reação em cadeia da polimerase (PCR) (p. ex., com Taq DNA Polimerase), adição de causa (tailing) à extremidade 3′ (com transferase terminal) e síntese de cDNA (p. ex., com transcritor ou transcriptase reversa M-MuLV). É ideal como substrato para DNA polimerase, Taq DNA polimerase, transferase terminal e transcriptase reversa.
Características e benefícios
A digoxigenina se liga à desoxitimidina trifosfato por meio de uma ligação éter resistente a álcalis.
Resistência a álcalis: O preparado é estável na presença de NaOH 0,1-0,5 M a +15 °C a +25 °C.
Resistência a álcalis: O preparado é estável na presença de NaOH 0,1-0,5 M a +15 °C a +25 °C.
Qualidade
Análise típica: Pelo menos 85% de DIG-11-dUTP (HPLC, % de área).
Testada quanto à função por RPL.
Testada quanto à função por RPL.
Nota de preparo
Solução de trabalho: Recomendamos preparar uma mistura de desoxinucleotídeos contendo dATP, dCTP, dGTP, dTTP (10 mM cada); (p. ex., para o preparo de mistura de nucleotídeos de 100 μl, adicionar 10 μl de dATP, dCTP, dGTP, dTTP (cada) a 60 μl de água de grau para PCR).
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Pode ocorrer uma decomposição de aproximadamente 5% no prazo de 4 semanas entre 15 ºC e 25 °C.
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Pode ocorrer uma decomposição de aproximadamente 5% no prazo de 4 semanas entre 15 ºC e 25 °C.
Outras notas
Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
nwg
Ponto de fulgor (°F)
does not flash
Ponto de fulgor (°C)
does not flash
Certificados de análise (COA)
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