04716728001
Roche
DNase I, rekombinant, RNase-frei
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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Alle Fotos(1)
About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
bovine pancreas
Qualitätsniveau
Rekombinant
expressed in Pichia pastoris
Form
solution
Mol-Gew.
~39 kDa
Verpackung
pkg of 10,000 U
Hersteller/Markenname
Roche
Optimaler pH-Wert
7.0-8.0
Verwandte Kategorien
Allgemeine Beschreibung
Rekombinante DNase I ist eine DNA-spezifische Endonuklease. Das Enzym katalysiert die Zersetzung von sowohl doppelsträngiger als auch einzelsträngiger DNA zufällig, indem Phosphodiesterverbindungen zu der DNA hydrolysiert werden, was zu einer Mischung aus Oligo- und Mononukleotiden führt. Alle während des Herstellungsprozesses von DNase I rekombinant verwendeten Materialien sind nicht tierischen Ursprungs, wodurch ein tierversuchsfreies Produkt entsteht.
Inhalt
Inhalt
- Rekombinante DNase I, RNase-frei, 10 E/μl
- Inkubationspuffer, Konzentration 10x
Spezifität
Hitzeinaktivierung: Eine Einheit DNase I, rekombinant, RNase-frei wird durch eine 10-minütige Inkubation bei 75 °C hitzeinaktiviert.
Wichtiger Hinweis: Alternativ kann DNase I, rekombinant, RNase-frei durch eine Phenolextraktion gemäß Standardprotokollen, z. B. Current Protocols in Molecular Biology, inaktiviert und entfernt werden.
Wichtiger Hinweis: Alternativ kann DNase I, rekombinant, RNase-frei durch eine Phenolextraktion gemäß Standardprotokollen, z. B. Current Protocols in Molecular Biology, inaktiviert und entfernt werden.
Anwendung
DNase I, rekombinant, RNase-frei kann zur Zersetzung von DNA in Anwendungen, die empfindlich auf die Gegenwart von DNA reagieren, eingesetzt werden. DNase I wird beispielsweise häufig für Folgendes eingesetzt:
- Entfernen von genomischer DNA aus RNA-Aufbereitungen vor RT-PCR
- Isolieren von DNA-freier RNA nach In-Vitro-Transkriptionsreaktionen
- Durchführen von Nick-Translationen
- Kartierung DNase-empfindlicher Bereiche in eukaryotischer DNA
Leistungsmerkmale und Vorteile
- Eliminiert die DNA-Kontamination aus jeder RNA-Probe
- Enthält keine nachweisbare RNase- oder Proteaseaktivität
- Kann hitzeinaktiviert werden, wodurch die Notwendigkeit für eine organische Extraktion entfällt
- Wird mit einem optimierten Inkubationspuffer geliefert, der eine maximale DNase-Aktivität unterstützt
- Wird durch einen vollständig tierversuchsfreien Prozess hergestellt, um jedes Risiko im Zusammenhang mit Material tierischen Ursprungs zu eliminieren
Verpackung
1 Kit mit 2 Komponenten
Qualität
Abwesenheit von Verunreinigungen: Jede Charge wird geprüft, um die Abwesenheit von RNase und Proteasen nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren sicherzustellen.
Spezifikationen
Glykosylierte Form
Rekombinante DNase I ist heterogen N-glykosyliert, wodurch sie in der Gelelektrophorese als zwei Banden erscheint.
Zweiwertiges Ion erforderlich
DNase I erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die DNA-spezifische Endonuklease wird durch Ionen wie Magnesiumionen aktiviert und durch Calciumionen stimuliert. Daher wird das Enzym durch Metallchelatbildner wie EDTA gehemmt.
Rekombinante DNase I ist heterogen N-glykosyliert, wodurch sie in der Gelelektrophorese als zwei Banden erscheint.
Zweiwertiges Ion erforderlich
DNase I erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die DNA-spezifische Endonuklease wird durch Ionen wie Magnesiumionen aktiviert und durch Calciumionen stimuliert. Daher wird das Enzym durch Metallchelatbildner wie EDTA gehemmt.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die in 1 ml bei 260 nm eine Steigerung der Absorption von 0,001/Minute unter Assaybedingungen bewirkt.
Assaybedingungen:
Die Volumenaktivität wird gemäß der folgenden Assaymischung bestimmt. 100 μg Kälberthymus-DNA wird in 2,5 ml 1x Inkubationspuffer mit 40 bis 70 Einheiten DNase I, rekombinant, RNase-frei bei +25 °C inkubiert. Die Steigerung der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Assaybedingungen:
Die Volumenaktivität wird gemäß der folgenden Assaymischung bestimmt. 100 μg Kälberthymus-DNA wird in 2,5 ml 1x Inkubationspuffer mit 40 bis 70 Einheiten DNase I, rekombinant, RNase-frei bei +25 °C inkubiert. Die Steigerung der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Zweiwertige Metallionen
Arbeitslösung: Lagerpuffer: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM Dithioerythritol, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Inkubationspuffer (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH-Wert 7,9
Enzymverdünnungspuffer: 25 mM Tris-HCl, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Arbeitslösung: Lagerpuffer: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM Dithioerythritol, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Inkubationspuffer (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH-Wert 7,9
Enzymverdünnungspuffer: 25 mM Tris-HCl, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6 (bei 4 °C).
Lagerung und Haltbarkeit
Unverdünnt bei -15 bis -25 °C aufbewahren; Lagerpuffer bei 4 °C.
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
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Protokolle
DNase I from bovine pancreas is a glycoprotein of Mr 37000. A special procedure is used to remove RNases from the DNase preparation.
Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..
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