C2674
Colagenasa from Clostridium histolyticum
lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
Sinónimos:
Clostridiopeptidasa A
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About This Item
Productos recomendados
biological source
Clostridium histolyticum
Quality Level
type
Type I-A
form
lyophilized powder
specific activity
≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
mol wt
68-130 kDa
concentration
1 mg/mL
technique(s)
cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable
pH
6.3-8.8
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
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General description
La colagenasa es una proteasa que rompe la triple hélice proteica denominada colágeno. Hay tres tipos de colagenasas en los tejidos, que pertenecen a la familia de las metaloproteinasas de la matriz extracelular (MMP). La colagenasa obtenida de Clostridium histolyticum tiene una actividad muy fuerte, ya que digiere el colágeno desde ambos extremos a temperaturas de tan sólo 4-10°C. Las mezclas de colagenasa cruda contienen dos tipos principales de enzima, colagenasa y clostripaína.
Application
La colagenasa de Clostridium histolyticum se utiliza para las siguientes aplicaciones:
Este producto es adecuado para la desagregación de tumores humanos, riñones de ratón, cerebro adulto y fetal, pulmón y muchos otros tejidos epiteliales. También se ha demostrado su eficacia en los estudios de perfusión del hígado y el riñón, digestión del páncreas, aislamiento de las células hepáticas no parenquimatosas de rata y en la preparación de hepatocitos. La colagenasa se ha utilizado también para la preparación de tejido arterial para el estudio de los productos finales de glucosilación avanzada. Se ha estudiado esta enzima para la liberación de hepatocitos a una concentración aproximada de 1 mg/ml. Las concentraciones para digestión oscilan entre 0,1 y 5 mg/ml.
Adecuada para utilizar en la preparación de suspensión monocelular para secuenciación.
- Aislamiento de las células de Sertoli
- Utilizada en la comparación de métodos enzimáticos
- Utilizada durante las preparaciones de tejidos para inmunocitoquímica
- Extracción testicular de esperma
- Preparación de suspensiones monocelulares
- Inmunofluorescencia
Este producto es adecuado para la desagregación de tumores humanos, riñones de ratón, cerebro adulto y fetal, pulmón y muchos otros tejidos epiteliales. También se ha demostrado su eficacia en los estudios de perfusión del hígado y el riñón, digestión del páncreas, aislamiento de las células hepáticas no parenquimatosas de rata y en la preparación de hepatocitos. La colagenasa se ha utilizado también para la preparación de tejido arterial para el estudio de los productos finales de glucosilación avanzada. Se ha estudiado esta enzima para la liberación de hepatocitos a una concentración aproximada de 1 mg/ml. Las concentraciones para digestión oscilan entre 0,1 y 5 mg/ml.
Adecuada para utilizar en la preparación de suspensión monocelular para secuenciación.
Biochem/physiol Actions
La colagenasa es activada por cuatro átomo-gramos de calcio por mol de enzima. Es inhibida por el ácido etilenglicol-bis(beta-aminoetil éter) - N, N, N′,N′-tetraacético, el beta-mercaptoetanol, el glutatión, el ácido tioglicólico y la 8-hidroxiquinolina.
La colagenasa es una mezcla de enzimas secretadas por C. histolyticum y los diferentes productos se diferencian por las proporciones relativas de los 10-18 componentes que se encuentran en las enzimas secretadas. Los principales componentes son dos colagenasas, la clostripaína y una proteasa neutra. La acción sinérgica de esas enzimas degrada el colágeno y otro material intracelular. La acción de las dos colagenasas y la proteasa neutra es necesaria para la separación efectiva de las células del tejido. Los sustratos naturales para la colagenasa son varios tipos de colágeno.
Caution
Tal como se suministra, este producto es estable durante un año a -20°C. No hay pérdida de actividad FALGPA ni actividad proteasa en 30 días a 37°C, 50°C y -20°C. Las disoluciones de colagenasa cruda son estables si se congelan rápidamente en alícuotas (a 10 mg/ml) y se conservan congeladas a -20°C. Otros ciclos de congelación-descongelación dañarán la disolución. El producto retiene el 100 % de su actividad durante 7 horas si se conserva en hielo.
Unit Definition
Una unidad de digestión de colágeno (CDU) libera péptidos del colágeno del tendón de Aquiles bovino que equivalen en la reacción de color de la ninhidrina a 1,0 μmoles de leucina en 5 horas a pH 7,4 y 37 °C en presencia de iones calcio. Una unidad de hidrólisis FALGPA hidroliza 1,0 μmoles de furilacriloil-Leu-Gly-Pro-Ala por minuto a 25°C. Una unidad de proteasa neutra hidroliza la caseína para producir color equivalente a 1,0 μmoles de tirosina por 5 horas a pH 7,5 y 37°C. Una unidad de clostripaína hidroliza 1,0 μmoles de BAEE por minuto a pH 7,6 y 25°C en presencia de DTT.
Preparation Note
Esta colagenasa se obtiene del filtrado del cultivo de Clostridium histolyticum. Se piensa que el cultivo filtrado contiene como mínimo 7 proteasas diferentes cuyos pesos moleculares oscilan entre 68 y 130 kDa. Este producto es el tipo I-A. Las disoluciones se preparan normalmente a 1-2 mg/ml en tampón TESCA (que contiene TES 50 mM, cloruro de calcio 0,36 mM, pH 7,4 y 37°C.)
Substrate
Referencia del producto
Descripción
Precios
signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Storage Class
11 - Combustible Solids
wgk_germany
WGK 1
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Certificados de análisis (COA)
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To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
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