Standard FAME dla optymalizacji wydajności systemu GC
Metody AOCS i AOAC do oznaczania składu kwasów tłuszczowych trans w żywności za pomocą chromatografii gazowej wymagają użycia wysoce polarnej cyjanosilikonowej kolumny kapilarnej, aby zapewnić najlepszą osiągalną rozdzielczość pików licznych izomerów geometrycznych (cis i trans) i pozycyjnych. Ze względu na wysoce polarny charakter tych faz, subtelne zmiany w układzie GC mogą zmienić rozdział chromatograficzny pozycyjnych izomerów cis i trans. Dlatego ważne jest, aby stale monitorować wydajność kolumny i korygować nieoczekiwane zmiany w przepływie kolumny, temperaturze pieca, degradacji kolumny i / lub stężeniu próbki, gdy wystąpią.
AOCS Method Ce 1h-05 zaleca stosowanie dobrze scharakteryzowanej mieszaniny estrów metylowych kwasów tłuszczowych (FAME) obejmującej zakres badanych kwasów tłuszczowych w celu monitorowania zmian wydajności kolumny w czasie. Nowa mieszanka cis/trans FAME Column Performance Mix firmy Sigma-Aldrich jest doskonałym wyborem do monitorowania tych zmian. Ta jakościowa mieszanka została specjalnie zaprojektowana w celu optymalizacji i monitorowania zmian wydajności zgodnie z metodą AOCS Ce 1h-05 i metodą AOAC AOAC 996.06. Mieszanka zawiera izomery pozycyjne C18:1 cis/trans o krytycznym znaczeniu dla przemysłu spożywczego.
Ponieważ niektóre pozycyjne FAME cis/trans są trudne do rozdzielenia, a rozdzielczość bazowa może nie być możliwa, regularne stosowanie Sigma-Aldrich FAME Column Performance Mix ma ogromne znaczenie dla osiągnięcia wymaganej wydajności kolumny. Niewielkie zmiany wielkości próbki, stężenia próbki lub temperatury pieca mogą być wymagane do osiągnięcia najlepszej rozdzielczości między izomerami C18:1 cis/trans. Po ustaleniu optymalnej rozdzielczości dla kolumny, cotygodniowa analiza mieszaniny umożliwia monitorowanie wydajności kolumny.
Analityk wstrzykuje mieszaninę i identyfikuje piki oznaczone jako "1" i "2" na Rysunku 1. Rozdzielczość między tymi pikami jest następnie obliczana przy użyciu równania przedstawionego w Tabeli 1. Ważne jest, aby uruchomić mieszankę po początkowej instalacji nowej kolumny kapilarnej, aby upewnić się, że warunki są ustalone w celu optymalizacji rozdzielczości. Optymalna rozdzielczość między dwoma pikami jest definiowana jako rozdzielczość "linii bazowej". Pełna rozdzielczość linii bazowej jest osiągana, gdy wartość R obliczona przy użyciu równania w Tabeli 1 wynosi około 1,5 lub więcej. Przykładowy chromatogram pokazany na Rysunku 1 ilustruje pomiary wymagane przy obliczaniu wartości rozdzielczości - w szczególności szerokość piku i czas retencji. Jak widać na Rysunku 1, podstawowa rozdzielczość pików 1 i 2 nie zostanie osiągnięta w normalnych warunkach testowych. Minimalna dopuszczalna wartość rozdzielczości zostanie opisana w przyszłej wersji metody AOCS Ce 1h-05. Na razie laboratoria muszą ustalić własne kryteria.
Rysunek 1. cis/trans FAME Column Performance Mix (24056), (40495-U)
Obecnie żadna kolumna nie jest w stanie w pełni rozdzielić wszystkich izomerów pozycyjnych cis/trans C18:1. Korzystając z zestawu cis/trans FAME Column Performance Mix, analitycy mogą zoptymalizować wydajność kolumny przed badaniem złożonych mieszanin. Regularne stosowanie umożliwia również monitorowanie degradacji kolumny i rozpoznanie, kiedy należy wymienić kolumnę kapilarną.
Referencje
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?