Wszystkie zdjęcia(1)
Kluczowe dokumenty
SAMHELPERP
SAM CRISPRa Helper Construct Kit Plazmid DNA
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352200
NACRES:
NA.51
Polecane produkty
opakowanie
pkg of 2 vials (20μL aliquot for each of the 2 kit components)
stężenie
500 ng/μL
Zastosowanie
CRISPR
Warunki transportu
dry ice
temp. przechowywania
−20°C
Opis ogólny
Ten produkt to zestaw zawierający dwa plazmidy lentiwirusowe: jeden plazmid wykorzystujący promotor EF1 alfa do napędzania ekspresji MS2-P65-HSF1 i kasety oporności na higromycynę połączonej peptydem 2A (EF1a-MS2-P65-HSF1-2A-Hygromycyna) oraz jeden plazmid wykorzystujący promotor EF1 alfa do napędzania ekspresji dCas9-VP64 i kasety oporności na blastycydynę również połączonej peptydem 2A (EF1a-dCas9-VP64-2A-Blastycydyna). Skład wektora pozwala na łatwą selekcję po udanej transfekcji lub transdukcji. Użyj lentiwirusowych plazmidów MS2-P65-HSF1 lub dCas9-VP64 firmy Sigma do generowania cząstek lentiwirusowych i wydajnej produkcji stabilnych linii komórkowych wyrażających MS2-P65-HSF1 i/lub dCas9-VP64. Te dwa plazmidy są częścią 3-częściowego systemu CRISPR z indywidualnymi wektorami ekspresji dCas9-VP64, MS2-p65-HSF1 i gRNA używanymi do aktywacji tranzycyjnej opartej na CRISPR i badań przesiewowych zysku funkcji w całym genomie.
Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.
Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.
Zastosowanie
Genomika funkcjonalna/walidacja celu
- Bezstronne przesiewowe badania genetyczne
- Silna aktywacja transkrypcji w wielu liniach komórkowych
- Produkcja cząsteczek lentiwirusowych wyrażających dCas9-VP64 i MS2-p65-HSF1
Cechy i korzyści
- Wysoka specyficzność i aktywność
- Plazmid DNA o wysokiej czystości zweryfikowany pod względem sekwencji
- Aktywuje geny poprzez aktywację transkrypcyjną zamiast nadekspresji opartej na cDNA
Dowiedz się więcej o aktywatorach SAM CRISPR na stronie SigmaAldrich.com/CRISPRa.
Komponenty
This kit contains 2 components:
2 Helper Constructs supplied at a concentration of 500 ng/μL in TE buffer (10μg of plasmid DNA)
2 Helper Constructs supplied at a concentration of 500 ng/μL in TE buffer (10μg of plasmid DNA)
- 20μL vial of dCas9-VP64-Blasticidin SAM CRISPRa Helper Construct 1 Plasmid DNA
- 20μL vial of MS2-P65-HSF1-Hygromycin SAM CRISPRa Helper Construct 2 Plasmid DNA
Zasada
Systemy CRISPR/Cas są wykorzystywane przez bakterie i archeony do obrony przed inwazją wirusów i plazmidów. Niedawno system CRISPR/Cas typu II z bakterii Streptococcus pyogenes został zaprojektowany do funkcjonowania w systemach eukariotycznych przy użyciu dwóch składników molekularnych: pojedynczego białka Cas9 i niekodującego RNA (gRNA). Endonukleaza Cas9 może być nieaktywna (dCas9) z mutacjami w dwóch domenach białkowych, RuvC i HnH (odpowiednio D10A i H840A), które są odpowiedzialne za aktywność nukleazy. Białko z niedoborem nukleazy można następnie połączyć z aktywatorem transkrypcyjnym VP64 i wykorzystać w połączeniu z RNA-przewodnikiem zmodyfikowanym aptamerami MS2 RNA, które działają w celu rekrutacji dodatkowych koaktywatorów transkrypcyjnych p65 i HSF1. Zmontowany kompleks SAM jest następnie wykorzystywany jako system dostarczania ładunku do docelowych promotorów genów, umożliwiając specyficzną dla miejsca aktywację transkrypcji interesującego nas genu.
Informacje prawne
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Certyfikaty analizy (CoA)
Lot/Batch Number
It looks like we've run into a problem, but you can still download Certificates of Analysis from our Dokumenty section.
Proszę o kontakt, jeśli potrzebna jest pomoc Obsługa Klienta
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Klienci oglądali również te produkty
Genome-scale transcriptional activation by an engineered CRISPR-Cas9 complex.
Konermann S, et al.
Nature, 517, 583-588 (2015)
Genome-scale transcriptional activation by an engineered CRISPR-Cas9 complex
Konermann S, et al.
Nature, 517, 583-588 (2015)
Genome-scale CRISPR-Cas9 Knockout and Transcriptional Activation Screening.
Joung, S. et al.
Nature Protocols, 12, 828-863 (2017)
Julia Joung et al.
Nature protocols, 12(4), 828-863 (2017-03-24)
Forward genetic screens are powerful tools for the unbiased discovery and functional characterization of specific genetic elements associated with a phenotype of interest. Recently, the RNA-guided endonuclease Cas9 from the microbial CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) immune system
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej