PP2400
Zestaw wektorów z bakteryjnym znacznikiem GST
plasmid vectors for molecular cloning
Synonim(y):
szybki wektor
About This Item
Polecane produkty
znacznik
GST tagged
Formularz
buffered aqueous solution
selekcja bakterii
kanamycin
Pochodzenie replikacji
pUC (500 copies)
Rozszczepienie peptydów
TEV
no cleavage
Lokalizacja znacznika peptydowego
C-terminal
N-terminal
Promotor
Promoter name: OXB20
Promoter activity: constitutive
Promoter type: bacterial
Warunki transportu
ambient
temp. przechowywania
−20°C
Opis ogólny
Ten pakiet umożliwia porównanie umieszczania znaczników powinowactwa/rozpuszczalności Glutathione-S-Transferase (GST) na N lub C końcu interesującego genu (wstawionego do MCS, pod kontrolą transkrypcji silnego promotora bakteryjnego OXB20) z miejscem rozszczepienia proteazy TEV (Tobacco Etch Virus), a także bez niego. Miejsce TEV umożliwia usunięcie znacznika GST z białka po jego wyprodukowaniu. Porównanie tych czterech konfiguracji powinno umożliwić ocenę najlepszego sposobu ekspresji i wykrywania interesującego genu z komórek bakteryjnych. Ten zestaw plazmidów został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie używanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny można wstawiać przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.
Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: Istnieje kilka ważnych miejsc w MCS. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca poniżej do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI. Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA od kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania. Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początki i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne lokalizacje kodonów start i stop.
Zakończenie transkrypcji: Plazmidy te zawierają trzy alternatywne terminatory transkrypcji dla ekspresji bakterii ssaków i bakteriofagów (T7). Oznacza to, że tylko promotor musi zostać zmieniony, aby zmienić używany system ekspresji. Sprzedajemy wiele promotorów, które mogą być używane w każdym z tych systemów. Obecność każdego terminatora nie zmniejsza ekspresji w alternatywnych systemach.
Sekwencja
Komentarz do analizy
Inne uwagi
Informacje prawne
Elementy zestawu są też dostępne oddzielnie
- PSF-OXB20-NH2-GST-TEV - N-TERMINAL GST TAG BACTERIAL PLASMID, plasmid vector for molecular cloning
- OGS3182PSF-OXB20-COOH-GST - C-TERMINAL GST TAG BACTERIAL PLASMID, plasmid vector for molecular cloningKarta charakterystyki
- PSF-OXB20-NH2-GST - N-TERMINAL GST TAG MAMMALIAN PLASMID, plasmid vector for molecular cloning
produkt powiązany
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Certyfikaty analizy (CoA)
It looks like we've run into a problem, but you can still download Certificates of Analysis from our Dokumenty section.
Proszę o kontakt, jeśli potrzebna jest pomoc Obsługa Klienta
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Active Filters
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej