Zestaw do badania żywotności komórek roślinnych jest przeznaczony do różnicowego barwienia żywotności komórek roślinnych. Zestaw wykorzystuje dwukolorowy system barwienia fluorescencyjnego w celu podkreślenia żywotnych i nieżywotnych komórek. Procedura ta została wykorzystana do barwienia nienaruszonej tkanki roślinnej, tkanki kalusa, kultury zawiesiny komórkowej i protoplastów.
Zastosowanie
Żywe komórki to żywe komórki z nienaruszonymi błonami plazmatycznymi. Komórki te można odróżnić na podstawie obecności wewnątrzkomórkowej aktywności esterazy. Aktywność ta jest oznaczana poprzez enzymatyczną hydrolizę dioctanu fluoresceiny lub pokrewnych związków, takich jak karboksyfluoresceina lub kalceina AM. Te lipofilowe związki są przepuszczalne dla błon i niefluorescencyjne. W komórce roślinnej są hydrolizowane do wysoce polarnych związków fluorescencyjnych. Ze względu na ich polarny charakter, związki te nie są w stanie dyfundować przez błonę plazmatyczną i są zatrzymywane w żywych komórkach, wytwarzając intensywną zieloną fluorescencję w cytoplazmie. Stwierdzono, że dwuoctan fluoresceiny jest optymalnym barwnikiem do barwienia żywych komórek roślinnych. Nie fotobleachuje on tak szybko jak kalceina AM i wytwarza znacznie mniejszą fluorescencję tła niż dwuoctan karboksyfluoresceiny w komórkach roślinnych. Nieżywotne komórki mogą być żywe lub martwe. Można je odróżnić od żywych komórek na podstawie ich nieuszkodzonych lub uszkodzonych błon plazmatycznych. Jodek propidyny i pokrewne związki, takie jak homodimery etydyny-1 i -III, mogą dostać się do komórek tylko z uszkodzonymi błonami, po czym interkalują do dwuniciowych kwasów nukleinowych. Powoduje to jasną czerwoną fluorescencję w nieżywotnych komórkach, szczególnie w jądrze, gdzie stężenie kwasów nukleinowych jest najwyższe. Jodek propidyny jest optymalnym barwnikiem do barwienia nieżywotnych komórek roślinnych. W komórkach roślinnych specyficznie znakuje kwasy nukleinowe, podczas gdy homodimery etydyny-1 i -III wiążą się niespecyficznie ze ścianą komórki roślinnej.
Inne uwagi
The components of this kit must be protected from light and stored at -20 °C with desiccant. Propidium iodide is stable in aqueous solution. However, fluorescein diacetate will hydrolyze in aqueous solution. Dilutions of the dyes should be used within one day.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Journal of experimental botany, 52(355), 361-368 (2001-04-03)
The viability of Arabidopsis thaliana (strain Landsberg) roots exposed to a low pH (4.5 or 4.7) solution that contained 100 microM CaCl(2) was examined by staining with fluorescein diacetate-propidium iodide. The elongation zone of growing roots lost viability within 1-2
Journal of experimental botany, 51(343), 187-196 (2000-08-12)
Three types of callus tissues established from anther culture of eleven doubled haploid (DH) lines of wheat (Triticum aestivum L.) were evaluated for their ability in enhancing friable embryogenic (Type II) culture differentiation and genetic transformation. Differences between types of
Microsporogenesis has been examined in wild-type Arabidopsis thaliana and the nuclear male-sterile mutant BM3 by cytochemical staining. The mutant lacks adenine phosphoribosyltransferase, an enzyme of the purine salvage pathway that converts adenine to AMP. Pollen development in the mutant began
Near-infrared (nIR) fluorescent single-walled carbon nanotubes (SWCNTs) were designed and interfaced with leaves of Arabidopsis thaliana plants to report hydrogen peroxide (H2O2), a key signaling molecule associated with the onset of plant stress. The sensor nIR fluorescence response (>900 nm)
Growth inhibition of tobacco (Nicotiana tabacum L. cv Bright Yellow-2) cells by mevinolin, a specific inhibitor of 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase (HMGR) could be partially overcome by the addition of farnesol. However, farnesol alone inhibited cell division and growth as measured
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.