HTS087M
ChemiScreen Rekombinowany ludzki preparat błonowy
Receptor adrenergiczny α1A
Human alpha1A GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.41
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
informacje o genach
human ... ADRA1A(148)
Opis ogólny
Endogenne aminy katecholowe, epinefryna i norepinefryna, mają głęboki wpływ na aktywność mięśni gładkich, czynność serca, metabolizm węglowodanów i tłuszczów, wydzielanie hormonów, uwalnianie neuroprzekaźników i działanie ośrodkowego układu nerwowego. W działaniach tych pośredniczą receptory GPCR należące do dwóch podrodzin, α- i β-adrenoceptorów (Bylund i in., 1994). Trzej członkowie podklasy α1 adrenoceptorów, α1A, α1B i α1D, łączą się z Gq i promują skurcz mięśni gładkich naczyń krwionośnych i dróg moczowych, rozluźnienie mięśni gładkich jelit, zwiększoną siłę skurczową w sercu oraz glikogenolizę i glukoneogenezę w wątrobie. Różne podtypy mają nakładające się dystrybucje i różnie przyczyniają się do tych efektów w zależności od gatunku i tkanki; podtyp α1A odgrywa znaczącą rolę w skurczu mięśni gładkich układu moczowo-płciowego i skurczu tętnicy nerkowej (Hrometz i in., 1999; Ruffolo i Hieble, 1999). Aktywacja adrenoceptorów α1 wpływa również na proliferację komórek; α1A hamuje wzrost komórek poprzez zatrzymanie progresji na przejściu G1/S (Shibata i in., 2003). Preparaty błonowe α1A firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji α1A z prazosyną. Preparaty błonowe wykazują Kd 1,34 nM dla[3H]-prazosyny. Przy 5 µg/basen preparatu błonowego α1A i 1 nM[3H]-prazosyny uzyskano ponad 7-krotny stosunek sygnału do tła.
Ludzki α1A
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: A
Protein Target: alpha1A
Target Sub-Family: Adrenergic
Jakość
SPECIFICATIONS: Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of α1A membrane prep.
1 unit = 5 µg membrane preparation
Bmax: 11.02 pmol/mg
Kd: 1.34 nM
| 10 µg/well | 5 µg/well | |
|---|---|---|
| Signal:Background | 10.7 | 9.6 |
| Specific Binding (cpm) | 3244 | 2530 |
1 unit = 5 µg membrane preparation
Bmax: 11.02 pmol/mg
Kd: 1.34 nM
Charakterystyka techniczna
Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [3H] prazosyna (Perkin Elmer # NET823)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand: [3H] prazosyna (Perkin Elmer # NET823)
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Postać fizyczna
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 7-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 3H prazosyną w stężeniu 1 nM. Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów. Metoda pakowania: Białka błonowe dostosowano do wskazanego stężenia w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
International Union of Pharmacology nomenclature of adrenoceptors
Bylund, D. B. et al.
Pharmacological Reviews, 46(2), 121-136 (1994)
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej