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Merck
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資料

安全性情報

C9697

Sigma-Aldrich

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution), suitable for cell culture

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS番号:
9001-12-1
Enzyme Commission number:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC Number:
232-582-9
MDL番号:
MFCD00130830
UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.54

由来生物

Clostridium histolyticum

品質水準

200

無菌性

0.2 μm filtered

形状

lyophilized powder (from 0.2 μm filtered solution)

比活性

≥800 units/mg solid

分子量

68-130 kDa

濃度

1 mg/mL

テクニック

cell culture | mammalian: suitable

pH

7.4

保管温度

−20°C

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詳細

コラゲナーゼは、コラーゲンと呼ばれる三重らせんタンパク質を切断するプロテアーゼです。組織コラゲナーゼは3種類あり、これらはマトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）ファミリーに属します。 Clostridium histolyticumから得たコラゲナーゼは、強力な活性を持ち、4～10°Cという低温において、両端からコラーゲンを消化します。未処理のコラゲナーゼ混合物は、2つの主な酵素タイプ、つまり、コラゲナーゼおよびクロストリパインを含みます。

アプリケーション

Clostridium histolyticum由来コラゲナーゼは以下の用途に使用されます：
  • セルトリ細胞の分離
  • 酵素的手法の比較
  • 免疫細胞化学分析のための組織調製
  • 精巣内精子採取
  • 単一細胞懸濁液の調製
  • 免疫蛍光

本製品は、ヒト腫瘍、マウス腎、ヒト成人・胎児脳、肺、その他多くの上皮組織の脱凝集に適しています。また、肝臓および腎臓の灌流実験、膵臓の消化、ならびに肝細胞の調製においても効果的であることが示されています。コラゲナーゼはまた、終端糖化産物の研究のための動脈組織の調製にも使用されています。本酵素は、肝細胞の遊離のために約1mg/mLの濃度でテストされています。消化に使用する濃度の幅は、0.1～5mg/mLです。

生物化学的／生理学的作用

コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。
コラゲナーゼ製品は、C. histolyticumによって分泌される酵素の混合物であり、分泌される酵素中にみられる10～18の構成要素の相対比によって異なる製品が識別されます。主要な構成要素は、2種類のコラゲナーゼ、クロストリパインおよび中性プロテアーゼです。これらの酵素の相乗的な作用により、コラーゲンやその他の細胞内物質が分解されます。コラゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の作用は、組織から細胞を効果的に放出するために必要です。様々な種類のコラーゲンが、コラゲナーゼの天然の基質です。

注意

供給時点でのこの製品は-20°Cで1年間安定です。37°C、50°Cおよび-20°Cでは、30日間でFALGPAまたはプロテアーゼ活性が減少することはありません。粗コラゲナーゼ溶液は、アリコット（10 mg/mL）で急速凍結し、-20°Cで凍結維持すれば安定です。さらに凍結・融解サイクルを繰り返すと、溶液が損傷を受けます。本製品は、氷上で保持した場合、7時間にわたって100%の活性を維持します。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

調製ノート

溶液は、TESCA緩衝液中の1～2 mg/mLでXI型から調製されます（50 mM TES、0.36 mM塩化カルシウムを含む、37°CでpH 7.4）。

ピクトグラム

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

H315,H319,H334,H335

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

ターゲットの組織

Respiratory system

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

C9697-PH:
C9697-BULK:
C9697PROC:
C9697-50MG-PW:
C9697-VAR:
C9697-50MG:

試験成績書（COA）

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N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Alaを、連続分光光度法による速度測定（345 nm）で使用して、コラゲナーゼ活性を測定します。コラゲナーゼは、コラーゲンペプチド結合を加水分解します。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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