ENDOARGS-RO

エンドプロテアーゼ Asp-N シークエンシンググレード

from Pseudomonas fragi

• 別名: プロテアーゼ
• Enzyme Commission number: 3.4.24.33 (BRENDA, IUBMB)
• UNSPSCコード: 12352204

特性

• アッセイ: ≥90% (SDS-PAGE)
• 形状: lyophilized
• 比活性: ≥20000 units/mg protein
• 分子量: 27 kDa
• 包装: pkg of 2 μg (11420488001); pkg of 3 × 2 μg (11054589001)
• メーカー／製品名: Roche
• 最適pH: 7.0-8.0
• pH範囲: 6.5-9.0
• 保管温度: 2-8°C

詳細

詳細

野生型のシュードモナス・フラギは、低分子量の親水性アミノ酸においてN末端側のペプチド結合を開裂するメタロプロテアーゼを分離します。この菌株の突然変異体によってエンドプロテアーゼAsp-N シーケンシンググレードが産生され、高純度、高特異性のプロテアーゼとして単離されます。

特異性

エンドプロテアーゼAsp-Nシーケンシンググレードはメタロプロテアーゼです。本製品は、リン酸塩、酢酸塩、あるいはpH 6.0～8.5のトリス緩衝液においてアスパラギン酸およびシステイン酸のN-末端側のペプチド結合を特異的に開裂します。システインを還元あるいはアルキル化すると、-（↓）-Asp-Xのみが開裂します。
エンドプロテアーゼAsp-Nシーケンシンググレードの特異性は基質としてグルカゴンを用いて検証されます。高濃度のエンドプロテアーゼAsp-Nシーケンシンググレード（酵素1重量部にグルカゴン10重量部）を、汚染プロテアーゼのような微量の不純物を検出するためインキュベートします。
熱失活：タンパク分解酵素は5分間煮沸することによって失活します。

アプリケーション

タンパク質構造分析および配列分析にはエンドプロテアーゼAsp-Nシーケンシンググレードを使用します。

調製ノート

作業濃度：2 µg/50 µL再蒸留水
バイアル1本（＝酵素2 µg）を50 µLの再蒸留水に溶解して緩衝液濃度10mMのトリス-HCl pH 7.5とします。
作業溶液：推奨される溶媒は再蒸留水です。
保存条件（作業溶液）：-15°C～-25°C
再蒸留水溶液は2～8°Cにおいて最長で1週間、-15～-25°Cでおよそ1カ月間安定します；繰り返し解凍することは避けて下さい。

再構成

凍結乾燥されたエンドプロテアーゼ Asp-Nシーケンシンググレードを50 µLの再蒸留水に再構成します。これにより緩衝液濃度10 mMのトリス-HCl、pH 7.5になります。自己分解を避けるために、インキュベーション温度は37°C以下にしてください。

その他情報

生命科学研究専用です。診断手順には使用しません。

安全性情報

• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash