BLNI-RO

Bln I (Avr II)

from Brevibacterium linens

• UNSPSCコード: 12352204

特性

• 由来生物: bacterial (Brevibacterium linens)
• 品質水準: 100
• フォーム: solution
• 比活性: 10000 U/mL
• 包装: pkg of 1,000 U (11558170001 [10 U/μl]); pkg of 200 U (11558161001 [10 U/μl])
• メーカー／製品名: Roche
• パラメーター: 37 °C optimum reaction temp.
• 色: colorless
• pH: 8.1 (39 °F)
• 溶解性: water: miscible
• 適合性: suitable for molecular biology
• アプリケーション: life science and biopharma; sample preparation
• その他の活性: Endonucleases, none detected (up to 20 U with MWM II-DNA); Endonucleases, none detected (up to 20U with pBR 322-DNA)
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −20°C

詳細

詳細

Bln Iは配列C↓CTAGGを認識して、5′-付着末端を有するフラグメントを生成します。

適合する末端
Bln I末端は、Nhe I、Spe IおよびXba Iによって生成された末端と互換性があります。

イソ制限酵素
Bln Iは、Avr IIのイソ制限酵素です。
注：E.coli（大腸菌）ゲノムの完全な13部位のAvr II制限マップが報告されています。

メチル化の感度
本酵素がメチル化に影響されるかは不明です。

特異性

認識部位：CCTAGG
CCTAGG
制限酵素切断部位：C↓CTAGG
C↓CTAGG
熱失活：65°Cで15分間のインキュベーション後、Bln Iの失活なし。

品質

非特異的エンドヌクレアーゼ活性なし。
1 μg λDNAを、過剰量のBln Iとともに50 μL SuRE/Cut Buffer H中で16時間インキュベートします。酵素特異的パターンを変化させない酵素単位の数は分析証明書に記載されています。

エキソヌクレアーゼ活性なし
約5 μg [³H]標識仔ウシ胸腺DNAを、全量100 μl 50 mM Tris-HCl、10 mM MgCl₂、1 mMジチオエリトリトール（pH約7.5）中で3 μl Bln Iとともに+37°Cで4時間インキュベートします。試験成績書で述べられているように、これらの条件下で放射能の放出は検出されません。

標準的なライゲーションと再切断アッセイ
66 mM Tris-HCl、5 mM MgCl₂、5 mMジチオトレイトール、1 mM ATP、pH 7.5（+20°C）を含む10 μLの緩衝液中で1 U T4 DNAリガーゼとともに、+4°Cで16時間ライゲーションした1 μg λ x EcoR I DNAの完全消化により得られたBln Iフラグメント。ライゲーションが可能で、その後Bln IおよびEcoR I（λ x EcoR I x Bln Iフラグメントの典型的なパターンを生成する）で再切断できる製品の割合（％）は、分析証明書の「Lig」と「Rec」に記載されています。

DNAプロファイル

各DNAの切断部位数

• λ：2
• φX174：0
• Ad2：2
• M13mp7：0
• M13mp18：0
• pBR322：0
• pBR328：0
• pUC18：0
• SV40：2

単位の定義

1単位は、総量25 μL（1倍）のSuRE/Cut Buffer H中で+37°C、1時間で1 μg λ x EcoR I DNAフラグメントを完全に切断する酵素活性です。

保管および安定性

−25°C以下で保存しないこと。

アナリシスノート

PFGE試験済み
Bln Iはパルスフィールドゲル電気泳動法で試験されています（細菌染色体上）。PFGE分析のためにアガロースに埋め込まれたゲノムDNA（E.coli C 600）の切断には、10 Uの酵素/μg DNAを使用して4時間インキュベーションすることを推奨します。

SuRE/Cutバッファーシステム
最適の活性を得るためには太字で記したバッファーが推奨されます。

• A：25～50％
• B：50～75％
• H：100％
• L：0～10％
• M：25～50％

PCRバッファー中の活性：試験せず

その他情報

生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。

キットの構成要素のみ

• Enzyme Solution
• SuRE/Cut Buffer H 10x concentrated

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• 引火点(°F): does not flash
• 引火点(℃): does not flash