RNáz, DNáz-mentes protokoll

Termékszám. 11119915001

Protokoll

Protokoll

Feltételek az RNáz emésztéshez

0.1 mU RNáz, DNázmentes 1 μg RNS-t 30 perc alatt bont le + 37 °C-on, 50 μL PCR minőségű vízben végzett reakciótérfogatban. Az RNáz, DNáz-mentes fehérjekoncentrációja 0,5 μg/μL Az enzim specifikus aktivitása 30 U/mg, ami 1,5 mU/μL-nek felel meg; egy mikroliter RNáz-készítmény elegendő 15 μg RNS teljes lebontásához 30 perc alatt. Mivel a biológiai mintákban lévő RNS pontos koncentrációja nem ismert pontosan, és jellemzően az RNS-t kvantitatív módon szeretnénk lebontani, az RNáz feleslegben történő felhasználása ajánlott.

Az RNázoknak nincs specifikus reakciópufferigényük: tiszta vízben és Tris vagy NaCl jelenlétében is aktívak.

Az RNS eltávolításához a mintákból adjunk RNáz, DNázmentes és inkubáljuk +15 és +25 °C között vagy +37 °C-on.

Például adjon 0,5 μL RNázt 10⁶ sejtekből származó nukleinsavakhoz, és inkubálja +15 és +25 °C között vagy +37 °C-on. 10⁷ sejtekből származó nukleinsavakhoz adjunk 1,5 μL RNázt, és inkubáljuk 30 percig + 37 °C-on. 10⁸ sejtekből származó nukleinsavakhoz adjunk 16 μL RNázt, és inkubáljuk 30 percig + 37 °C-on.