A koffein, a taurin és az arginin kimutatása és meghatározása samponokban HPTLC-vel
Michaela Oberle1, Hans Griesinger1
Scientist Instrumental Analytics R&D
Az elmúlt néhány évben a hajápolási termékek (samponok) új trendje vált nyilvánvalóvá. Már nem a termék tisztító képessége az elsődleges szempont, mivel a kozmetikai ipar elkezdett olyan termékeket fejleszteni, amelyek további funkciókkal rendelkeznek. Ma már minden szupermarketben kaphatóak korpásodás elleni samponok vagy javító képességű samponok. Az olyan szlogenekkel, mint "anti-aging for hair", "fiatalos haj", "hajhullás elleni rendszer" vagy "hair energizer", a kozmetikai ipar a vásárlók igényeit célozza meg. Az új fókusz egyik oka a fogyasztói társadalomban bekövetkezett demográfiai változás lehet. A félig természetes adalékanyagok használata is a trend részének tűnik. Ezért szükség van analitikai módszerekre ezen anyagok azonosítására és mennyiségi meghatározására.
A modern vékonyréteg-kromatográfia (TLC) alkalmazása különösen a kozmetikumok területén kínál előnyöket. Számos minta gyorsan és egyidejűleg, pontosan azonos körülmények között elemezhető. Az összetevőket általában közvetlenül el lehet választani összetett mátrixokból és mennyiségileg meghatározni. A tipikus kozmetikai mátrixkomponensek, mint például az olajok, zsírok és a készítmény egyéb összetevőinek elválasztása a megfelelő mobilfázis kiválasztásával, vagy adott esetben egy koncentráló zónával ellátott TLC lemez kiválasztásával érhető el. Más módszerekkel, például MS vagy NMR módszerrel való egyszerű összekapcsolás is lehetséges. További előnye a képi kiértékelés, amelyben az eredmények kép formájában jelennek meg, és bizonyos esetekben maguktól értetődőek.
Itt a koffein és a taurin samponban történő mennyiségi meghatározását ismertetjük denzitometriával. Az arginin azonosságát HPTLC-MS segítségével mutattuk ki (az adatok nem láthatóak). Mivel az arginin nem mozdult el a kiindulási pontról, a pontos mennyiségi meghatározáshoz mobilfázis-optimalizálásra lenne szükség, amit ebben a vizsgálatban az idő rövidsége miatt nem végeztünk el.
TLC körülmények/paraméterek
Minta és standard oldatok
- 1 g samponmintát 10 ml izopropanollal kevertünk szobahőmérsékleten, majd 0,45 mikronos fecskendőszűrővel szűrtük.
- Standardok: Koffein, taurin és arginin 1 mg/ml oldatai metanolban
Réteg
Mintafelvitel
- Sávos felvitel az Automatikus TLC mintavevővel 4, sávhossz 5 mm, sávok közötti távolság 10 mm, távolság az alsó peremtől 10 mm, felviteli térfogat 0.1 - 5 μL
Kromatográfia
- 10 x 10 cm-es ikerkamrában (migrációs távolság 50 mm) izopropanol - n-heptán - víz 7:3:1 (v/v/v) a koffeinhez és izopropanol - víz 8:2 (v/v) az argininhez és a taurinhoz.
Derivatizálás (csak Arginin és Taurin)
- Folyamatos permetezés Ninhidrin reagenssel (Cat. No. 1.06705.0100)
Dokumentáció
- A DigiStore 2 segítségével, koffein kromatogram (derivatizálás nélkül) UV 254 nm-en; Arginin/Taurin kromatogram (derivatizálás után) fehér fényben.
Densitometria
- A TLC Scanner 3-mal, Koffein kromatogram (derivatizálás nélkül) adszorpciós méréssel UV 254 nm-en; Arginin/Taurin kromatogram (derivatizálás után) adszorpciós méréssel 600 nm-en (résméret 4 x 0.3 mm, pásztázási sebesség 20 mm/s)
Eredmények és megbeszélés
A koffeint 54 hRF-értékkel lehetett azonosítani. A csúcsterületek felhasználásával történő mennyiségi meghatározás az 1. samponminta háromszoros meghatározása után, valamint a 6 pontos kalibrálás után a célanyag átlagos 94 mg/g sampon (4. sáv: 90 mg, 5. sáv: 91 mg és 6. sáv: 100 mg) átlagos tartalmát eredményezte, a kozmetikai készítményben lévő mennyiség alapján. A mennyiségi meghatározás a csúcsterület alapján végzett polinomiális regresszió segítségével történt (r = 0,99906, sdv = 3,94%). A talált koffein mennyisége megfelel a készítményben általában jelen lévő 0,1% hatóanyag mennyiségének.
1. ábra.Az 5. sáv letapogatása és a teljes lemez képe UV 254 nm-en
Taurin és arginin: A lemezt ninhidrin szóróoldattal deriváltuk és fehér fényben dokumentáltuk. Az arginin nem mozdult el ilyen kromatográfiás körülmények között. A taurin 24-es hRF értékkel volt azonosítható. A 2. samponminta hármas meghatározásával és 3 pontos kalibrációval végzett csúcsterületek mennyiségi meghatározása a kozmetikai készítmény mennyisége alapján átlagosan 75 mg/g sampon taurin-tartalmat eredményezett (4. track: 72 mg, 5. track: 77 mg, 6. track: 75 mg, CV = 2,971, n = 3). Ez megfelel a készítményben szokásos 0,1%-os hatóanyag-mennyiségnek. Mivel az arginin nem mozdult el a kiindulási pontról, a pontos mennyiségi meghatározáshoz mobilfázis-optimalizálásra lenne szükség, amit ebben a vizsgálatban az idő rövidsége miatt nem végeztünk el.
2. ábra.A 6. sáv 600 nm-en történő letapogatása és a teljes lemez képe derivatizálás után fehér színben.
Következtetés
A fent bemutatott adatok azt mutatják, hogy a HPTLC használható a koffein és a taurin meghatározására samponmátrixban. A módszer további módosításával potenciálisan az arginin is számszerűsíthető. Összefoglalva, ez a tanulmány azt mutatja, hogy a HPTLC egy életképes & megbízható eszköz a kozmetikai mintákban lévő hatóanyagok hatékony & gazdaságos elemzésére, amelyek jellemzően nagy mátrixterhelést tartalmaznak.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?