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Merck

04942086001

Roche

Dispase® I (neutrale Protease, Qualitätsgrad I)

lyophilized, ≥10 units/mg protein (20 U/vial (37 °C, casein as substrate, pH 7.5)), optimum pH 6.0-8.5

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About This Item

EC-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.21

Biologische Quelle

Bacillus polymyxa

Qualitätsniveau

Form

lyophilized

Spezifische Aktivität

≥10 units/mg protein (20 U/vial (37 °C, casein as substrate, pH 7.5))

Verpackung

pkg of 10 × ~2 mg

Hersteller/Markenname

Roche

Konzentration

0.6-2.4 U/mL

Methode(n)

tissue processing: suitable

Farbe

white

Optimaler pH-Wert

6.0-8.5

Löslichkeit

water: soluble

Anwendung(en)

life science and biopharma
sample preparation

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

2-8°C

Allgemeine Beschreibung

Dispase ist eine neutrale, schnell wirkende, sanfte Protease, die die intakte Epidermis von der Dermis trennt. Außerdem trennt sie intakte kultivierte Epithelzellen von der Trägerschicht (Substratum). Sie spaltet die Basalmembranzone und die Epithelzellen bleiben intakt.

Spezifität

Dispase® ist eine unspezifische Metalloprotease.

Anwendung

Dispase® wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet. Das Enzym hat sich als rasch, effektiv und doch sanft wirkendes Mittel erwiesen, um die extrazelluläre Matrix von Geweben aufzuschließen und so einzelne Zellen für Zellkulturen freizusetzen (primäre Zellkulturen) oder bereits kultivierte Zellen für den Transfer zu einem neuen Substrat zu ernten (sekundäre Kultur). Außerdem wird es verwendet, um ein unerwünschtes Verklumpen von in Suspension kultivierten Zellen zu verhindern.

Leistungsmerkmale und Vorteile

  • Rasches, effektives und doch sanftes Mittel für die Freisetzung intakter Zellen
  • Wahrt die Integrität der Zellmembranen
  • Nicht-Säuger-Quelle – frei von Mycoplasma und Kontamination mit Tierviren
  • Extrem stabil gegenüber Einflüssen von Temperatur und pH-Wert sowie Interferenz von Serumbestandteilen
  • Leicht inaktivierbar durch Chelatbildner oder Verdünnung
  • Für höhere Aktivität und bequeme Anwendung

Inhalt
10 Fläschchen zu je ca. 2 mg (= 20 U/Fläschchen).

Spezifikationen

Enzymaktivität: = 10 U/mg (+37 °C, Casein als Substrat, pH 7,5)
Inhibitoren: EDTA, EGTA, Hg2+, andere Schwermetalle. Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.

Einheitendefinition

Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die Folin-positive Aminosäuren und Peptide aus Casein entsprechend 1 μmol (181 μg) Tyrosin in 1 Minute unter Testbedingungen (pH 7,5, +37 °C) freisetzt.
Ein praktischer Vergleich von Dispase® in RAS-Einheiten mit den in der japanischen Literatur zitierten (wo Konzentrationen von 1.000 bis 2.000 Dispase®-Einheiten/ml nicht unüblich sind) lässt darauf schließen, dass eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® I rund 416 japanischen Dispase®-Einheiten entspricht.
Eine „Roche Applied Science“-Einheit Dispase® entspricht 181 Proteaseeinheiten (PU), gemessen als Freisetzung von Aminosäuren entsprechend 1 μg Tyrosin pro Minute und ml bei einem pH-Wert von 7,5 und +37 °C.

Physikalische Form

weißes Lyophilisat, vor der Lyophilisierung durch eine Membran mit Porengröße von 0,2 μm filtriert

Angaben zur Herstellung

Aktivator: Die optimale Ca2+-Konzentration liegt bei 2 mM. Die Enzympräparate enthalten ausreichend Ca2+ für optimale Aktivität.
Arbeitskonzentration: 0,6 bis 2,4 U/ml
Arbeitslösung: Herstellung von Stammlösung und Arbeitslösungen:
Zur Herstellung einer Stammlösung mit einer Konzentration von 10 mg/ml die lyophilisierte Dispase® I in HEPES-gepufferter Kochsalzlösung (50 mM HEPES/KOH pH 7,4, 150 mM NaCl) auflösen. Zur Herstellung der Arbeitslösung die oben beschriebene Stammlösung mit dem Kulturmedium für die isolierten Zellen verdünnen, bis eine endgültige Konzentration von 0,6 bis 2,4 U/ml erreicht ist. Wichtig: Konzentrationen über 2,4 U/ml werden nicht empfohlen. Für optimale Ergebnisse die Arbeitslösung mit einer 0,22-μm-Filtermembran filtern.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 2 Wochen lang stabil. Für eine Lagerung von bis zu 2 Monaten sollte die Stammlösung in Aliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.
Die mit PBS verdünnte Stammlösung ist bei 2 bis 8 °C 3 Tage lang stabil.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2 bis 8 °C aufbewahren (Trocken lagern!)

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Rechtliche Hinweise

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Piktogramme

Exclamation markHealth hazard

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

Flammpunkt (°F)

does not flash

Flammpunkt (°C)

does not flash


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