COLLD-RO
Roche
Collagenase D
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Clostridium histolyticum
Qualitätsniveau
Sterilität
non-sterile
Form
lyophilized
collagenase activity
>0.15 U/mg lyophilizate
Verpackung
pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)
Methode(n)
tissue processing: suitable
Farbe
light brown
Optimaler pH-Wert
6.0-8.0
Löslichkeit
water: soluble
NCBI-Hinterlegungsnummer
Anwendung(en)
cell analysis
Fremdaktivität
Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)
Lagertemp.
2-8°C
Allgemeine Beschreibung
Collagenase D wird aus Clostridium histolyticum-Kulturen durch Filtration, Ammoniumsulfat-Fällung, Dialyse und Lyophilisierung hergestellt.
Spezifität
Collagenase baut natives Kollagen ab. Clostripain, trypsinähnliche Enzyme und neutrale Proteasen bauen ebenfalls andere Proteine ab.
Anwendung
Kollagenase aus C. histolyticum findet breite Anwendung für die Zerlegung vieler Gewebetypen (z.B. Lunge, Herz, Muskel, Knochen, Fettgewebe, Leber, Niere, Knorpel, Brustdrüse, Plazenta, Blutgefäße, Gehirn, Tumoren) und für die Herstellung von Einzelzellsuspensionen zur Etablierung von primären Zellkultursystemen. Kollagenase D wird für Anwendungen empfohlen, bei denen die Funktionsfähigkeit und Integrität von Proteinen auf der Zelloberfläche wichtig ist.
Clostridium-Kollagenase von Roche wird zur Präparation von Zellen aus vielen Gewebetypen verwendet, darunter Leberzellen, Fettzellen, Langerhans-Inseln, Epithelzellen, Muskelzellen, Endothelzellen, usw. Es sollte jedoch bei jeder Enzymcharge empirisch ermittelt werden, ob sie für die Zerlegung eines bestimmten Gewebes geeignet ist.
Clostridium-Kollagenase von Roche wird zur Präparation von Zellen aus vielen Gewebetypen verwendet, darunter Leberzellen, Fettzellen, Langerhans-Inseln, Epithelzellen, Muskelzellen, Endothelzellen, usw. Es sollte jedoch bei jeder Enzymcharge empirisch ermittelt werden, ob sie für die Zerlegung eines bestimmten Gewebes geeignet ist.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Inhalt
Lyophilisat, nicht steril
Lyophilisat, nicht steril
Einheitendefinition
Kollagenase von Roche wird in Wünsch-Einheiten (1 μmol Produkt wird pro Minute bei +25 °C mit Wünsch-Substrat gebildet) getestet.
Die Kollagenase-Aktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Kollagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen einheitlichen Umrechnungsfaktor zwischen den beiden Aktivitätseinheiten, weil die Mandl-Einheit zum Teil von der nicht definierbaren Variablen der Konzentration kontaminierender Proteasen in der Kollagenasezubereitung abhängt. Eine reinere Kollagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (eine bestimmte Charge Clostridium-Kollagenase enthielt z.B. ca. 0,15 Wünsch-U/mg und 250 Mandl-U/mg).
Die Kollagenase-Aktivität wird häufig in Mandl-Einheiten angegeben (1 μmol Leucin wird in 5 Stunden bei +37 °C aus Kollagen freigesetzt).
Leider gibt es keinen einheitlichen Umrechnungsfaktor zwischen den beiden Aktivitätseinheiten, weil die Mandl-Einheit zum Teil von der nicht definierbaren Variablen der Konzentration kontaminierender Proteasen in der Kollagenasezubereitung abhängt. Eine reinere Kollagenasezubereitung ergäbe somit eine geringere spezifische Aktivität in Mandl-Einheiten als eine Rohzubereitung. Für Clostridium-Zubereitungen sind üblicherweise Umrechnungsfaktoren von ca. 1:1800 angegeben (eine bestimmte Charge Clostridium-Kollagenase enthielt z.B. ca. 0,15 Wünsch-U/mg und 250 Mandl-U/mg).
Physikalische Form
Lyophilisat, nicht steril.
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Ca2+
Arbeitskonzentration: 0,5 - 2,5 mg/mL
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25°C
Roche empfiehlt, nur die Menge an Lyophilisat zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche gelagert werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstitution abnimmt.
Inhibitoren:
Kollagenase-Hemmer: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Kollagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiweiß, Sojabohnen)
Enzymaktivität:
Kollagenaseaktivität: >0,15 U/mg (nach Wünsch) (+25°C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und gesamtproteolytische Aktivität
Collagenase D hat eine normale bis hohe Collagenase-Aktivität und eine sehr geringe tryptische Aktivität (üblicherweise <0,2 Einheiten/mg, BAEE als Substrat).
Arbeitskonzentration: 0,5 - 2,5 mg/mL
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25°C
Roche empfiehlt, nur die Menge an Lyophilisat zu rekonstituieren, die für die sofortige Anwendung benötigt wird. Die rekonstituierte Lösung kann bei -15 bis -25 °C bis zu einer Woche gelagert werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden, da die Aktivität nach der Rekonstitution abnimmt.
Inhibitoren:
Kollagenase-Hemmer: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-Mercaptoethanol
Kollagenase wird durch Serum nicht gehemmt.
Clostripain-Inhibitoren: TLCK
Trypsin-Inhibitoren: Aprotinin, Trypsin-Inhibitor (Eiweiß, Sojabohnen)
Enzymaktivität:
Kollagenaseaktivität: >0,15 U/mg (nach Wünsch) (+25°C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Kontaminierende Enzymaktivitäten: Trypsin, Clostripain und gesamtproteolytische Aktivität
Collagenase D hat eine normale bis hohe Collagenase-Aktivität und eine sehr geringe tryptische Aktivität (üblicherweise <0,2 Einheiten/mg, BAEE als Substrat).
Rekonstituierung
Rekonstitution in jeder ausgeglichenen Salzlösung (z.B. HBSS)
Lagerung und Haltbarkeit
Vor Licht schützen
Sonstige Hinweise
Nur für die Life Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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