05401020001
Roche
Liberase™ TL, Forschungsqualität
lyophilized, suitable for tissue processing, optimum pH 7.4
Synonym(e):
Collagenase | Gewebedissoziation
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352204
NACRES:
NA.21
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Bacillus polymyxa (dispase)
Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus)
Clostridium histolyticum (collagenase)
Qualitätsniveau
Beschreibung
low Thermolysin concentration
Form
lyophilized
Verpackung
pkg of 10 mg (2x5 mg)
Hersteller/Markenname
Roche
Parameter
35-37 °C optimum reaction temp.
Methode(n)
tissue processing: suitable
Optimaler pH-Wert
7.4
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Allgemeine Beschreibung
Das gebräuchlichste Verfahren für Dezellularisierungsprozesse, wie z. B. Gewebedissoziation und Zellernte, beruht auf der Anwendung proteolytischer Enzyme. Proteasen zerstören die extrazelluläre Matrix von Gewebe und ermöglichen die Freisetzung einzelner Zellen oder die Ernte kultivierter Zellen für den Transfer. Das Ziel der Zellisolierung ist die Maximierung der Ausbeute an dissoziierten Zellen, die lebensfähig und funktionell aktiv sind.
Aufgereingte Liberase-Enzymmischungen
Liberase-Enzyme sind Mischungen aus hochgradig aufgereinigten Enzymen, die dazu entwickelt wurden, die Qualität und Reproduzierbarkeit der Gewebedissoziation zu erhöhen und die Lebensfähigkeit und Funktionalität isolierter Zellen zu verbessern. Aufgereinigte Liberase-Enzymmischungen ersetzen die traditionelle Kollagenase, bei der es sich um ein rohes und variables Fermentationsprodukt von Clostridium histolyticum handelt.
Liberase-Enzymtechnologie
Die Liberase-Enzymtechnologie umfasst Methoden zur Aufreinigung clostridialer Kollagenase-Isoformen zu hoher spezifischer Aktivität und zu deren Mischung mit neutralen Proteasen hoher spezifischer Aktivität in optimalen Verhältnissen für die effektive Dissoziation primärer Gewebe und kultivierter Zellen.
Weitere Informationen, z. B. zu Herstellung, Technologie oder Aufbewahrung, finden Sie im Dokument „Liberase Research Grade Insights“. Weitere Informationen zu dem Thema finden Sie außerdem unter dem Tab „Dokumente“.
Roche hat Zubereitungen von aufgereinigten Liberase-Enzymmischungen in Sonderqualität, die gemäß GMP-Richtlinien hergestellt wurden, im Angebot. Weitere Informationen finden Sie auf den Zubereitungen in GMP-Qualität.
Wichtige Hinweise:
Aufgereingte Liberase-Enzymmischungen
Liberase-Enzyme sind Mischungen aus hochgradig aufgereinigten Enzymen, die dazu entwickelt wurden, die Qualität und Reproduzierbarkeit der Gewebedissoziation zu erhöhen und die Lebensfähigkeit und Funktionalität isolierter Zellen zu verbessern. Aufgereinigte Liberase-Enzymmischungen ersetzen die traditionelle Kollagenase, bei der es sich um ein rohes und variables Fermentationsprodukt von Clostridium histolyticum handelt.
Liberase-Enzymtechnologie
Die Liberase-Enzymtechnologie umfasst Methoden zur Aufreinigung clostridialer Kollagenase-Isoformen zu hoher spezifischer Aktivität und zu deren Mischung mit neutralen Proteasen hoher spezifischer Aktivität in optimalen Verhältnissen für die effektive Dissoziation primärer Gewebe und kultivierter Zellen.
Weitere Informationen, z. B. zu Herstellung, Technologie oder Aufbewahrung, finden Sie im Dokument „Liberase Research Grade Insights“. Weitere Informationen zu dem Thema finden Sie außerdem unter dem Tab „Dokumente“.
Roche hat Zubereitungen von aufgereinigten Liberase-Enzymmischungen in Sonderqualität, die gemäß GMP-Richtlinien hergestellt wurden, im Angebot. Weitere Informationen finden Sie auf den Zubereitungen in GMP-Qualität.
Wichtige Hinweise:
- Dieses Produkt ist ausschließlich zur Anwendung in der Life-Science-Forschung und In-vitro-Diagnostik vorgesehen. Diese Produkte dürfen nicht für diagnostische oder klinische Anwendungen wie humane Inselzelltransplantationen eingesetzt werden.
- Alle Liberase und Liberase Blendzyme-Produkte der 1. Generation (Liberase HI, CI, RI, PI, Liberase Blendzyme 1, 2, 3, 4) wurden durch die 2 Generation der Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität und in GMP-Qualität ersetzt. Anleitungen zur Umstellung von den vormaligen Liberase-Enzymen.
Anwendung
Liberase™ TL (Thermolysin Low) in Forschungsqualität wird für die Dissoziation vieler Gewebetypen in Anwendungen eingesetzt, in denen die hohe Reinheit der Enzymmischung für eine hohe Ausbeute und Lebensfähigkeit der Zellen notwendig ist. Bakterien-Abbauprodukte wie Endotoxine werden bis auf mehrere Tausendstel reduziert.
Dieses Produkt wird zur Isolation von Langerhans-Inseln aus Mäusen eingesetzt.
Dieses Produkt wird zur Isolation von Langerhans-Inseln aus Mäusen eingesetzt.
Leistungsmerkmale und Vorteile
Liberase TL in Forschungsqualität enthält hochgradig aufgereinigte Kollagenase I und Kollagenase II. Diese beiden Kollagenase-Isoformen werden in einem genauen Verhältnis aufeinander und mit einer geringen Konzentration von Thermolysin, einer nicht clostridialen, neutralen Protease, abgestimmt.
- Maximieren Sie die Ausbeute und Lebensfähigkeit der isolierten Zellen mit einer Enzymmischung, die weniger Clostripain- und Trypsinaktivität aufweist und weniger Endotoxine enthält.
- Höhere spezifische Aktivität der Enzymmischung als Ergebnis der höheren Reinheit der Kollagenase I + II (durch HPLC-Analyse bestimmt).
- Erhöhte experimentelle Reproduzierbarkeit durch höhere Übereinstimmung zwischen den Chargen.
- Erhöhte Sicherheit: mit einem Enzym, das frei von Rohmaterialien aus Säugetier- oder Vogelgewebe ist.
Angaben zur Herstellung
Stabilisatoren: Calcium
-Arbeitskonzentration für Liberase-Enzyme in Forschungsqualität:
Liberase-Enzyme verfügen über eine signifikant höhere spezifische Aktivität als herkömmliche Kollagenasen. Das bedeutet, dass die Arbeitskonzentration der aufgereinigten Liberase-Enzyme, in mg/ml angegeben, geringer ist als die von herkömmlicher Kollagenase.
Wenn die Anwendung auf der Liste der Anwendungen von Roche unter www.collagenase.com enthalten ist, verwenden Sie die für diese Anwendung empfohlene Konzentration von Liberase-Enzymen in Forschungsqualität.
Wenn die Anwendung nicht in der Liste aufgeführt ist, verwenden Sie Liberase TM in Forschungsqualität zunächst in einer Konzentration von 0,08–0,28 Wünsch-Einheiten/mL.
Ziel ist es, die beste Startkonzentration der Liberase-Enzymmischungen zu bestimmen. Dies ist der Ausgangspunkt. Die endgültige Konzentration kann in Abhängigkeit von Verfahrens- und Chargenunterschieden bei herkömmlicher Kollagenase variieren.
Kollagenase-Arbeitskonzentration
Multiplizieren Sie Ihre vorherige Kollagenase-Arbeitskonzentration (mg/ml) mit ihrer spezifischen Aktivität (Wünsch-Einheiten/mg, [wie oben bestimmt]), um Wünsch-Einheiten/ml zu erhalten. Zur Bestimmung des erforderlichen Volumens von Liberase-Enzymmischung multiplizieren Sie zuerst Ihre Kollagenase-Arbeitskonzentration (in Wünsch-Einheiten/ml) mit dem Gesamtvolumen Ihrer Enzym-Arbeitslösung, um die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase zu ermitteln (Wünsch-Einheiten). Teilen Sie dann die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase durch die Konzentration der Liberase-Stammlösung („Rekonstituierung und Lagerung“). Das Ergebnis gibt an, wie viele Milliliter Stammlösung der Liberase-Enzymmischung für Ihre Enzym-Arbeitslösung verwendet werden müssen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Bewahren Sie nicht verwendete Stammlösung in Aliquoten für den Einmalgebrauch bei -15 bis -25 °C auf. Weitere Informationen zur Produktstabilität finden Sie auf der Roche Liberase-Enzym-Website unter www.collagenase.com.
Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden!
-Arbeitskonzentration für Liberase-Enzyme in Forschungsqualität:
Liberase-Enzyme verfügen über eine signifikant höhere spezifische Aktivität als herkömmliche Kollagenasen. Das bedeutet, dass die Arbeitskonzentration der aufgereinigten Liberase-Enzyme, in mg/ml angegeben, geringer ist als die von herkömmlicher Kollagenase.
Wenn die Anwendung auf der Liste der Anwendungen von Roche unter www.collagenase.com enthalten ist, verwenden Sie die für diese Anwendung empfohlene Konzentration von Liberase-Enzymen in Forschungsqualität.
Wenn die Anwendung nicht in der Liste aufgeführt ist, verwenden Sie Liberase TM in Forschungsqualität zunächst in einer Konzentration von 0,08–0,28 Wünsch-Einheiten/mL.
Ziel ist es, die beste Startkonzentration der Liberase-Enzymmischungen zu bestimmen. Dies ist der Ausgangspunkt. Die endgültige Konzentration kann in Abhängigkeit von Verfahrens- und Chargenunterschieden bei herkömmlicher Kollagenase variieren.
Kollagenase-Arbeitskonzentration
Multiplizieren Sie Ihre vorherige Kollagenase-Arbeitskonzentration (mg/ml) mit ihrer spezifischen Aktivität (Wünsch-Einheiten/mg, [wie oben bestimmt]), um Wünsch-Einheiten/ml zu erhalten. Zur Bestimmung des erforderlichen Volumens von Liberase-Enzymmischung multiplizieren Sie zuerst Ihre Kollagenase-Arbeitskonzentration (in Wünsch-Einheiten/ml) mit dem Gesamtvolumen Ihrer Enzym-Arbeitslösung, um die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase zu ermitteln (Wünsch-Einheiten). Teilen Sie dann die erforderliche Gesamtaktivität der Kollagenase durch die Konzentration der Liberase-Stammlösung („Rekonstituierung und Lagerung“). Das Ergebnis gibt an, wie viele Milliliter Stammlösung der Liberase-Enzymmischung für Ihre Enzym-Arbeitslösung verwendet werden müssen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Bewahren Sie nicht verwendete Stammlösung in Aliquoten für den Einmalgebrauch bei -15 bis -25 °C auf. Weitere Informationen zur Produktstabilität finden Sie auf der Roche Liberase-Enzym-Website unter www.collagenase.com.
Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden!
Rekonstituierung
Rekonstituieren Sie das lyophilisierte Enzym mit sterilem Wasser für Injektionszwecke oder mit Gewebedissoziationspuffer. Geben Sie kein Serum oder andere Komponenten, die die Enzymaktivität beeinflussen könnten wie Albumin oder Proteasehemmer zum Dissoziationspuffer hinzu. Die Enzymstabilität ist bei höheren Konzentrationen und wärmeren Temperaturen (4 °C) verringert. Vermeiden Sie diese beiden Bedingungen.
Rekonstituieren Sie den gesamten Inhalt des Fläschchens. Wiegen Sie keine einzelnen Aliquote des Lyophilisats ab. Wenn Feuchtigkeit in das Fläschchen gelangt, verringert sich die Enzymaktivität.
Bewahren Sie das Fläschchen während der Rehydrierung des lyophilisierten Enzyms auf Eis auf.
Schütteln Sie das Fläschchen vorsichtig bei 2 bis 8 °C, bis sich das Enzym vollständig aufgelöst hat (max. 30 min).
Je nach Gewebedissoziationspuffer, der zum Lösen aufgereinigter Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität verwendet wird, sind ggf. geringfügige Ausfällungen sichtbar, die sich in der verdünnten Arbeitslösung leicht auflösen und die Enzymaktivität nicht beeinflussen.
Entnehmen Sie ein Aliquot der Stammlösung, um die Arbeitslösung herzustellen.
Rekonstituierungsvolumen
2 ml (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 10 ml (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Kollagenase Wünsch (Einheiten/ml)
13 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 26 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Gesamtkonzentration Kollagenase [mg/ml]
2,5 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg) 5,0 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Rekonstituieren Sie den gesamten Inhalt des Fläschchens. Wiegen Sie keine einzelnen Aliquote des Lyophilisats ab. Wenn Feuchtigkeit in das Fläschchen gelangt, verringert sich die Enzymaktivität.
Bewahren Sie das Fläschchen während der Rehydrierung des lyophilisierten Enzyms auf Eis auf.
Schütteln Sie das Fläschchen vorsichtig bei 2 bis 8 °C, bis sich das Enzym vollständig aufgelöst hat (max. 30 min).
Je nach Gewebedissoziationspuffer, der zum Lösen aufgereinigter Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität verwendet wird, sind ggf. geringfügige Ausfällungen sichtbar, die sich in der verdünnten Arbeitslösung leicht auflösen und die Enzymaktivität nicht beeinflussen.
Entnehmen Sie ein Aliquot der Stammlösung, um die Arbeitslösung herzustellen.
Rekonstituierungsvolumen
2 ml (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 10 ml (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Kollagenase Wünsch (Einheiten/ml)
13 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 26 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Gesamtkonzentration Kollagenase [mg/ml]
2,5 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg) 5,0 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Lagerung und Haltbarkeit
Bei -15 bis -25 °C aufbewahren (Trocken lagern. Bitte beachten Sie, dass auf den einzelnen Fläschchen kein Verfallsdatum aufgedruckt ist.)
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Rechtliche Hinweise
Liberase is a trademark of Roche
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Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Zielorgane
Respiratory system
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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