This product is a 1 mg/mL solution. The enzymatic activity of each component is as follows:
Dispase Activity: 1.0 units per milligram
Collagenase Activity: ≥12,500 units per vial
Caseinase Activity: ≥2000 caseinase units/mg
Clostripain Activity: ≤5.0 clostripain units/mg
Tryptic Activity: ≤0.5 tryptic units/mg
SCM133
PluriSTEM® Dispase-II-Lösung
Dispase-II has proven to be a rapid and effective, yet gentle, agent for separating many tissues and cells grown in vitro.
Synonym(e):
Dispase, Dispase 2
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352204
eCl@ss:
32160801
NACRES:
NA.75
Preise und Verfügbarkeit sind derzeit nicht verfügbar.
Empfohlene Produkte
Qualitätsniveau
Form
liquid
Hersteller/Markenname
PluriSTEM®
Konzentration
1 mg/mL in sterile DMEM/F-12
Methode(n)
cell culture | mammalian: suitable
cell culture | stem cell: suitable
Versandbedingung
dry ice
Allgemeine Beschreibung
Proteolytische Enzyme wie Trypsin, Collagenase und Pronase werden üblicherweise zur Dispersion von Geweben und Zellen verwendet. Diese Enzyme verletzen jedoch häufig die Zellen, sind während der Inkubation instabil, können heterogen sein und auch eine Quelle für Mykoplasmen-Kontaminationen darstellen. Dispase-II wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet. Dispase-II ist nachweislich ein rasches und effektives, aber dennoch sanftes Mittel zur Trennung vieler in vitro gezüchteter Gewebe und Zellen. Dispase eignet sich insbesondere für die Gewebedisaggregation und Subkultivierung, da es die Zellmembranen nicht beschädigt.
PluriSTEM Dispase-II wurde zusammen mit PluriSTEM-Medium für humane ES/iPS-Zellen (SCM130) für die Kultur und Passage von humanen embryonalen und induzierten pluripotenten Stammzellen validiert.
Dispase-II Enzym wird in Bacillus polymyxa hergestellt.
PluriSTEM Dispase-II wurde zusammen mit PluriSTEM-Medium für humane ES/iPS-Zellen (SCM130) für die Kultur und Passage von humanen embryonalen und induzierten pluripotenten Stammzellen validiert.
Dispase-II Enzym wird in Bacillus polymyxa hergestellt.
Anwendung
Die optimale Passagierungstechnik muss vom Endnutzer bestimmt werden und hängt vom Zelltyp und den Kulturbedingungen ab.
1. 6-Well-Platten mit 1:20-Matrigel-Beschichtung (1,5 ml pro Well) beschichten. Bei 2–8 ºC über Nacht inkubieren oder vor der Verwendung mindestens 30 Minuten bis 1 Stunde bei RT beschichten.
2. Die Matrigelschicht entfernen. 2 ml Komplettmedium pro Well hinzugeben.
3. Bereiche der Differenzierung innerhalb der Kultur entfernen.
4. Medium aspirieren.
5. Einmal mit 2 ml PBS waschen.
6. 1,5 ml Dispase II pro Well hinzugeben. Stattdessen bei 37 ºC 7 Minuten inkubieren.
7. 2x mit 2 ml PBS, ohne Mg und Ca waschen.
8. 2 ml Komplettmedium in jedes Well geben und einen Zellschaber verwenden, um die Kolonien zu lösen.
9. Abgeschabte Zellen in einem konischen 15-ml-Röhrchen sammeln.
10. 5 Minuten lang mit 800 U/min zentrifugieren.
11. In einem geeigneten Volumen mit Komplettmedien resuspendieren. Das typische Aufteilungsverhältnis beträgt 1:5–1:6, je nach Zelldichte. Die Zellen sollten in 5 bis 6 Tagen unter Verwendung von PluriSTEM-Medium für humane ES/iPS-Zellen für die Passagierung bereit sein.
1. 6-Well-Platten mit 1:20-Matrigel-Beschichtung (1,5 ml pro Well) beschichten. Bei 2–8 ºC über Nacht inkubieren oder vor der Verwendung mindestens 30 Minuten bis 1 Stunde bei RT beschichten.
2. Die Matrigelschicht entfernen. 2 ml Komplettmedium pro Well hinzugeben.
3. Bereiche der Differenzierung innerhalb der Kultur entfernen.
4. Medium aspirieren.
5. Einmal mit 2 ml PBS waschen.
6. 1,5 ml Dispase II pro Well hinzugeben. Stattdessen bei 37 ºC 7 Minuten inkubieren.
7. 2x mit 2 ml PBS, ohne Mg und Ca waschen.
8. 2 ml Komplettmedium in jedes Well geben und einen Zellschaber verwenden, um die Kolonien zu lösen.
9. Abgeschabte Zellen in einem konischen 15-ml-Röhrchen sammeln.
10. 5 Minuten lang mit 800 U/min zentrifugieren.
11. In einem geeigneten Volumen mit Komplettmedien resuspendieren. Das typische Aufteilungsverhältnis beträgt 1:5–1:6, je nach Zelldichte. Die Zellen sollten in 5 bis 6 Tagen unter Verwendung von PluriSTEM-Medium für humane ES/iPS-Zellen für die Passagierung bereit sein.
Forschungskategorie
Stammzellenforschung
Stammzellenforschung
Forschungsunterkategorie
Enzyme und Biochemie
Enzyme und Biochemie
Qualität
Die Lösung ist rot und enthält keine Partikel. Die Lösung ist steril und für alle Zellkulturanwendungen geeignet.
Physikalische Form
Das Produkt wird in sterilem DMEMF12 bei 1 mg/ml angeboten. Das Produkt wird vor dem Einfrieren durch einen 0,2-µm-Filter filtriert.
Das Produkt wird in sterilem DMEMF12 bei 1 mg/ml angeboten. Das Produkt wird vor dem Einfrieren durch einen 0,2-µm-Filter filtriert.
Dispase-II Enzym wird in Bacillus polymyxa hergestellt.
Dispase-II Enzym wird in Bacillus polymyxa hergestellt.
Lagerung und Haltbarkeit
Kann bei -20 °C bis zu 4 Monate ab Empfangsdatum aufbewahrt werden. Nach dem Auftauen in kleinere Volumen aliquotieren und bei -20 ºC lagern. Zur Wahrung der ordnungsgemäßen enzymatischen Aktivität sind wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen zu vermeiden.
Rechtliche Hinweise
PLURISTEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Haftungsausschluss
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich u. a. zur unautorisierten kommerziellen Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.
Lagerklassenschlüssel
10 - Combustible liquids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
Analysenzertifikate (COA)
Suchen Sie nach Analysenzertifikate (COA), indem Sie die Lot-/Chargennummer des Produkts eingeben. Lot- und Chargennummern sind auf dem Produktetikett hinter den Wörtern ‘Lot’ oder ‘Batch’ (Lot oder Charge) zu finden.
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What is the activity of this enzime?
1 Antwort-
Hilfreich?
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What is the activity of the dispase product SCM133, and is there a specific range it should fall within in units/mL?
1 Antwort-
The activity of the material is 1.0 unit per milligram (u/mg).
Hilfreich?
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Please let me know U/ml of this (https://www.sigmaaldrich.com/CZ/en/product/mm/scm133) solution. Thank you
1 Antwort-
This product is a 1 mg/mL solution of Dispase II. The enzyme activity is lot specific, however the activity will be ?0.8 U/mg. This activity is established using casein as a substrate at 37°C and pH 7.5. Please see the link below to review the product data sheet:
https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/727/543/scm133.pdfHilfreich?
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