Přejít k obsahu
Merck
DomůProduktyBiologie bílkovinPříprava vzorku bílkovinFLAG® Purifikace

FLAG® Purifikace

Detailní záběr laboratorního prostředí. Hlavní pozornost je zaměřena na modrou pipetu, která dávkuje kapku do malé skleněné nádobky částečně naplněné růžově zbarvenou kapalinou. Pozadí, i když rozmazané, naznačuje přítomnost různých dalších laboratorních přístrojů nebo nádob.

TagyFLAG® umožňují vynikající detekci a robustní purifikaci rekombinantních fúzních proteinů s osvědčeným využitím v mnoha navazujících aplikacích od vazebných testů a testů aktivity až po strukturní analýzu. Epitopová značka FLAG® je krátký hydrofilní peptid o osmi aminokyselinách (značka DYKDDDDK), který je snadno štěpitelný enterokinázou (EK). Díky své malé velikosti a hydrofilní povaze se značka FLAG® běžně nachází na povrchu fúzního proteinu, což minimalizuje účinky na funkci, sekreci nebo transport fúzního proteinu. Bez ohledu na vaši konečnou aplikaci máme nástroje potřebné k expresi, purifikaci a detekci fúzních proteinů FLAG®. 

Přečtěte si více o

Grafické znázornění se vzorem propojených fialových kruhů a čar na žlutém pozadí. Návrh připomíná zjednodušenou molekulární strukturu nebo síťové schéma a naznačuje témata vzájemného propojení nebo vztahů.

Exprese značkovaných proteinů FLAG®

Naše portfolio exprese značkovaných proteinů FLAG® zahrnuje vektory pro účinnou expresi rekombinantních fúzních proteinů v bakteriálních a savčích systémech. Technologie vektorů SnapFast™ umožňuje snadný přesun genu zájmu z jednoho vektoru do druhého pro účinnější a nákladově efektivnější klonování.

  • Standardní peptid FLAG® (sekvence: DYKDDDDK) je malá značka, kterou lze začlenit s minimálním rizikem sterických překážek nebo negativního vlivu na rozpustnost proteinu
  • Peptid 3xFLAG® sekvence značky spojuje tři tandemové epitopy FLAG® pro zvýšenou (až 200x) detekci fúzních proteinů
zářivě žluté pozadí se středovým fialovým čtvercem se zaoblenými rohy. Uvnitř čtverce je symetrický design se třemi vodorovnými šipkami: jedna nahoře ukazuje doleva a doprava, jedna uprostřed ukazuje na obě strany od středu a jedna dole zrcadlí horní šipku. Od horní šipky k dolní vede svislá čára, která prochází jejich body symetrie. Kolem těchto šipek jsou roztroušeny geometrické tvary: kruhy a kosočtverce nebo kosodélníky.

FLAG® Purifikace proteinů

Nabízíme různé agarozové afinitní purifikační gely, magnetické kuličky, purifikační soupravy a potahované destičky pro izolaci a purifikaci proteinů značených značkou FLAG®.

  • Agarozové afinitní gely umožňují purifikaci fúzně značených proteinů pomocí anti-FLAG® protilátek zesíťovaných na agarosu s kuličkami a jsou vhodné pro purifikaci v malém až velkém měřítku, tyto pryskyřice jsou vhodné pro purifikaci v gravitační koloně.
  • Magnetické kuličky Anti-FLAG® M2 se používají k purifikaci rekombinantního fúzně značeného proteinu pomocí magnetického stojanu nebo platformy k oddělení kuliček a izolaci proteinu pro rychlé zpracování.
  • Anti-FLAG® vysoce citlivé 96jamkové destičky potažené M2 jsou vhodné pro expresní screening, studium interakcí protein-protein a testy ELISA.
fialové čáry na žlutém pozadí, které připomínají abstraktní zobrazení písmene "K". Návrh je jednoduchý, má čisté linie a neobsahuje žádné další ozdoby ani textury.

FLAG® Detekce tagů

TagyFLAG® a 3xFLAG™ obsahují vazebná místa pro vysoce specifické anti-FLAG tagy.sup>® monoklonální protilátky, jakož i polyklonální protilátky a konjugáty pro ELISA, blotovací aplikace, imunofluorescenci, imunocytochemii, imunohistochemii (IHC), blotování a průtokovou cytometrii.

  • Protilátka M2 anti-FLAG® se váže na N-terminální FLAG .sup>®, C-terminální FLAG® a Met-FLAG® fúzní proteiny.
  • Vazba M1 anti-FLAG® protilátky je závislá na vápníku a je specifická pro N-konec FLAG® značky.
  • Protilátka M5 anti-FLAG® protilátce váže N-terminální FLAG® a Met-FLAG® fúzní proteiny.
*IP = imunoprecipitace; IC = imunochemie, WB = Western blot, EIA = enzymová imunosorbční analýza (ELISA).

Související zdroje

  • Brochure: Refine Protein Preparation

    Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.

  • User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins

    The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.

  • Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

    The strength and specificity of interactions between biomolecules have been exploited for years in biochemical research. Affinity-based protein purification techniques have been used extensively to isolate and purify specific proteins or classes of proteins from complex biochemical mixtures, such as cell lysates..

Související kategorie výrobků
Purifikace proteinů protilátek
Purifikační pryskyřice a předbalené kolony pro purifikaci protilátek v laboratorním, procesním i průmyslovém měřítku.
Purifikace proteinů s rekombinantní/fúzní značkou
Optimalizujte purifikaci proteinů pomocí naší řady afinitních pryskyřic a pufrů pro různé značky a purifikační techniky.
Gely a pufry pro elektroforézu proteinů
Předpřipravené polyakrylamidové proteinové gely, pracovní pufry a činidla pro ruční lití polyakrylamidových gelů pro elektroforézu proteinových gelů PAGE a SDS-PAGE.
Gelová barviva pro elektroforézu proteinů
Vysoce citlivé kolorimetrické a fluorescenční barvení proteinových gelů, fixační roztoky a činidla pro odstraňování barviv z polyakrylamidových gelů, agarózových gelů a PVDF a nitrocelulózových membrán.
Purifikace biotinylovaných proteinů
Streptavidinové a avidinové pryskyřice a předbalené kolony pro purifikaci biotinylovaných proteinů a protilátek v malém i velkém měřítku.
Subcelulární frakcionace, obohacování a depleční činidla
Subcelulární frakcionace a obohacování proteinů umožňují identifikaci a studium proteinů v proteomickém výzkumu. Pro subcelulární frakcionaci, extrakci, depleci a obohacení proteinů je k dispozici široký výběr souprav pro zpracování vzorků z buněk, tkání, bakterií, rostlin a dalších typů vzorků.
Pufry pro buněčnou lyzi a činidla pro extrakci proteinů
Soupravy pro extrakci proteinů, pufry pro buněčnou lýzu a činidla pro solubilizaci proteinů z bakterií, kvasinek a hmyzích kultur, jakož i rostlinných a savčích buněčných kultur a vzorků tkání.
Inhibitory fosfatáz a proteáz
Inhibitory a koktejly zachovávají aktivitu proteinů během buněčné lýzy a přípravy vzorků a zabraňují proteolýze a defosforylaci.
Související aplikace
Purifikace proteinů
Techniky čištění proteinů, činidla a protokoly pro čištění rekombinantních proteinů pomocí metod zahrnujících iontovou výměnu, vylučování velikosti a afinitní chromatografii.
Exprese bílkovin
Technologie exprese proteinů pro různé expresní systémy podporující výzkum, terapii a výrobu vakcín.
Lýza a extrakce proteinů
Přehled metod buněčné lýzy a extrakce proteinů, včetně rozpouštění detergentem, lýzy mrazem a rozmrazováním, osmotického šoku, sonikace, enzymatické buněčné lýzy a mechanických rozrušovacích technik, jako je Dounce, Polytron a homogenizace hmoždířem a pěchovadlem.
Techniky vytahování bílkovin
Zkoumejte interakce protein-protein in vitro pomocí pull-down testů s využitím afinitních metod, GST pull-down, TAP a koimunoprecipitace.
Koncentrace bílkovin a výměna pufrů
Přehled technik používaných ke koncentraci a čiření proteinových vzorků pro purifikaci, bioprocesing a analýzu. Obsahuje protokoly a videa pro filtrační a ultrafiltrační techniky, obohacování proteinů a odsolování a výměnu pufrů pomocí dialyzačních, diafiltračních a chromatografických metod.
Gelová elektroforéza
Proteinová gelová elektroforéza se používá k separaci proteinů za účelem purifikace, charakterizace a detekce. Metody jako nativní PAGE, SDS-PAGE, 2D PAGE a izoelektrická fokusace (IEF) se používají při přípravě na následné aplikace včetně Western blottingu, hmotnostní spektrometrie a proteomické analýzy.
Western Blotting
Přehled principů a aplikací Western blottingu pro detekci proteinů. Obsahuje odkazy na podrobné protokoly, videa a další zdroje pro extrakci proteinů, gelovou elektroforézu, přenos na PVDF nebo nitrocelulózové membrány a chemiluminiscenční, kolorimetrické a fluorescenční metody detekce.
Chcete-li pokračovat, musíte se přihlásit.

Abyste mohli pokračovat ve čtení, přihlaste se nebo vytvořte účet.

Nemáte účet?