Purifikace biotinylovaných proteinů

Biotinylované proteiny a biotinylované protilátky se běžně používají v základním výzkumu a při objevování léčiv. K dispozici jsou různé afinitní chromatografické pryskyřice a předbalené kolony a destičky pro vazbu, izolaci a čištění biotinylovaných proteinů a protilátek.

Přečtěte si více informací o

• Agarosové kuličky a afinitní gely
• Magnetické kuličky
• SigmaScreen™ Streptavidin-coated High Capacity Plates
• Cytiva™ Amersham Chromatography Columns and Media

Agarosové kuličky a afinitní gely

Agarosové kuličky a afinitní gely umožňují purifikaci biotinylovaných proteinů a biotinylovaných protilátek pomocí streptavidinu nebo avidinu zesíťovaného s agarosou. Jak avidin, tak streptavidin se vážou na biotin s vysokou afinitou, ačkoli avidin může vykazovat vysokou nespecifickou vazbu. Extravidin®-agarose používá modifikovaný avidin s velmi vysokou afinitou a specifitou k biotinu. Tyto pryskyřice jsou vhodné pro purifikaci v malém i velkém měřítku, jsou vhodné pro gravitační průtokovou kolonovou purifikaci, nízkorychlostní centrifugaci při dávkovém zpracování a nízkotlaké chromatografické postupy. Afinitní gely EZview™ obsahují červené barvivo, které umožňuje uživateli snadno odlišit pelet od supernatantu, což vede k menším ztrátám proteinů při dávkovém čištění.

Magnetické kuličky

Magnetické kuličky Streptavidin společnosti PureProteome™ poskytují rychlý a reprodukovatelný způsob purifikace imunoglobulinů z komplexních směsí, jako jsou vzorky séra, plazmy nebo supernatantu buněčných kultur. Biotinylované proteiny a biotinylované protilátky se purifikují pomocí magnetického stojanu nebo platformy pro oddělení kuliček od promývacích a elučních frakcí. Tento postup je vhodný pro nízkou výkonnost s použitím jednotlivých mikrozkumavek nebo vyšší výkonnost s použitím 96jamkových destiček s automatizací nebo bez ní. Magnetické částice streptavidinu lze také použít k purifikaci biotinylovaných proteinů a biotinylovaných protilátek.

SigmaScreen™ Streptavidinem potažené vysokokapacitní destičky

SigmaScreen™ s vysokokapacitním povlakem streptavidinu využívají patentovanou technologii povlaku, která poskytuje podstatně větší vazebnou kapacitu biotinu než standardní destičky s povlakem streptavidinu nebo ExtrAvidinu. S vazebnou kapacitou 300 pmol/jamku (formát 96 jamek) nebo 150 pmol/jamku (formát 384 jamek) umožňují tyto destičky eluci zachyceného proteinu pro následnou analýzu různými metodami, jako je MALDI, ICAT nebo SDS-PAGE. Vysokokapacitní destičky SigmaScreen™ potažené streptavidinem jsou vyráběny podle normy ISO 9002 v našem závodě GMP a poskytují vysokou konzistenci mezi jednotlivými jamkami a destičkami.

Cytiva™ Amersham chromatografické sloupce a média

K dispozici je celá řada chromatografických kolon a médií Cytiva™ Amersham pro spolehlivé purifikace biotinylovaných proteinů a protilátek s vysokým rozlišením v malém i velkém měřítku.

• Kolony SpinTrap™ jsou předbalené spinové kolony na jedno použití pro jednoduché purifikace biotinylovaných proteinů a biotinylovaných protilátek v malém měřítku.
• Kolony HiTrap™ HP jsou předbalené vysoce účinnou pryskyřicí Streptavidin Sepharose™ pro rutinní preparativní purifikace biotinylovaných proteinů a protilátek.
• MultiTrap™ 96jamkové filtrační destičky poskytují rychlý a spolehlivý formát pro purifikaci biotinylovaných proteinů a protilátek v malém měřítku pomocí předbalených 96jamkových filtračních destiček, které lze odstřeďovat nebo filtrovat ve vakuu, ručně nebo pomocí automatizovaných robotických systémů.
• Média Sepharose™ s treptavidinem Mag se skládají z magnetických kuliček na bázi Sepharose™ navržených pro zjednodušení obohacování cílových proteinů pomocí imunoprecipitace nebo pull-down aplikací a lze je použít pro rychlé purifikace a screening biotinylovaných proteinů a biotinylovaných protilátek z buněčných supernatantů v malém měřítku.
• Streptavidinová pryskyřice Sepharose™ High Performance je k dispozici také samostatně pro škálování purifikace.