D4513
Desossiribonucleasi I
Type II-S, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein
Sinonimo/i:
DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
bovine pancreas
Sterilità
sterile-filtered
Tipo
Type II-S
Stato
lyophilized powder
Attività specifica
≥2,000 units/mg protein
PM
~31 kDa
Purificato mediante
chromatography
Composizione
Protein, ≥80%
Confezionamento
vial of ≥10.0 mg protein
tecniche
DNA purification: suitable
Impurezze
endotoxin, tested
Solubilità
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
Compatibilità
suitable for molecular biology
applicazioni
diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
Attività estranea
Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%
Temperatura di conservazione
−20°C
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Applicazioni
DNasi I da Sigma è stato paragonato all′inibitore interleuchina 1 derivato da urina umana per la capacità di idrolisi di [14C]DNA [14C]DNA. È stato anche impiegato per tagliare un frammento di 139 basi dalla coppia di enzimi di restrizione Hind III/Nci I per studiarne la stabilità per l′uso in esperimenti con la tecnica delle impronte. La DNasi I è ampiamente usata nella tecnica delle impronte per studiare farmaci e proteine che si legano al DNA.
La desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stata usata in uno studio per investigare un nuovo approccio per ottenere RNasi, DNasi, colesterolesterasi e tripsine altamente attive da pancreas di animali da allevamento. Desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stato impiegata in uno studio per investigare l′isolamento e la successiva caratterizzazione della DNasi di fegato di carpa.
Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.
Azioni biochim/fisiol
DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesteri adiacenti a pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′ terminali. In presenza di Mg2+, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti del taglio sono casuali. Entrambi i filamenti di DNA sono tagliati approssimativamente alla stessa altezza in presenza di Mn2+. Il pH ottimale è fra 7 e 8. Cationi bivalenti come Mn2+, Ca2+, Co2+, e Zn2+ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca2+ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D distinguibili per via cromatografica con i loro rapporti molari 4:1:1 rispettivamente. Si trova solo una piccola quantità di D. 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecil solfato (SDS) e actina sono noti inbitori dell′attività enzimatica.
Definizione di unità
Un′unità Kunitz produrrà un aumento di ΔA260 di 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 e 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato. (1 unità = 1 unità Kunitz)
Stato fisico
Polvere liofilizzata contenente cloruro di calcio
Nota sulla preparazione
L′enzima in polvere può essere ricostituito in acqua o in qualunque tampone a pH compreso tra 4,0 e 9,0, ad eccezione del tampone fosfato. Evitare i chelanti del calcio. La soluzione di DNAsi 10 mg/mL in NaCl 0,15M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate frazionate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6%/ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.
Risultati analitici
Proteina determinata da biureto.
Inibitore
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Resp. Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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