D4513

Desossiribonucleasi I

Type II-S, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

• Sinonimo/i: DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
• Numero CAS: 9003-98-9
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-667-0
• MDL number: MFCD00130918
• Numero CE: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥2,000 units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Proprietà

• biological source: bovine pancreas
• Quality Segment: 300
• sterility: sterile-filtered
• type: Type II-S
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥2,000 units/mg protein
• mol wt: ~31 kDa
• purified by: chromatography
• composition: Protein, ≥80%
• packaging: vial of ≥10.0 mg protein
• technique(s): DNA purification: suitable
• impurities: endotoxin, tested
• solubility: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)
• suitability: suitable for molecular biology
• application(s): diagnostic assay manufacturing
• foreign activity: Chymotrypsin ≤0.01%, Protease ≤0.005%, RNase ≤0.01%
• storage temp.: −20°C

Descrizione

Application

DNasi I da Sigma è stato paragonato all′inibitore interleuchina 1 derivato da urina umana per la capacità di idrolisi di [¹⁴C]DNA [¹⁴C]DNA.[1] È stato anche impiegato per tagliare un frammento di 139 basi dalla coppia di enzimi di restrizione Hind III/Nci I per studiarne la stabilità per l′uso in esperimenti con la tecnica delle impronte. La DNasi I è ampiamente usata nella tecnica delle impronte per studiare farmaci e proteine che si legano al DNA.[2]

La desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stata usata in uno studio per investigare un nuovo approccio per ottenere RNasi, DNasi, colesterolesterasi e tripsine altamente attive da pancreas di animali da allevamento. Desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stato impiegata in uno studio per investigare l′isolamento e la successiva caratterizzazione della DNasi di fegato di carpa.

Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.

Biochem/physiol Actions

DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesteri adiacenti a pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′ terminali. In presenza di Mg²⁺, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti del taglio sono casuali. Entrambi i filamenti di DNA sono tagliati approssimativamente alla stessa altezza in presenza di Mn²⁺. Il pH ottimale è fra 7 e 8. Cationi bivalenti come Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺, e Zn²⁺ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca²⁺ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D distinguibili per via cromatografica con i loro rapporti molari 4:1:1 rispettivamente. Si trova solo una piccola quantità di D.[3] 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecil solfato (SDS)[4] e actina[5] sono noti inbitori dell′attività enzimatica.

Physical form

Polvere liofilizzata contenente cloruro di calcio

Preparation Note

L′enzima in polvere può essere ricostituito in acqua o in qualunque tampone a pH compreso tra 4,0 e 9,0, ad eccezione del tampone fosfato. Evitare i chelanti del calcio. La soluzione di DNAsi 10 mg/mL in NaCl 0,15M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate frazionate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6%/ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.

Analysis Note

Proteina determinata da biureto.

Other Notes

Un′unità Kunitz produrrà un aumento di ΔA₂₆₀ di 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 e 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato. (1 unità = 1 unità Kunitz)

Vincitore del CiteAb Award 2024 per i fornitori che hanno conseguito risultati nella ricerca sul Parkinson

Informazioni sulla sicurezza

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)