D5025
Desossiribonucleasi I
Type IV, lyophilized powder, ≥2,000 Kunitz units/mg protein
Sinonimo/i:
DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
bovine pancreas
Livello qualitativo
Tipo
Type IV
Stato
lyophilized powder
Attività specifica
≥2,000 Kunitz units/mg protein
PM
~31 kDa
Purificato mediante
chromatography
Composizione
Protein, ≥80%
tecniche
DNA purification: suitable
Solubilità
0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear, colorless
Compatibilità
suitable for molecular biology
applicazioni
diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing
Attività estranea
Chymotrypsin ≤0.5%
Protease ≤0.05%
RNase ≤0.02%
Condizioni di spedizione
wet ice
Temperatura di conservazione
−20°C
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Applicazioni
Desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stato impiegata in uno studio per investigare l′analisi bidimensionale di zimogrammi delle nucleasi in Bacillus subtilis. Desossiribonucleasi I da pancreas bovino è stata usata in uno studio per investigare gli effetti di farmaci che si legano ai solchi maggiori e minori e intercalatori nella associazione al DNA di proteine legate al solco minore RecA e desossiribonucleasi I.
La DNasi I è usata per tagliare il DNA come primo stadio dell′incorporazione di basi marcate nel DNA. L′enzima Sigma è stato utilizzato per trattare tessuto cerebrale di ratto. Questo studio ha dimostrato che la crescita degli assoni sugli astrociti non è inibita dagli oligodendrociti. In un altro studio, campioni fissati e scongelati di E. coli sono stati digeriti con DNasi Sigma insieme ad altri enzimi. La digestione è stata condotta prima della permeabilizzazione e colorazione degli acidi nucleici.
Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.
Azioni biochim/fisiol
La DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesterici adiacenti alle pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′-terminali. In presenza di Mg2+, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti di clivaggio sono casuali. Invece, in presenza di Mn2+ i due filamenti di DNA vengono tagliati approssimativamente alla stessa altezza. Il pH ottimale è fra 7 e 8. I cationi bivalenti come Mn2+, Ca2+, Co2+, e Zn2+ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca2+ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D, distinguibili cromatograficamente, i primi tre in rapporto molare 4:1:1. La forma D è presente solo in piccola quantità. 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecilsolfato (SDS) e actina sono noti inibitori dell′attività enzimatica.
Definizione di unità
Un′unità Kunitz produrrà un aumento di ΔA260 di 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 a 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato.
Stato fisico
Polvere liofilizzata, contenente cloruro di calcio
Nota sulla preparazione
Una soluzione di DNAsi I 10 mg/mL in NaCl 0,15 M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde la sua attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6% all′ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.
Risultati analitici
Proteina determinata da biureto.
Inibitore
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Resp. Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 3
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
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