04716728001
Roche
DNasi I ricombinante, senza RNasi
from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
bovine pancreas
Livello qualitativo
Ricombinante
expressed in Pichia pastoris
Forma fisica
solution
PM
~39 kDa
Confezionamento
pkg of 10,000 U
Produttore/marchio commerciale
Roche
pH ottimale
7.0-8.0
Categorie correlate
Descrizione generale
DNasi I ricombinante è un′endonucleasi DNA-specifica. L′enzima catalizza la degradazione del DNA sia a doppio che a singolo filamento in modo casuale idrolizzando legami fosfodiesterici al DNA, fino a realizzare una miscela di oligo e mononucleotidi. Tutti i materiali usati nel processo di produzione di DNasi I ricombinante sono di origine non animale, per cui il prodotto è privo di componenti animali.
Contenuto
Contenuto
- DNasi I ricombinante, senza RNasi, 10 U/μL
- Tampone di incubazione, concentrato 10x
Specificità
Inattivazione termica: Una unità di DNasi I ricombinante, senza RNasi, viene inattivata dal calore dopo incubazione a 75 °C per 10 minuti.
Nota importante: In alternativa, DNasi I ricombinante, senza RNasi può essere inattivata e rimossa con l′estrazione mediante fenolo conformemente ai protocolli standard, per es. Protocolli correnti in biologia molecolare.
Nota importante: In alternativa, DNasi I ricombinante, senza RNasi può essere inattivata e rimossa con l′estrazione mediante fenolo conformemente ai protocolli standard, per es. Protocolli correnti in biologia molecolare.
Applicazioni
DNasi I ricombinante, senza RNasi, può essere usata per degradare il DNA in applicazioni sensibili alla presenza di RNasi. Per esempio, DNasi I si usa spesso per:
- Rimuovere il DNA genomico dalle preparazioni di RNA prima della RT-PCR
- Isolare l′RNA privo di DNA dopo reazioni di trascrizione in vitro
- Eseguire traduzioni del nick
- Mappare regioni sensibili alla DNasi nel DNA degli eucarioti
Caratteristiche e vantaggi
- Elimina la contaminazione di DNA da qualunque campione di RNA
- Non è presente RNasi rilevabile né attività proteasica
- Può essere inattivata dal calore, eliminando quindi la necessità di estrazione organica
- Spedita con un tampone di incubazione ottimizzato, che sostiene la massima attività DNasi
- Prodotto attraverso un processo che non prevede alcun uso di animali, per eliminare eventuali rischi associati al materiale di derivazione animale
Confezionamento
1 kit con 2 componenti
Qualità
Assenza di contaminanti: Ciascun lotto è testato per garantire l′assenza di RNasi e proteasi, sulla base delle attuali procedure di Controllo Qualità.
Specifiche
Forma glicosilata
DNasi I ricombinante è N-glicosilata in modo eterogeneo, per cui all′elettroforesi su gel appare in due bande.
Necessità di ioni divalenti
Per la massima attività, DNasi I necessita di cationi divalenti. L′endonucleasi DNA-specifica viene attivata da ioni quali gli ioni magnesio ed è stimolata dagli ioni calcio. Quindi l′enzima è inibito da agenti chelanti dei metalli come l′EDTA.
DNasi I ricombinante è N-glicosilata in modo eterogeneo, per cui all′elettroforesi su gel appare in due bande.
Necessità di ioni divalenti
Per la massima attività, DNasi I necessita di cationi divalenti. L′endonucleasi DNA-specifica viene attivata da ioni quali gli ioni magnesio ed è stimolata dagli ioni calcio. Quindi l′enzima è inibito da agenti chelanti dei metalli come l′EDTA.
Definizione di unità
Una unità è l′attività enzimatica che induce un aumento dell′assorbanza di 0,001/minuto nelle condizioni del saggio in 1 mL a 260 nm.
Condizioni del saggio:
L′attività del volume è determinata in base alla seguente miscela del saggio. 100 μg di DNA di timo di vitello vengono incubati in 2,5 ml di tampone di incubazione 1x con 40-70 unità di DNasi I ricombinante, senza RNasi at +25 °C. A 260 nm si misura l′aumento dell′assorbanza.
Condizioni del saggio:
L′attività del volume è determinata in base alla seguente miscela del saggio. 100 μg di DNA di timo di vitello vengono incubati in 2,5 ml di tampone di incubazione 1x con 40-70 unità di DNasi I ricombinante, senza RNasi at +25 °C. A 260 nm si misura l′aumento dell′assorbanza.
Nota sulla preparazione
Attivatore: Ioni metallici bivalenti
Soluzione di lavoro:Tampone di stoccaggio 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM ditioeritritolo, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50% glicerolo (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampone di incubazione (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH 7,9.
Tampone di diluizione dell′enzima: 25 mM Tris-HCl, 50% glicerolo (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Soluzione di lavoro:Tampone di stoccaggio 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 2 mM MgCl2, 1 mM ditioeritritolo, 0,1 mg/ml Pefabloc SC, 50% glicerolo (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Tampone di incubazione (10x): 400 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 60 mM MgCl2, 10 mM CaCl2, pH 7,9.
Tampone di diluizione dell′enzima: 25 mM Tris-HCl, 50% glicerolo (v/v), pH 7,6 (a 4 °C).
Stoccaggio e stabilità
Conservare la soluzione dell′enzima non diluita tra -15 e -25 °C; tampone di conservazione a 4 °C.
Altre note
Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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