P5568
Proteinase K
≥500 units/mL, buffered aqueous glycerol solution
Sinônimo(s):
Endopeptidase K
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About This Item
Número CAS:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54
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Produtos recomendados
fonte biológica
microbial (T.album
T. ALBUM)
Nível de qualidade
Formulário
buffered aqueous glycerol solution
peso molecular
28.93 kDa
concentração
≥10 mg/mL
≥500 units/mL
técnica(s)
DNA extraction: suitable
temperatura de armazenamento
2-8°C
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Descrição geral
Proteinase K, an extracellular endopeptidase is synthesized by the mold, Tritirachium album Limber. Proteinase K belongs to a new subfamily of the subtilisins. It is a 277 amino acid protein and is characterized with an unhydrolyzed protein chain and autolyzed polypeptide chains.[1]
Aplicação
Útil na inativação proteolítica de nucleases durante o isolamento de DNA e RNA.
Útil na inativação proteolítica de nucleases durante o isolamento de DNA e RNA.
Remove endotoxinas que se ligam a proteínas catiônicas, como lisozima e ribonuclease A.
Segundo relatos, é útil no isolamento de mitocôndrias de fígado, levedura e feijão-mungo
Determinação da localização de enzimas em membranas
Tratamento de cortes de tecido embebidos em parafina para expor sítios de ligação a antígenos para marcação com anticorpos.
Digestão de proteínas de amostras de tecido cerebral para obter príons para pesquisa em encefalopatias espongiformes transmissíveis (EET).
Remove endotoxinas que se ligam a proteínas catiônicas, como lisozima e ribonuclease A.
Segundo relatos, é útil no isolamento de mitocôndrias de fígado, levedura e feijão-mungo
Determinação da localização de enzimas em membranas
Tratamento de cortes de tecido embebidos em parafina para expor sítios de ligação a antígenos para marcação com anticorpos.
Digestão de proteínas de amostras de tecido cerebral para obter príons para pesquisa em encefalopatias espongiformes transmissíveis (EET).
Proteinase K from Tritirachium album has been used:
Proteinase K from Tritirachium album has been used in in situ detection of DNA fragmentation[4] and in proteolysis experiments to measure the structural flexibility of interleukin 1ra (IL-1ra).[5]
The enzyme from Sigma has been used in the digestion of sealed cytosolic side out ER vesicles.[3] It has been used to deproteinize dissected brain and/or whole pupae sections of honey bee prior to in situ hybridisation. This was done during the study of neuropeptide Y-like signaling, and nutritionally-mediated gene expression and behaviour in the honey bee.[6]
Ações bioquímicas/fisiológicas
A proteinase K é uma protease de serina estável e altamente reativa. Evidências provenientes de estudos da estrutura cristalina e molecular indicam que a enzima pertence à família das subtilisinas, com uma tríade catalítica no sítio ativo (Asp39-His69-Ser224). Ela é estável em uma ampla variedade de ambientes: pH, sais tamponantes, detergentes (SDS) e temperatura. Na presença de SDS a 0,1%-0,5%, a proteinase K retém sua atividade e digere diversas proteínas e nucleases em preparados de DNA, sem comprometer a integridade do DNA isolado.
Proteinase K has a broad specificity and degrades many proteins even in the native state. It mainly cleaves the peptide bond adjacent to the carboxyl group of aliphatic and aromatic amino acids with blocked alpha-amino groups.[7][8][9] The optimum pH is between 7.5-9.0[7][8] and the isoelectric point is 8.9.[7] Ca2+ (1-5 mM) is required for activation. Proteinase K is inhibited by DIFP or PMSF.[8]
Definição da unidade
One unit will hydrolyze urea-denatured hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 μmole of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).
forma física
Solution in 40% (v/v) glycerol containing 10 mM Tris-HCl, pH 7.5, with 1 mM calcium acetate.
Nota de preparo
Proteinase K in solution is stable over a pH range of 4.0-12.5 (optimum pH 8.0), and is also stable over the temperature range of 25°C to 65°C during use. At pH 8.0, solutions will be stable for at least 12 months at 4°C.[8] At pH 4-11.5, solutions containing Ca2+ (1-6 mM) are expected to be stable for several weeks. An 80% ammonium sulfate suspension stored at 4°C is stable for at least 12 months.[7]
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Resp. Sens. 1
Código de classe de armazenamento
10 - Combustible liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Equipamento de proteção individual
Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter
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Protocolos
Proteinase K activity measured via spectrophotometry using hemoglobin substrate, crucial for enzyme characterization.
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