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I1884

Sigma-Aldrich

Suplemento de meio de insulina-transferrina-selenito de sódio

γ-irradiated, lyophilized powder, BioXtra, suitable for cell culture

Sinônimo(s):

Suplemento ITS

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Código UNSPSC:
12352205
NACRES:
NA.75

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fonte biológica

human plasma

Nível de qualidade

esterilidade

γ-irradiated

linha de produto

BioXtra

Formulário

lyophilized powder

técnica(s)

cell culture | mammalian: suitable

nº de adesão UniProt

Condições de expedição

ambient

temperatura de armazenamento

−20°C

Informações sobre genes

human ... INS(3630)

Descrição geral

As formulações livres de soro e com soro reduzido, em geral, requerem formas purificadas dos fatores fornecidos normalmente pelo soro que são adequados para estudos de crescimento e diferenciação in vitro. Esses fatores importantes incluem insulina, transferrina, selênio, piruvato e etanolamina.

A INSULINA é um hormônio polipeptídico que promove a captação de glicose e aminoácidos e pode causar o efeito mitogênico observado a esta propriedade.

A TRANSFERRINA é uma proteína de transporte de ferro. O ferro é um elemento em nível de traço essencial, mas pode ser tóxico na forma livre. Para nutrir as células em cultura, é fornecido ligado à transferrina em soro.

O SELÊNIO é um elemento em nível de traço essencial normalmente fornecido pelo soro.

Estudos nutricionais indicam que os componentes do suplemento descritos são utilizados pela maioria das células de mamíferos. Eles aumentam a proliferação celular e diminuem a necessidade de soro de muitos tipos celulares. Quando o suplemento fornecido é usado com 2 a 4 por cento de soro, relata-se que a proliferação é semelhante à observada em meio suplementado com 10 por cento de soro.
O suplemento de meio de insulina/transferrina/selenito de sódio dá suporte ao crescimento e à maturação de folículos de oócito in vitro e é usado rotineiramente em métodos de fertilização in vitro.[1]

Aplicação

O suplemento de meio de insulina/transferrina/selenito de sódio foi usado como:
  • meio de suplemento meio 199 (M199) para cultura de miócitos cardíacos[2]
  • Componente do meio do Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 para cultura de células-tronco pluripotentes (iPSC)[3]
  • suplemento de meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) em células ID8 de carcinoma ovariano/[4]

Outras notas

A ITS é uma mistura de insulina humana recombinante, transferrina humana e selenito de sódio. É um suplemento celular geral desenvolvido para uso em meios não complexos (como MEM, RPMI-1640) e meios complexos (como F-12 de Ham, DME/F-12, MEM) com piruvato de sódio.
Cada frasco contém: ≥21 mg de insulina humana recombinante; ≥19 mg de transferrina humana (substancialmente livre de ferro) e 25 μg de selenito de sódio.

Quantidade

Cada frasco é suficiente para preparar 5 litros de meio.

Código de classe de armazenamento

11 - Combustible Solids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 3

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable

Equipamento de proteção individual

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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Artigos

Understand how transferrin affects serum-free cell culture systems, crucial for biomanufacturing heterologous proteins like monoclonal antibodies.

Questions

1–7 of 7 Questions  
  1. which is the concentration of each component? Insulin-transferrin-sodium selenite media supplement. I1884

    1 answer
    1. The concentration of each component is listed in the Product Information Sheet. Please see the product documentation section:
      https://www.sigmaaldrich.com/product/sigma/i1884#product-documentation

      Helpful?

  2. When we add this ITS at 100X to our Ham's F12 medium it drastically adjusts the color, and the pH drops to ~6.5 from 7.2. The ITS is made up exactly as directed with 5ml acidified water and 45ml sterile water and this still occurs, why? Medium is buffered

    1 answer
    1. The 100X stock solution of this product is prepared by reconstituting this product in 5 mL water containing 0.1 mL of Acetic acid. In general, culture media are buffered using Sodium Bicarbonate or other suitable buffers. While prepared in acidified water, the volume of the ITS stock solution added is typically insufficient to effect the pH of a buffered medium. The molarity of the acetic acid is not specified, which may be contributing to the drop in pH of the final medium. Reducing the molarity of the Acetic acid may resolve the issue, 1 M is commonly used. See the link below, at the bottom of page 1, for recommended preparation instructions. To discuss further, we kindly ask you to navigate to the link https://www.sigmaaldrich.com/techservice, click on "Report Product Issues" under the Products Section with all the required information so that a member of our team can reach out to you to assist further. Thank you.

      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/365/201/p6024pis.pdf

      Helpful?

  3. The *I1884 needs to be prepared with acidified water, which acidifies the pH of the medium when it is added to the culture medium, is it necessary to adjust the pH of the I1884 to pH 7-7.4, after preparing it and before adding it to the medium?

    1 answer
    1. Adjusting the pH is not necessary or recommended. This is prepared at a 100X concentration. The volume added to buffered culture medium for the 1X amount is not sufficient to cause a shift in the pH.

      Helpful?

  4. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  5. What is the stability of I1884, Insulin-transferrin-sodium selenite media supplement (ITS Supplement), in solution?

    1 answer
    1. The stock solution can be frozen in working aliquots. Avoid repeated freeze/thaw cycles. Frozen working aliquots will be stable for at least one year. The solution is stable at 2-8°C for 30 days.

      Helpful?

  6. How should I reconstitute I1884, Insulin-transferrin-sodium selenite media supplement (ITS Supplement)?

    1 answer
    1. First, make acidified water by adding acetic acid to reduce the pH to approximately 2. To prepare a stock solution, dissolve the contents of the vial in 5 mL sterile, acidified water and swirl to dissolve. Then add 45 mL of sterile water. This prepared solution is at 100X.  It is diluted 100 fold (1 ml to 100 ml) to give a 1X final concentration.

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  7. What is the activity of insulin in I1884, Insulin-transferrin-sodium selenite media supplement (ITS Supplement)?

    1 answer
    1. The starting material has an activity of greater than or equal to 25.2 USP units/mg insulin.  The concentration of insulin at 100X is 5 mg/L.

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