11647229001

ELISA para proliferação celular, BrdU (colorimétrico)

sufficient for ≤1,000 tests

• Sinônimo(s): proliferação celular
• Código UNSPSC: 41116158

Propriedades

• uso: sufficient for ≤1,000 tests
• Nível de qualidade: 100
• fabricante/nome comercial: Roche
• técnica(s): ELISA: suitable
• método de detecção: colorimetric
• temperatura de armazenamento: 2-8°C

Descrição

Descrição geral

Imunoensaio colorimétrico para quantificação da proliferação celular, com base na medição da incorporação de BrdU durante a síntese de DNA:  uma alternativa não radioativa ao ensaio de incorporação de [³H]-timidina.

Especificidade

O conjugado de anticorpo reage com o análogo da timidina 5-bromo-2′-desoxiuridina (BrdU) e com a BrdU incorporada no DNA. Para se ligar à BrdU incorporada no DNA, o DNA marcado com BrdU tem que estar desnaturado. O anticorpo não faz reação cruzada com nenhum componente celular endógeno, como timidina, uridina ou DNA.

Aplicação

Somente para fins de pesquisa. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.
O BrdU (colorimétrico) para ELISA de proliferação celular pertence à segunda geração aprimorada de kits para medição de síntese de DNA. Consiste em uma alternativa colorimétrica precisa, rápida e simples para quantificar a proliferação celular com base na medição da incorporação de BrdU durante a síntese de DNA em células em replicação (ciclagem). Portanto, o ELISA de proliferação celular pode ser usado em vários sistemas celulares in vitro diferentes. Por exemplo:

• Detecção e quantificação da proliferação celular induzida por fatores de crescimento e citocinas.
• Determinação dos efeitos inibitórios ou estimulantes de vários compostos sobre a proliferação celular na pesquisa ambiental e biomédica, bem como nos setores de alimentos, cosméticos e farmacêutico.
• Medição da imunorreatividade de linfócitos, estimulados por mitógenos ou antígenos
• Análise da sensibilidade química de células tumorais a diferentes medicamentos citostáticos na pesquisa médica.
• Teste de biocompatibilidade de várias estruturas poliméricas (scaffolds) usadas na engenharia de tecidos ósseos para crescimento de células ósseas.

Embalagem

1 kit contendo 6 componentes.

Nota de preparo

Concentração de trabalho: O anticorpo do kit (anti-BrdU-peroxidase) tem, após a reconstituição, uma concentração de 7,5 U/ml, após diluição 0,075 U/ml. Ao invés do anticorpo do kit, pode-se usar também o anticorpo anti-BrdU, fragmentos de Fab. Este anticorpo é duplamente concentrado, de modo que é necessário diluir após a reconstituição em 1 ml com 1:200.
Solução de trabalho: solução de marcação de BrdU

Dilua o reagente de marcação de BrdU na proporção 1:100 com meio de cultura estéril (resultando na concentração: 100 μM BrdU).
Para uma MP de 96 poços, 1 ml de solução de marcação de BrdU é necessário se as células tiverem sido cultivadas em 100 μl/poço (10 μl/poço) e 2 ml de solução de marcação BrdU são necessários se as células tiverem sido cultivadas em 200 μl/poço (20 μl/poço).

Solução-estoque de anti-BrdU-peroxidase

Dissolva anti-BrdU-peroxidase em 1,1 ml de água duplamente destilada por 10 minutos e misture bem.

Solução de trabalho de anti-BrdU-peroxidase

Dilua a solução-estoque de anti-BrdU-peroxidase na proporção 1:100 com solução de diluição de anticorpo. Para uma MP de 96 poços dilua 100 μl de solução-estoque anti-BrdU-peroxidase em 10 ml de solução de diluição de anticorpo

Solução de lavagem

Dilua o concentrado de tampão de lavagem na proporção 1:10 com água duplamente destilada.
Para uma MP de 96 poços, dilua 10 ml de concentrado de tampão de lavagem com 90 ml de água duplamente destilada.
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Solução de marcação de BrdU
Reagente de marcação BrdU não diluído (1000x): de 2 ºC a 8 °C por vários meses ao abrigo da luz.
Reagente de marcação de BrdU diluído: de 2 ºC a 8 °C estável por várias semanas. Armazene ao abrigo da luz. Para armazenamento a longo prazo, recomenda-se armazenar a solução de marcação de BrdU em alíquotas em temperaturas de -15 ºC a -25 °C.
Solução-estoque de anti-BrdU-peroxidase
de 2 ºC a 8 °C por vários meses. Para armazenamento a longo prazo, recomenda-se armazenar a solução em alíquotas em temperaturas de -15 ºC a -25 °C.
Solução de trabalho de anti-BrdU-peroxidase
Preparar pouco antes do uso. Não armazenar.
Solução de lavagem
de 2 ºC a 8 °C por várias semanas.

Reconstituição

A solução de trabalho para o anticorpo deve ser uma solução salina tamponada com fosfato contendo 1% de BSA em pH 7,4.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Somente componentes do kit

• BrdU Labeling Reagent
• FixDenat ready-to-use
• Anti-BrdU-peroxidase antibody
• Antibody Dilution Solution ready-to-use
• Washing Buffer PBS 10x concentrated
• Substrate Solution TMB ready-to-use

Informações de segurança

• Pictogramas: GHS02,GHS07,GHS08
• Palavra indicadora: Danger
• Frases de perigo: H225,H317,H319,H340
• Declarações de precaução: P201 - P210 - P233 - P280 - P308 + P313 - P370 + P378
• Classificações de perigo: Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2 - Muta. 1B - Skin Sens. 1
• Código de classe de armazenamento: 3 - Flammable liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1