TR-1001

GPT-Auswahlreagenz, 500X-Mycophenolsäure; 100X-Aminopterin

The Mycophenolic Acid is an antibiotic useful in research for the selection of animal cells that express the E. coli.

• Synonym(e): MPA & Aminopterin solution
• UNSPSC-Code: 12352207
• eCl@ss: 32160801
• NACRES: NA.71

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Form: liquid
• Hersteller/Markenname: Specialty Media
• Aufnahme: sample type: mouse embryonic stem cell(s)
• Versandbedingung: dry ice

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Mycophenolsäure ist ein Antibiotikum, das in der Forschung für die Auswahl von Tierzellen nützlich ist, die das E.-coli-Gen exprimieren, das für die XGPRT-Codierung (Xanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase) kodiert. Mycophenolsäure wird auch als immunsuppressiver Wirkstoff verwendet, da sie die Zellproliferation von Lymphozyten und die Antikörperproduktion hemmt.

Mit dem E.-coli-GPT-Gen transfizierte Zellen können für das Wachstum in einem Medium mit GPT-Auswahlreagenz ausgewählt werden.

Jedes Kit enthält:
• 500X-Mycophenolsäure mit EtOH (12,5 mg/ml) 2 x 1-ml-Fläschchen

• 1 Flasche (10 ml) mit 100X-Aminopterin-Lösung, bestehend aus:
- Xanthin 25 mg/ml
- Hypoxanthin: 1,5 mg/ml
- Aminopterin: 0,2 mg/ml
- Thymidin: 1 mg/ml
- in 0,08 M NaOH

Anwendung

1. Etwa 10⁶ Zellen auf 100-mm-Kulturplatten in Dulbeccos-Modified-Eagle-Medium (DMEM) mit 5 % fötalem Kälberserum und Penicillin/Streptomycin anlegen und 24 Stunden lang wachsen lassen.

2. Die Kultur mit 10-20 μg Plasmid-EcoGPT-DNA transfizieren.

3. Nach 3 Tagen bei 37 °C in DMEM mit 5 % fötalem Kälberserum die Zellmonoschichten trypsinisieren und 5 x 10⁵ Zellen auf frischen 100-mm-Kulturplatten in DMEM mit 10 % dialysiertem fötalem Kälberserum, angereichert mit MPA- und Aminopterinlösungen, dispergieren. Daraus ergibt sich eine endgültige Lösung von ca.: 250 μg/ml Xanthin, 15 μg/ml Hypoxantin, 10 μg/ml Thymidin, 2 μg/ml Aminopterin und 25 μg/ml Mycophenolsäure. Dialysiertes Serum wird verwendet, um den Selektionsprozess zu beschleunigen. Die Auswahl wird bei nicht-dialysiertem Serum langsamer.

4. Vierundzwanzig Stunden später das Medium durch frisches Medium mit den gleichen Supplementen ersetzen und die Flüssigkeit wechseln.

5. Alle 3 Tage wiederholen. Kolonien sind in der Regel nach 7-10 Tagen sichtbar.

Hinweis: Auch andere Basismedien wie Hams F12 können verwendet werden. Viele Faktoren hängen vom verwendeten Zelltyp ab.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei -20 °C aufbewahren

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08,GHS09
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H341 - H360D - H373 - H411
• P-Sätze: P202 - P260 - P273 - P280 - P308 + P313 - P391
• Gefahreneinstufungen: Aquatic Chronic 2 - Muta. 2 - Repr. 1B - STOT RE 2 Oral
• Zielorgane: Immune system
• Lagerklassenschlüssel: 6.1D - Non-combustible, acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable