MAB424R

Anti-PCNA-Antikörper, Klon PC10

clone PC10, Chemicon^®, from mouse

• Synonym(e): Proliferating Cell Nuclear Antigen, DNA Polymerase delta Processivity Factor
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: mouse
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: purified immunoglobulin
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: PC10, monoclonal
• Speziesreaktivität: invertebrates, vertebrates
• Hersteller/Markenname: Chemicon^®
• Methode(n): flow cytometry: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin); immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotyp: IgG2a
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NM_002592.2; NM_182649.1
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P12004
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: unmodified
• Angaben zum Gen: human ... PCNA(5111)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Das proliferierende Zellkernantigen (PCNA) ist ein 36-kDa-Molekül, das zwischen den Spezies stark konserviert ist. PCNA wurde erstmals als Antigen für eine Subpopulation von Autoantikörpern bei Patienten mit systemischem Lupus erythematodes identifiziert (Miyachi, 1978; Takasaki, 1984; Ogata, 1987). Inzwischen wurde festgestellt, dass PCNA als Kofaktor für die DNA-Polymerase-Delta in der S-Phase sowie während der DNA-Synthese im Zusammenhang mit Mechanismen der DNA-Schadensbehebung dient (Tan, 1987; Bravo, 1987). Die zeitliche Spezifität der PCNA-Expression macht sie zu einem idealen Marker für die Zellproliferation. PCNA beginnt in der G1-Phase des Zellzyklus zu akkumulieren, ist in der S-Phase am stärksten vorhanden und nimmt in der G2/M-Phase ab (Kurki, 1988). Da die Halbwertszeit von PCNA mehr als 20 Stunden beträgt, könnte es möglich sein, das Protein in nicht zyklischen Zellen nachzuweisen.

Spezifität

Klon PC10 erkennt PCNA von allen getesteten Wirbeltier- und Insektenspezies und wurde zur Identifizierung von transformierten Zellen (Kurki, 1988), proliferierenden Zellen in soliden Tumoren (Smetana, 1983) und Blastenzellen bei Leukämiepatienten (Takasaki, 1984) verwendet. Die Immunhistochemie mit dem Klon PC10 wurde zur Untersuchung der PCNA-Expression in Paraffinschnitten von normalem Gewebe und lymphoiden Neoplasmen verwendet (Hall, 1990). In proliferierenden Zellen ist das PCNA-Färbemuster überwiegend nuklear. In Western-Blot weist der Antikörper ein Polypeptid nach, das bei 36 kDa mit einem isoelektrischen Punkt von 4,8 migriert.

Immunogen

Ratten-PCNA, hergestellt im Protein-A-Vektor pR1T2T

Anwendung

Anti-PCNA-Antikörper, Klon PC10, ist ein monoklonaler Maus-Antikörper zum Nachweis von PCNA, auch bekannt als proliferierendes Zellkernantigen, DNA-Polymerase-delta-Prozessivitätsfaktor, der in FC, IP, WB und IHC(P) validiert wurde.

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Forschungsunterkategorie
Zellzyklus, DNA-Replikation und -Reparatur

Western-Blot: 1:250–1:1.000. Zellkernextrakte werden gegenüber Ganzzellproteinextrakten bevorzugt.

Immunhistochemie: 1:20–1:200. Nur für in Paraffin eingebettete Gewebeschnitte empfohlen. Kann für Substanzen verwendet werden, die in einer Vielzahl von Fixiermitteln fixiert wurden, darunter Formalin (gepuffert und ungepuffert), Methacarn und Reagenzien von Bouin. Der Zeitpunkt der Fixierung kann die Intensität der PCNA-Immunreaktivität deutlich beeinflussen. Die Färbung wird reduziert (und kann sogar ganz verschwinden), wenn die Schnitte auf Glasobjektträger gebrannt werden. Lufttrocknung über Nacht auf mit Poly-L-Lysin beschichteten Objektträgern wird empfohlen. Es wird eine 60-minütige Inkubation bei 25 °C mit der Standard-ABC-Technik empfohlen.

Immunpräzipitation

Indirekte Durchflusszytometrie

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.

Physikalische Form

Aufgereinigtes Immunglobulin (Ionenaustauschchromatographie). Flüssig.

Format: Aufgereinigt

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2 bis 8 °C bis zu 6 Monate ab Empfangsdatum haltbar.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Tonsillen- oder reaktives Lymphknotengewebe

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Rechtliche Hinweise

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Haftungsausschluss

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