ABE18

Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys9)-Antikörper

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Synonym(e): H3 histone family, member T, histone 3, H3, histone cluster 3, H3, H3K4ac
• UNSPSC-Code: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Eigenschaften

• Biologische Quelle: rabbit
• Qualitätsniveau: 100
• Antikörperform: affinity isolated antibody
• Antikörper-Produkttyp: primary antibodies
• Klon: polyclonal
• Aufgereinigt durch: affinity chromatography
• Speziesreaktivität: chicken, human, mouse
• Methode(n): ChIP: suitable (ChIP-seq); dot blot: suitable; multiplexing: suitable; western blot: suitable
• NCBI-Hinterlegungsnummer: NP_003484
• UniProt-Hinterlegungsnummer: Q16695
• Versandbedingung: wet ice
• Posttranslationale Modifikation Target: acetylation (Lys9)
• Angaben zum Gen: human ... HIST1H3F(8968)

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Histon H3 ist eines der fünf Haupt-Histon-Proteine von Chromatin in eukaryotischen Zellen. Bestehend aus einer kugelförmigen Hauptdomäne und einem langen N-terminalen Ende, spielt H3 eine Rolle für die Struktur der Nukleosome und somit der ′Perlenschnur′-Struktur der Chromatinfäden. Das N-terminale Ende von Histon H3 ragt aus dem kugelförmigen Kern des Nukleosoms heraus und kann durch verschiedene epigenetische Modifikationen, die einen Einfluss auf Zellprozesse haben, verändert werden. Diese Modifikationen sind kovalente Anhänge von Methyl- oder Acetylgruppen an die Aminosäuren Lysin und Arginin sowie die Phosphorylierung von Serin oder Threonin. Die Acetylierung von Histon H3 findet unter dem Einfluss der Enzymfamilie der Histon-Acetyltransferasen (HAT) an verschiedenen Lysin-Positionen am Histonende statt. Es wird angenommen, dass die Acetylierung an Lysin 9 eine Rolle bei der Histonablagerung und dem Chromatinaufbau spielt.

Spezifität

Dieser Antikörper erkennt Histon H3, wenn es an Lys9 acetyliert ist.

Eine weitreichende Kreuzreaktivität zwischen Spezies ist zu erwarten.

Immunogen

Epitop: Acetyliertes Lys9

KLH-konjugiertes lineares Peptid, das dem an Lys9 acetylierten menschlichen Histon H3 entspricht.

Anwendung

Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys9) Antikörper ist ein polyklonaler Kaninchen-Antikörper zum Nachweis von Histon H3, das an Lysin 9 acetyliert ist. Dieser gereinigte Antikörper, der auch als Anti-H4K9ac bekannt ist, hat eine im Dot-Blot (DB) nachgewiesene Spezifität und wurde in WB, DB, ChIP, Mplex validiert.

Chromatin-Immunpräzipitationsanalyse (ChIP):
Eine repräsentative Charge dieses Antikörpers immunpräzipitierte Chromatin von Histon H3, das an Lys9 acetyliert ist.

ChIP-Sequenzierung:
Die Chromatin-Immunpräzipitation wurde mit dem Magna ChIP HiSens-Kit (Best.-Nr. 17-10460), 2 μg einer repräsentativen Charge des Anti-Acetyl-Histon H3 (Lys9)-Antikörpers (ABE18), 20 μL Protein A/G-Beads und 1e6 quervernetztem HeLa-Zellchromatin durchgeführt, gefolgt von einer DNA-Reinigung mit Magnetbeads. Aus Input- und ChIP-DNA-Proben wurden unter Verwendung von Standardprotokollen mit barcodierten Illumina-Adaptern Bibliotheken erstellt und auf dem Illumina HiSeq-Instrument analysiert. Mehr als dreizehn Millionen Reads aus FastQ-Dateien wurden mit Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) gemappt, nachdem TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/) Tags entfernt hatte. Die Peaks wurden mit MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) identifiziert, wobei die Peaks und Reads als benutzerdefinierter Track im UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu) aus BigWig- und BED-Dateien visualisiert wurden.

Dot-Blot-Analyse:
Eine repräsentative Charge dieses Antikörpers wies Histon H3 in modifizierten und nicht modifizierten Peptiden von acetyliertem und nicht-acetyliertem Histon H3 Lys9 nach.

Luminex-Analyse:
Eine repräsentative Charge dieses Antikörpers erkannte spezifisch acetyliertes Histon H3 auf Lys9 mit dem Luminex-Assay.

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Forschungsunterkategorie
Histone

Qualität

Beurteilt mittels Western Blot in unbehandeltem und behandeltem HeLa-Säureextrakt.

Western-Blot-Analyse: 0,05 µg/ml dieses Antikörpers wies Histon H3 auf 10 µg unbehandeltem und behandeltem HeLa-Säureextrakt mit Natriumbutyrat.

Zielbeschreibung

~17 kDa beobachtet

Physikalische Form

Affinitätsgereinigt

Aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Lagerung und Haltbarkeit

Bei 2–8 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Natriumbutyrat unbehandelt und behandelt HeLa-Säureextrakt

Sonstige Hinweise

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

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