1.07393

Proteinase K

(from Tritirachium album) solution in Tris/HCl pH 7.5; 0.01 mol/l; 600 mAnson-U/ml; for molecular biology EC 3.4.21.14

• Synonym(e): ProK, native proteinase K solution, non-specific protease
• NACRES: NA.51
• UNSPSC Code: 12352204

Eigenschaften

• Quality Segment: 400
• form: liquid
• pH: 7.5 (25 °C in H₂O, undiluted)
• density: 1.10 g/cm³ at 20 °C
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Proteinase K ist eine Endopeptidase, die zur Subtilisin-Familie der Proteinasen gehört. Die Polypeptidkette enthält 278 Aminosäuren mit der katalytischen Triade Asp39, His69, Ser224.

Application

Proteinase K wurde wie folgt verwendet:

• Zur Auflösung der Vernetzung in immunpräzipitierten Proben
• Zur Behandlung der poly-L-Lysin-beschichteten Objektträger mit Kolongewebe für den TUNEL-Assay (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)
• Zur In-situ-Hybridisierung

Biochem/physiol Actions

Proteinase K katalysiert die Hydrolyse von Estern und Peptidbindungen. Sie wird mit nicht wässrigen hydratisierten Lösungsmitteln für die Synthese von Peptiden verwendet. Proteinase K dient zum Aufbrechen der Vernetzungen, die sich sekundär bei der Formalinfixierung entwickeln und exponiert die Zielsequenz gegenüber Primern und der Polymerase.

Analysis Note

Aussehen (Farbe): farblos
Aussehen (Klarheit): klar
Aktivität (Hämoglobin; pH-Wert 7,5; 37 °C): ≥ 600 mAnson-U/ml
Spez. Aktivität (berechnet auf Protein): ≥ 40,0 mAnson-U/mg
DNasen (Nicking-Aktivität; pBR 322; 6 Std.; 37 °C): nicht nachweisbar
RNasen (RNA; 2 Std.; 37 °C): nicht nachweisbar
Keimzahl (aerobe Bakterien): ≤ 10 KBE/ml

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable