魚油和鮭魚中 Omega 3 的 GC 分析

Katherine K. Stenerson, Principal Scientist; Michael R. Halpenny, R&D Technician; Leonard M. Sidisky, R&D Manager; and Michael D. Buchanan, Product Manager,

Reporter US Volume 31.2

食用歐米茄 3 脂肪酸對健康的益處眾多¹。在人體生理學中似乎最重要的變異是：

• C18:3n3, α-亞麻酸 (ALA)
• C20:5n3, 二十碳五烯酸 (EPA)
• C22：6n3，二十二碳六烯酸（DHA）

本文發表的工作目的是鑑定兩種不同來源魚油中的Ω 3 脂肪酸。

實驗

本研究分析的樣品如下：

• 在當地購買的魚油膠囊，標示含有 EPA、DHA 和「其他」Omega 3。
• 大西洋鮭魚片（農場養殖），冷凍真空包裝。

按照 AOAC 方法 991.39² 的描述，使用鹼水解法製備魚油膠囊，然後進行甲基化分析。在整個萃取過程中，混合物被氮氣包覆，以防止多不飽和脂肪酸氧化。按照 AOCS 官方方法 Ce 1k-09³ 所述，鮭魚樣品經過酸消化、鹼水解和甲基化。在萃取前，將丁化羥基甲苯 (BHT) 加入鮭魚樣品中作為抗氧化劑。這兩種方法所使用的甲基化程序會在分析前將脂肪酸轉換成脂肪酸甲酯 (FAME)。

兩種選擇性略有不同的毛細管 GC 柱用於分析。條件根據 AOAC 991.39 和 AOCS Ce 1i-07 方法^2,4。由於這兩種方法共用一套相同的運行條件，因此可以做到這一點。峰值識別是通過與標準品相對應的保留時間來完成的。

結果與討論

沙丁魚和鯷魚被列為魚油膠囊包裝上的魚類來源。根據已公佈的這些類型魚油的脂肪酸組成數據，C16:0 和 C20:5n3 (EPA) 應該是最豐富的 FAMEs，其次是 C16:1、C18:1 和 C22:6n3 (DHA)⁶。魚油膠囊萃取物的色譜圖如圖 1所示，符合預期的模式。檢測到的 C14:0 峰值來自油中的沙丁魚部分。這種脂肪酸在鯷魚油中的豐度要低得多。

圖 1. 魚油膠囊

GC 條件

• 色譜柱： Omegawax^®, 30 m x 0.25 mm I.D.、0.25 µm (Product No. 24136) SLB^®- IL60, 30 m x 0.25 mm I.D.、0.20 µm（產品編號 29505-U）；
• Oven： 170 °C，1 °C/min 至 225 °C；
• Inj.：250 °C；
• 偵測器： FID，260 °C；載氣：氦氣，1.2 mL/min;
• Injection: 1 µL, 100:1 split;
• Liner: 4 mm I.D.、分流/無分流型，羊毛包裝單錐 FocusLiner™ 設計

圖 2 顯示了養殖大西洋鮭的色譜圖。已公佈的鮭魚油脂酸組成顯示，C22:6n3 (DHA)、C18:1 和 C20:5n3 (EPA) 的含量最高，其次是 C16:0、C16:1、C18:0、C20:1 和 C22:1[6]。此樣品的剖面圖與此模式不符，儘管檢測到所有列出的脂肪酸。具體來說，相對於 C22:6n3 (DHA) 和 C20:5n3 (EPA)，觀察到 C14:0、C18:1 和 C18:2 的含量較高，這可能是魚類所餵食的特定飲料造成的結果。由於兩種色譜柱具有相似的選擇性，因此洗脫順序具有可比性，但並不完全相同。使用 SLB-IL60 時：

• 觀察到 C22:6n3 (DHA) 在 C22:5n3 之前洗出
• 部分 C20：4n3和C20:5n3（EPA）的部分共洗脱

這突顯了兩種色譜柱在分析物-固定相機制方面的差異。最後，SLB-IL60 的整體洗脫速度較快（31 分鐘對比 52 分鐘）。

圖 2. 農場養殖大西洋鮭魚

GC條件

峰值ID和條件與圖1

結論

這裡提供的數據說明了在兩種不同來源的魚油中可能發現的不同omega 3脂肪酸。每種來源只處理了單一樣本，因此這項工作不應被視為這些來源類型之間的定性比較。使用兩種選擇性稍有不同的氣相色譜柱，產生具有微妙洗出順序變化的色譜圖，為希望進行確認性分析的分析師指出這些相位。

材料

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參考資料

1. Kris-Etherton PM, Harris WS, Appel LJ. 2002. Fish Consumption, Fish Oil, Omega-3 Fatty Acids, and Cardiovascular Disease. Circulation. 106(21):2747-2757. https://doi.org/10.1161/01.cir.0000038493.65177.94

2. 1995. AOAC Official Method 991.39. [Internet]. Fatty Acids in Encapsulated Fish Oils and Fish Oil Methyl and Ethyl Esters: AOAC International. Available from: https://wenku.baidu.com/view/eec98d47915f804d2b16c17e?from=search

3. Clapper GM. 2009. AOCS Official Method Ce 1k-09 Direct Methylation of Lipids in Foods for the Determination of Total Fat, Saturated, cis-Monounsaturated, cis-Polyunsaturated and trans Fatty Acids by Gas Chromatography” . [Internet]. Available from: https://www.aafco.org/Portals/0/SiteContent/Regulatory/Committees/Lab-Methods-and-Services/Methods/fat_analysis_aocs.pdf

4. AOCS Official Method Ce 1i-07. [Internet]. Determination of Saturated, cis-Monounsaturated, and cis-Polyunsaturated Fatty Acids in Marine and Other Oils Containing Long Chain Polyunsaturated Fatty Acids (PUFAs) by Capillary GLC: AOCS Official Methods and Recommended Practices..

5. Stenerson K, Halpenny M, Sidisky L, Buchanan M. 2013. Ionic Liquid GC Column Option for the Analysis of Omega 3 and Omega 6 Fatty Acids. [Internet]. Supelco Reporter 31.1 (February 2013), p. 10..

6. Firestone (ed.), D. 2006. Physical and Chemical Characteristics of Oils, Fats, and Waxes AOCS Press,. Washington, D.C.: US FDA.