酵母生長方法

酵母被認為是真核生物研究的模型系統，因為它們具有快速生長和細胞分散的特性。此外，由於酵母具有明確的遺傳系統，因此複製酵母細胞和分離突變體相對容易。

酵母通常在 YPD 培養基中生長。YPD中的 "Y 「指的是酵母抽提物，含有酵母被迫自我消化時產生的水溶性化合物。」P 「指的是蛋白胨，是用蛋白酶消化動物蛋白後製備的肽和氨基酸的混合物。」D "指的是葡萄糖，酵母的碳源。YPD 含有必要的營養素以滿足細胞新陳代謝的需求。然而，某些培養基需要特定的成分，為了滿足應用需求，各種合成培養基被開發出來。合成培養基的個別成分可以根據實驗的需要進行修改。

部分概述

• 酵母在不同培養基的生長規範
• 酵母菌培養
  • 合成脫落培養基添加劑<
  • 酵母培養基的其他補充劑

酵母在不同培養基的生長方案

以下列出的方案可用於在液體和固體培養基中生長和維護酵母：

酵母在YPD肉湯中生長

1. 將50 g YPD肉湯（產品編號：No.Y1375h）於 1 公升蒸餾水中
2. 於 121 °C 下高壓滅菌 15 分鐘
3. 接種酵母培養物（來自酵母肉湯/平板）於盛有製備好的液體培養基的無洗劑試管/瓶中。培養基不應超 過培養管容積的三分之一或培養瓶總容積的五分之一
4. 短暫渦旋內容物以分散細胞

Yeast Growth on YPD Agar

1. 將 65 g YPD Agar（產品編號.Y1500）於 1 公升蒸餾水中
2. 加熱至沸騰，同時攪拌使所有成分完全溶解
3. 於 121 °C 下高壓滅菌 15 分鐘
4. 在瓊脂平板上接觸（從 YPD 平板上獲得的酵母）/散播（從肉湯培養物中獲得的酵母）細胞，並在 30 °C 下培養

注意：約 24 小時後可觀察到單個酵母菌落，但需要培養 48 小時以上才能用於複製平板。使用合成滴出培養基添加劑的酵母培養物的生長速度要慢約 50%。

酵母菌株的保存和復活

使用上述方法培養的酵母細胞可以在-70 °C的甘油中冷藏保存3年以上，或在4 °C的富含培養基斜面中保存6個月到1年。含有酵母細胞的 YPD 平板也可以在 4 °C 下用 Parafilm® 密封保存 2-3 個月。酵母細胞的保存和復活方案如下：

酵母細胞的保存

1. 準備無菌的 30% (w/v) 甘油溶液（產品編號.G5516）
2. 在 4 mL 無菌旋蓋瓶中加入 1.0 mL 甘油溶液
3. 取 1.0 mL 早期靜止/晚對數期酵母肉湯從新培養的平板上刮取大量接種物
4. 重新懸浮於 1 mL 無菌 30% 甘油溶液中
5. 混勻，冷凍於乾冰上，並儲存於 -70 °C

注意：酵母細胞也可以類似方法儲存，使用8% (v/v) 二甲基亞硫酸鹽 (DMSO, Product No.D8418）。

酵母菌株復活

1. 用無菌牙簽或細菌針刮取冷凍的漿液
2. 將酵母細胞接觸到適當的平板上，並在 30 °C 下培養

注意：避免解凍試劑。

YEAST CULTURES

酵母通常在 YPD 或合成培養基於 30 °C下培養。我們提供粉末和液體兩種形式的生長培養基和補充劑，以滿足您的特定應用需求。

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酵母菌的其他營養補充品

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參考資料

1. Sherman F. 2002. Getting started with yeast.3-41. https://doi.org/10.1016/s0076-6879(02)50954-x

2. MacDonald PN. 2001. Two-Hybrid Systems. https://doi.org/10.1385/1592592104

3. Treco DA, Winston F. 2008. Growth and Manipulation of Yeast. Current Protocols in Molecular Biology. 82(1): https://doi.org/10.1002/0471142727.mb1302s82

4. Schiestl RH, Gietz RD. 1989. High efficiency transformation of intact yeast cells using single stranded nucleic acids as a carrier. Curr Genet. 16(5-6):339-346. https://doi.org/10.1007/bf00340712

5. Li B, Fields S. 1993. Identification of mutations in p53 that affect its binding to SV40 large T antigen by using the yeast two?hybrid system. FASEB j.. 7(10):957-963. https://doi.org/10.1096/fasebj.7.10.8344494