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免疫學多重分析：更快建立更多免疫生物標誌。

免疫學多重檢驗可以快速、靈敏地同時調查數十種分析物質的調變和表達。

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    • 在本影片中，您將學習 MILLIPLEX® cytokine multiplex kits 如何在馬薩諸塞州劍橋的 Forsyth Institute Multiplex Core 使用。

    Immunology Multiplex Assays

    量化細胞因子和其他蛋白質對於了解病理狀態（如發炎、敗血症）和疾病（如自體免疫疾病、心血管疾病、代謝綜合症、神經失調和癌症）非常重要。我們提供廣泛且領先業界的免疫學多重檢測試劑組，包括測量細胞活素、化學因子、生長因子、可溶性細胞活素受體、檢查點蛋白、補體蛋白、自體免疫自身抗體、組織金屬蛋白酶抑制劑 (TIMPs)、基質金屬蛋白酶 (MMPs)、敗血症相關蛋白、皮膚生物標誌物和免疫球蛋白的試劑盒。受歡迎的分析物在表1中描述。

    Popular Analytes*
    Cytokines/
    Chemokines    		Autoantibodies 補充
    因子    		TIMPs and
    MMPs    		SepsisVirology
    IL-6
    TNFα
    IL-1β
    IFNɣ
    IL-8
    IL-10
    IL-4
    MCP-1    		Anti-SSA/Ro52
    Anti-SSA/Ro60
    Anti-SSB/La
    Anti-C1q
    Anti-RNP/Smith Anti-PCNA
    Anti-IFNβ
    Anti-IFNɣ    		C3
    C1q
    C3b
    C2
    C5a
    C5
    C4b    		TIMP-1
    TIMP-2
    TIMP-3
    TIMP-4
    MMP-9
    MMP-7
    MMP-2
    MMP-1    		MIF
    sFasL
    sFas/TNFRSF6
    PAI-1（總計）
    sICAM sVCAM
    NGAL
    ELA2    		SARS-CoV-2 N
    SARS-CoV-2 RBD
    SARS-CoV-2 S1
    SARS-CoV-2 S2
    *僅選擇列出的分析物
    表 1.在MILLIPLEX®多重免疫檢測中選擇受歡迎的免疫生物標誌物分析物。請參閱最新Analyte Quarterly中的完整分析物清單和MILLIPLEX®多重測試試劑盒。

    基於 Luminex® xMAP® 技術，我們的 MILLIPLEX® 多重免疫檢測可對疾病和潛在過程進行精確的多參數分析。

    多重免疫生物標記的應用

    多重免疫生物標記有許多應用。這包括

    下面描述了如何在免疫學研究中使用多重免疫分析的例子。

    細胞因子、化學因子和生長因子

    細胞因子作用於免疫反應的辨識、活化或效應階段，可調節 T 細胞、B 細胞和骨髓細胞的發育和功能活動。使用免疫學多重分析來量化細胞激素、化學因子和生長因子，有助於瞭解與免疫系統相關的各種病理狀態，從而推進研究。多重分析可讓研究人員同時研究分析物質，節省時間、樣本和資源。這對於免疫學研究尤其重要，因為在免疫學研究中，許多免疫生物標誌物會在不同的通路中發揮作用。

    進一步了解我們最新的 MILLIPLEX® Human ；and Non-Human Primate Cytokine/Chemokine/Growth Factor multiplex panels。

    干擾素是廣泛表達的細胞因子，具有強效的抗病毒和抗增殖作用。這些細胞因子是對抗病毒感染的第一道防線，並在惡性細胞的免疫監視中扮演重要角色。圖1顯示了MILLIPLEX®人類干擾素多重檢測板可協助分析的部分干擾素的平行性。

    用 MILLIPLEX® 人類干擾素多重分析板 (Cat. No. HIFN-130K) 稀釋干擾素 IFNα2、IFNλ2、IFNλ3 和 IFNγ 的平行性（線性）圖表

    圖 1.使用 MILLIPLEX® 人類干擾素分析板進行稀釋的平行性/線性分析。IFNα2、IFNλ2 和 IFNλ3 分析使用未加標的樣品進行，IFNγ 分析使用加標的樣品進行。樣本依規程指示稀釋 1:2，再依圖中指示進一步稀釋。

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    補體系統

    補體系統由三個途徑組成。

    • 經典通路受到抗原-抗體複合物的刺激
    • 替代通路在接觸致病細胞表面時自發啟動
    • 甘露糖結合凝集素 (MBL) 通路可辨識通常只存在於致病細胞表面的甘露糖。

    評估樣本中多種補體蛋白的水平以確定補體概況的能力，可更準確地描述炎症信號傳導和先天性免疫反應的變化。 MILLIPLEX®人體補體檢測板可用於確定血清和血漿樣本中 16 種主要補體蛋白的水平。圖2展示了補體級聯，其中突出顯示的補體成分表明可以用哪一種MILLIPLEX®試劑盒進行測定。 圖3展示了使用這些補體板的示例數據。

    补体级联途径示意图。有 3 個不同的起點：經典通路 (免疫複合物)、甘露糖結合凝集素通路 (病原體表面的甘露糖)，以及替代通路 (活化表面)。經典通路顯示補體成分 C1q、C1r、C1s、C4 及 C2。甘露糖結合凝集素途徑顯示 MBL、MASP-1、MASP-2、C4 和 C2。替代通路顯示 C3、因子 B 和因子 D。C4b 介於經典通路和 C3 轉換酶之間，而 Properdin 和因子 H、因子 I 則介於替代通路和 C3 轉換酶之間。之後，C3 會轉換成發炎的 C3a，或是 C3b 轉換成 C5 轉換酶。C5 可以進入 C5a 進行發炎或進入 C5b、C6、C7、C8 和 C9。最後，該通路以膜攻擊複合物 (Membrane Attack Complex, MAC, C5b-9) 結束。產品編號 HCMPEX1-19K 中的高亮成分為 C2、MBL、C2、因子 D、C4b、Properdin、因子 I、C5、C5a 和 C9。產品編號 HCMP2MAG-19K 中的突出顯示成分為 C1q、C4、C3、因子 B、因子 H、C3 及 C3b。產品編號 HC5B9-140K 中的突出顯示成分為 C5b-9。

    圖 2.在 MILLIPLEX® 人體補體分析板中發現的補體級聯，其補體成分以高亮顯示。藍色的補體成分見於 Product No.HCMP2MAG-19K，而綠色的元件則在產品編號 HC5B9-140K 中找到。

    使用 MILLIPLEX® 多重人類補體檢測板將健康血漿樣品與 COVID-19 復原血漿樣品進行比較時，顯示補體水平顯著差異的箱渦圖。4 張不同補體成分的圖表，Y 軸為樣本類型，X 軸為濃度 (µg/mL)。C1q、C5 和 C9 的顯著性為 p&lt0.05，而 C3 的顯著性為 p&lt0.005。

    圖 3.比較健康血漿樣本與 COVID-19 復原血漿樣本，補體水平有顯著差異。*p<0.05, **p<0.005。

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    MMPs和TIMPs

    基質金屬蛋白酶（MMPs）是一種負責細胞外基質（ECM）分解的鋅蛋白酶家族，在胚胎發育和組織形態形成、組織和骨骼重塑、傷口癒合和血管生成等正常生理過程中扮演關鍵角色。這些過程有賴於 MMPs 在細胞表面受體的裂解、凋亡配體的釋放、細胞增殖和分化以及趨化因子活性調節等方面所扮演的角色。MMPs 的結構相似，都是以非活性原酶的形式合成和分泌，需要蛋白水解裂解才能活化。這個過程可由絲氨酸蛋白酶或其他 MMP 介導。MMP 表達的增加是對各種刺激的反應，包括黏著分子、生長因子、細胞活素和荷爾蒙。MMP 活性的調節主要由金屬蛋白酶組織抑制劑 (TIMPs) 控制。因此，破壞 MMP/TIMP 的平衡可導致關節炎、心血管疾病、腫瘤生長和轉移。

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    免疫反應和敗血症生物標誌物分析

    雖然免疫反應對於維持身體平衡至關重要，但對於細菌、病毒、真菌或寄生蟲感染的過度反應可能會導致稱為敗血症的失控發炎反應。這種對感染的過度反應會透過不受抑制的發炎反應（包括敗血症生物標誌物的上調），以及淋巴器官凋亡的增加（導致免疫抑制）來中斷機體的平衡。嚴重敗血症或全身性發炎反應症候群 (SIRS) 可導致敗血性休克、多器官功能障礙症候群 (MODS) 以及死亡。MILLIPLEX® 人體敗血症檢驗板可協助您了解敗血症所涉及的發炎生物標誌物的作用。

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    Isotyping Human and Mouse Immunoglobulins

    免疫球蛋白 (Igs) 由漿細胞和淋巴細胞製造，在免疫反應中扮演重要角色，可附著於抗原並在毀滅抗原的過程中發揮作用。Igs 可依類型分類，由於結構上的差異，Igs 在功能和抗原反應上有所不同。五種主要的同類型為 IgM、IgG、IgA、IgE 和 IgD - 所有這些都存在於健康的人體中。某些自身免疫性疾病、腸胃疾病和惡性腫瘤的特徵是特定異型缺乏或一種或多種異型的濃度不同。

    研究人員可以使用 MILLIPLEX® Isotyping Kits 同型檢測試劑盒同時定量檢測 Ig 類別和亞類。xMAP®多重技術是測量這些同類型水平的理想選擇，不僅減少了檢測次數和所需樣品的數量，還大大降低了進行多次檢測可能產生的誤差。

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    纖維化

    纖維化及相關疾病造成全球日益沉重的發病和死亡負擔。MILLIPLEX®纖維化面板1使研究人員能夠推進對纖維化疾病（包括但不限於特發性肺纖維化、肝纖維化和肺纖維化）相關複雜過程的理解。圖4 顯示了來自此面板的一些分析物質數據範例。

    圖表顯示 MILLIPLEX® Fibrosis Panel 1 中各分析物的血清/血漿濃度，分別來自健康人 (n=20)、系統性紅斑狼瘡 (SLE；n=7）、硬皮病（n=10）、Sjögren's 綜合症（n=4）、類風濕關節炎（n=4）、囊性纖維化（n=5）、肺纖維化（n=5）和非酒精性脂肪性肝炎（NASH；n=6）。

    圖 4.在 Cat.No.HFIB1-100K 來自健康人 (n=20)、系統性紅斑狼瘡 (SLE；n=7)、硬皮病 (n=10)、Sjögren's 綜合症 (n=4)、類風濕關節炎 (n=4)、囊性纖維化 (n=5)、肺纖維化 (n=5) 及非酒精性脂肪性肝炎 (NASH；n=6)。

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    僅供研究使用。不可用於診斷程序。

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