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OGS538

Sigma-Aldrich

PSF-TPI1-URA3-强启动子酵母质粒

plasmid vector for molecular cloning

同義詞:

snapfast 载体

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352200
NACRES:
NA.85
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形狀

buffered aqueous solution

分子量

size 7023 bp

菌種選擇

kanamycin

複製起點

2Micron
pUC (500 copies)

肽切割

no cleavage

啟動子

Promoter name: TEF1
Promoter activity: constitutive
Promoter type: yeast

報告基因

none

運輸包裝

ambient

儲存溫度

−20°C

酵母選擇

uracil

一般說明

一种用于目的蛋白表达的强启动子(TPI1)酿酒酵母表达质粒。该载体可利用URA3代谢物盒进行筛选,它能够使得当缺乏该基因的细胞在不含尿嘧啶的培养基上生长时可以得到筛选。

启动子表达水平:该质粒包含强酵母组成型磷酸三糖异构酶(TPI1)基因启动子。它表现出了与翻译延伸因子1启动子相似的表达水平。

應用

基因中的克隆:该质粒组合经过设计,可兼容各种克隆技术。多克隆位点包含一系列标准的常用限制性克隆位点。通过这些位点,可以使用DNA连接酶的标准克隆方法插入基因。也可以使用其他方法,如非连接酶依赖性克隆(LIC)Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt,因为我们的所有质粒都基于相同的骨架,所以可以使用相同的方法克隆到我们所有的目录载体中。

多克隆位点说明:MCS中有一些重要位点,包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有起始密码子,其紧邻Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子位于该位置时,它们可帮助获得基因的最佳定位。如果不需要这样做,并且您希望使用下游位点进行基因克隆,则可以利用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。

XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒时,它们从XbaI位点的终止密码子处产生TA突出端,其与用相同位点切割的所有肽标签质粒相容。BseRI和BsgI位点是非回文结构的并且可切割远离其结合位点的限定数量的碱基。

每次将基因克隆到多克隆位点时,我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和终止密码子与NcoI和XbaI不相容,则将序列延伸到最近的外部位点,但应保持起始和终止密码子的位置一致。

序列

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12 - Non Combustible Liquids

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