Przejdź do zawartości
Merck

Biuletyny techniczne

Bacterial Glycerol Stock (SHCLNG)

Kultury bakteryjne mogą być amplifikowane z zapasów glicerolu do użycia w oczyszczaniu plazmidowego DNA shRNA. Następnie docelowe linie komórkowe mogą być transfekowane oczyszczonym plazmidem w celu przejściowego lub stabilnego wyciszenia genów (selekcja puromycyną). Ponadto, samodezaktywujące się, niekompetentne replikacyjnie cząsteczki wirusowe mogą być wytwarzane w komórkach pakujących (HEK293T) poprzez współtransfekcję z kompatybilnymi plazmidami pakującymi.Poszczególne klony shRNA są dostarczane w postaci zamrożonego bakteryjnego bulionu glicerolowego (E. coli) zawierającego Terrific Broth (TB), karbenicylinę w stężeniu 100 µg/ml i 10% glicerol.

Pobierz Biuletyn Techniczny SHCLNG (583 kb PDF)

Format oczyszczonego plazmidowego DNA (SHCLND)

Oferujemy najwyższej jakości oczyszczone plazmidowe DNA do dalszej transfekcji i pakowania lentiwirusowego. DNA oczyszczone za pomocą naszego 96-dołkowego systemu oczyszczania DNA, opracowanego specjalnie dla biblioteki TRC, daje najwyższej jakości cząsteczki lentiwirusowe.

Oczyszczony plazmid może być bezpośrednio stosowany w przejściowym lub stabilnym wyciszaniu genów (selekcja puromycyną). Ponadto, samodezaktywujące się, niekompetentne replikacyjnie cząstki wirusowe mogą być wytwarzane w komórkach pakujących (HEK293T) poprzez współtransfekcję z kompatybilnymi plazmidami pakującymi.

Poszczególne konstrukty są dostarczane jako zamrożone zapasy zawierające 1 µg plazmidowego DNA w buforze Tris-EDTA (TE) w stężeniu 20 ng/µL. Zobacz zestaw rodziny genów biuletyny techniczne dla specyfikacji, zapytaj o specyfikacje biblioteki.

Pobierz Biuletyn Techniczny SHCLND (561 kb PDF)

Format lentiwirusowy (SHCLNV)

Samodzielnie dezaktywujące się, niekompetentne replikacyjnie cząstki wirusowe są wytwarzane w komórkach pakujących (HEK293T) poprzez współtransfekcję z kompatybilnymi plazmidami pakującymi. Ponadto, lentiwirusowe cząstki transdukcyjne są pseudotypowane glikoproteiną otoczki G wirusa pęcherzykowego zapalenia jamy ustnej (VSV-G), umożliwiając transdukcję szerokiej gamy komórek ssaków. Cząsteczki transdukcji lentiwirusowej są oznaczane za pomocą testu ELISA antygenu p24, a pg/mL p24 są następnie konwertowane na jednostki transdukcji na ml przy użyciu współczynnik konwersji.

Poszczególne konstrukty są dostarczane jako 200 µL zamrożonego bulionu zawierającego minimum 1.0 x 106 TU/mL (w teście p24) w pożywce Dulbecco's Modified Eagle's Medium z 10% inaktywowaną termicznie płodową surowicą bydlęcą i penicyliną-streptomycyną. Nasze średnie miana dla poszczególnych zamówień klonów rutynowo przekraczają 1,0 x 107 TU/mL (w teście p24). Zobacz biuletyny techniczne zestawów rodzin genów dla specyfikacji, zapytaj o specyfikacje biblioteki.

MISSION® Control Vectors

Oczyszczone plazmidowe wektory kontrolne mogą być bezpośrednio stosowane w przejściowym lub stabilnym wyciszaniu genów (selekcja puromycyną). Ponadto, samodezaktywujące się, niekompetentne replikacyjnie cząsteczki wirusowe mogą być wytwarzane w komórkach pakujących (HEK293T) poprzez współtransfekcję z kompatybilnymi plazmidami pakującymi.

Indywidualne wektory kontrolne są dostarczane jako 10 µg plazmidowego DNA w buforze Tris-EDTA (TE) w stężeniu 500 ng/µL.

Pobierz MISSION® Control Vectors Technical Bulletin (226 Kb PDF)

MISSION® Control Transduction Particles

Oferujemy różnorodne kontrole pozytywne, negatywne i transdukcyjne w formacie lentiwirusowym. Ponadto nasze najpopularniejsze kontrole są oferowane w formacie o wysokim mianie.

Cząsteczki transdukcyjne kontroli o standardowym mianie są dostarczane jako 200 µL 106 TU/mL (poprzez test miareczkowania p24). Cząsteczki transdukcji kontrolnej o wysokim mianie są dostarczane jako 10 x 20 µL podwielokrotności 109 TU/mL (w teście miareczkowania p24).

MISSION® Lentiviral Packaging Mix (SHP001)

.MISSION® Lentiviral Packaging Mix to zoptymalizowana formuła dwóch plazmidów wyrażających kluczowe geny pakujące HIV i heterologiczny gen otoczki wirusowej. Jest przeznaczony do współtransfekcji wraz z kompatybilnym lentiwirusowym wektorem transferowym w celu stworzenia pseudotypowych cząstek lentiwirusowych o wysokim mianie, wykorzystywanych do dalszych zastosowań transdukcyjnych.

MISSION® Lentiviral Packaging Mix jest dostępny w dwóch wielkościach opakowań: SHP001-0,25 ml i SHP001-1,7 ml.

MISSION® 3'UTR Lenti GoClone™

Regiony nieulegające translacji 3' (3'UTR) transkryptów mRNA kontrolują wiele aspektów potranskrypcyjnej regulacji genów. 3'UTR są zaangażowane w regulację stabilności transkryptu, wydajności translacji i lokalizacji w komórce. 3'UTR są również dominującymi sekwencjami docelowymi dla endogennych mikroRNA (miRNA) lub małych interferujących RNA (siRNA).

Współpracowaliśmy z firmą SwitchGear Genomics, aby zaoferować kolekcję MISSION® 3'UTR Lenti 
GoClone™ która jest obejmującą cały genom kolekcją sklonowanych ludzkich 3'UTR. Każdy wektor wirusowy wyraża zoptymalizowany gen reporterowy lucyferazy (RenSP) połączony z sekwencją 3'UTR.

Pobierz biuletyn techniczny MISSION® 3'UTR Lenti GoClone™ (154 Kb PDF)

 

Zaloguj się, aby kontynuować

Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

Nie masz konta użytkownika?