Pierwotne ludzkie miocyty serca i pożywki do wzrostu miocytów

Produkty te są dostępne w Stanach Zjednoczonych, Kanadzie i wybranych krajach europejskich.

• System hodowli miocytów serca
• Kontrola jakości ludzkich miocytów serca i pożywek hodowlanych
• Kontrola jakości ludzkich miocytów sercowych i podłoża hodowlanego
• Primary Cardiac Myocyte Culture Materials

Cardiac Myocyte Cell Culture System

Mięsień sercowy człowieka składa się z pojedynczych miocytów. Miocyty serca są wysokoenergetycznymi komórkami odpowiedzialnymi za przenoszenie najbardziej fizycznie energetycznych komórek w organizmie, ponieważ wykonują one skurcz miogeniczny całego mięśnia sercowego.

PromoCell^® ludzkie miocyty sercowe są generowane z normalnej ludzkiej tkanki komorowej dorosłego serca. W przeciwieństwie do świeżo wyizolowanych miocytów w kształcie pręcików, ludzkie miocyty serca są wytwarzane przy użyciu protokołu, który umożliwia ich długoterminowe eksperymenty. Wszystkie ludzkie miocyty serca są kriokonserwowane przy przejściu 2 (P2) wkrótce po izolacji, przy użyciu opatentowanej, wolnej od surowicy pożywki do zamrażania, Cryo-SFM. Każda rozmrożona fiolka zawiera co najmniej 500 000 żywych komórek.  Ludzkie miocyty serca są również dostępne jako proliferujące kultury komórkowe wykonane z kriokonserwowanych komórek, które zostały rozmrożone i hodowane przez trzy dni w naszych laboratoriach.

• Protokół hodowli ludzkich miocytów serca

Podłoże do hodowli miocytów jest zoptymalizowane do hodowli pierwotnych ludzkich miocytów serca in vitro, ale może być również stosowane do pierwotnych miocytów świń i szczurów. Pożywka do wzrostu miocytów jest dostępna w dwóch formatach: Medium (gotowe do użycia) i Medium Kit.  Opcja Medium (gotowe do użycia) obejmuje 500 ml butelkę Basal Medium i jedną fiolkę SupplementMix. Zestaw Medium Kit zawiera 500 ml butelkę Basal Medium i SupplementPack, który jest zestawem pojedynczych fiolek ze wstępnie odmierzonymi suplementami, co daje użytkownikowi pełną kontrolę nad ostatecznym składem pożywki. Dodanie SupplementMix lub SupplementPack do pożywki podstawowej stanowi kompletną pożywkę do wzrostu miocytów. Basal Medium (z czerwienią fenolową lub bez), SupplementMix i SupplementPack można również zakupić oddzielnie.

Szczegóły suplementacji Myocyte Growth Medium

Myocyte Growth Medium zawiera wszystkie składniki niezbędne do optymalnego wzrostu ludzkich miocytów sercowych (szczegóły w tabeli poniżej). Pożywka Myocyte Growth Medium nie zawiera antybiotyków ani środków przeciwgrzybiczych i jest przeznaczona do stosowania w inkubatorze z 5% atmosferycznym CO₂.

Końcowe stężenia suplementów pożywki Cardiac Myocyte Growth Medium
(po dodaniu)

Składnik	Stężenie końcowe
Płodowa surowica cielęca	0.05 mL / mL
Epidermalny czynnik wzrostu (rekombinowany ludzki)	0.5 ng / ml
Podstawowy czynnik wzrostu fibroblastów (rekombinowany ludzki)	2 ng / ml
Insulina (rekombinowana ludzka)	5 μg / mL

Przygotowanie pożywki uzupełniającej do hodowli miocytów serca

• Odmroź pożywkę uzupełniającą Myocyte Growth Medium SupplementMix lub SupplementPack w temperaturze 15 - 25 °C.
• Septycznie wymieszaj roztwory suplementów przez delikatne pipetowanie w górę i w dół.
• Przenieś całą zawartość każdego suplementu do pożywki podstawowej dla miocytów.
• Zamknąć butelkę i delikatnie zawirować w celu uzyskania jednorodnej mieszaniny.

Przechowywanie i stabilność produktów do hodowli miocytów

• Po dostarczeniu natychmiast przechowywać Myocyte Basal Medium w ciemności w temperaturze 4 - 8 °C; nie zamrażać. Przechowuj Myocyte Growth Medium SupplementMix lub SupplementPack w temperaturze -20°C.
• Jeśli produkty są przechowywane zgodnie z zaleceniami, zachowują stabilność do daty ważności podanej na etykiecie.
• Po dodaniu suplementów do Myocyte Basal Medium, okres przechowywania kompletnej pożywki wynosi sześć tygodni w temperaturze 4-8°C. Nie zamrażać kompletnej pożywki.
• W celu użycia, pobrać i podgrzać tylko wymaganą ilość kompletnej pożywki do wzrostu miocytów i przechowywać pozostałą pożywkę w lodówce w temperaturze 4 - 8 °C.
• Po otrzymaniu przechowuj kriokonserwowane komórki w ciekłym azocie lub posiać bezpośrednio.
• Proliferujące komórki muszą być przetworzone natychmiast.

Kontrola jakości ludzkich miocytów sercowych i pożywek do wzrostu miocytów

/h2>

Kontrola jakości ludzkich miocytów sercowych

Następujące sztywne testy kontroli jakości są przeprowadzane dla każdej partii ludzkich miocytów sercowych:

• Badanie morfologii komórek, wskaźnika przylegania i żywotności komórek
• Analiza cytometrii przepływowej pod kątem markerów specyficznych dla typu komórek, takich jak alfa-aktynina sarkomeryczna i miozyna mięśni wolnych
• Badanie wydajności wzrostu w wielu pasażach.Testowanie wydajności wzrostu poprzez wielokrotne przejścia do 15 podwojeń populacji (PD) w warunkach hodowli bez antybiotyków i środków przeciwgrzybiczych
• Testowanie na nieobecność HIV-1, HIV-2, HBV, HCV, HTLV-1, HTLV-2 i zanieczyszczeń mikrobiologicznych (grzyby, bakterie i mykoplazma)
• Szczegółowy certyfikat analizy (CoA) dla każdej partii jest dostępny do pobrania.

Specyfikacje ludzkich miocytów serca

Product	Plating Density	Passage after Thawing	Marker	Podwojenie populacji
Miocyty ludzkiego serca (HCM)	10 000 - 15 000 komórek na cm²	P2	Sarkomeryczna alfa-aktynina+ Wolna miozyna mięśniowa+	> 15

Kontrola jakości podłoża do wzrostu miocytów

Wszystkie partie podłoża do wzrostu miocytów są poddawane kompleksowym testom kontroli jakości. Testy te sprawdzają aktywność stymulującą wzrost, szybkość przylegania i oczekiwaną morfologię komórek przy użyciu hodowanych pierwotnych ludzkich miocytów serca. Zatwierdzone wewnętrzne partie pożywek są wykorzystywane jako odniesienie. Dodatkowo, testy mikrobiologiczne zapewniają, że wszystkie partie pożywki Myocyte Growth Media są wolne od zanieczyszczeń mikrobiologicznych (grzyby, bakterie, mykoplazma).

Przeznaczenie produktów Human Cardiac Myocyte Culture System

Miocyty ludzkiego serca i pożywki do wzrostu miocytów są przeznaczone wyłącznie do użytku in vitro , a nie do procedur diagnostycznych lub terapeutycznych. W celu uzyskania informacji na temat środków ostrożności należy zapoznać się z odpowiednią kartą charakterystyki produktu.

Uwaga:Podłoża PromotoCell^® mają niską lub zerową zawartość surowicy i nie nadają się do neutralizacji trypsyny (na przykład podczas subkulturowania komórek).Zamiast tego zalecamy użycie naszego zestawu DetachKit (C-41200, C-41210, C-41220), który zawiera HEPES BSS, Trypsin/EDTA i Trypsin Neutralizing Solution.