Przewodnik wyboru antybiotyków do hodowli komórkowych

• Po co stosować antybiotyki w hodowli komórkowej?
• Krzywa zabijania antybiotyków
• Antybiotyki dla hodowli komórek ssaków
• Antybiotyki do hodowli komórek roślinnych
• Antybiotyki do hodowli komórek

Antybiotyki są powszechnie stosowane w hodowli komórkowej w celu zapobiegania zanieczyszczeniom, utrzymania aseptycznych warunków lub selekcji komórek zawierających modyfikacje genetyczne. Stosowanie antybiotyków może zminimalizować utratę linii komórkowych i kultur komórkowych, oszczędzając czas i cenne zasoby. Właściwy dobór antybiotyków zależy zarówno od rodzaju komórek, jak i zanieczyszczeń, którym próbujemy zapobiec. Selektywne antybiotyki do generowania stabilnych linii komórkowych lub innych kultur rekombinowanych powinny być wybierane w oparciu o gen oporności na antybiotyki lub selektywny marker. Poniższe tabele mogą być wykorzystane do wyboru antybiotyków dla potrzeb hodowli komórkowej.

Antybiotyki dla hodowli komórek ssaków

† = Skuteczny przeciwko większości gatunków
‡ = Skuteczny przeciwko niektórym gatunkom

Nazwa produktu	Nr produktu	Gram.	Gram (+)bakterii	Gram (-)bakterii	Drożdże	Pleśnie	Mycoplasma	Sugerowane stężenie robocze.
Amfoterycyna B	A2411			†	†		2.5 mg/L
Solubilizowana amfoterycyna B (ok. 45%)	A9528			†	†		5.6 mg/L (ciała stałego)
Amfoterycyna B(roztwór 250 μg/ml)	A2942			†	†		10 ml/L
Ampicylina	A0166	†	†				100 mg/L
Roztwór antybiotyku przeciwgrzybiczego (100x) (10 000 jednostek penicyliny, 10 mg streptomycyny i 25 µg amfoterycyny B na ml)	A5955	†	†	†	†		10 ml/L
Cephalothin	C4520	†	†				100 mg/L
Dihydrostreptomycyna	D5155	†	†					100 mg/L
Erytromycyna	E5389	†	†				100 mg/L
Siarczan gentamycyny	G1264	†	†			†	50 mg/L
Siarczan gentamycyny (roztwór 10 mg/ml)	G1272	†	†			†	5 ml/L
Siarczan gentamycyny (roztwór 50 mg/ml)	G1397	†	†			†	1 ml/L
Roztwór L-glutaminy-penicyliny-streptomycyny (200 mM L-glutaminy, 10 000 jednostek penicyliny i 10 mg streptomycyny na ml)	G1146  G6784	†	†	.			10 ml/L
Siarczan kanamycyny (roztwór 10 mg/ml)	K0129	†	†			†	10 ml/L
Siarczan kanamycyny (roztwór 50 mg/ml)	K0254	†	†			†	2 ml/L
Lincomycin HCI	L2774	†						100 mg/L
Siarczan neomycyny	.N6386	†	†				50 mg/L
Siarczan neomycyny (roztwór 10 mg/ml)	N1142	†	†					5 ml/L
Nystatyna (5000 jednostek nystatyny na mg)	N6261			†	†		2.5 X 105U/L (50 mg/L)
Nystatyna	N4014			†	†		50 mg/L
Zawiesina nystatyny	N1638			†	†		24 ml/L
Siarczan paromomycyny	P5057	†	†				100mg mg/L
Penicylina-G (sól potasowa)	P7794	†					100,00 U/L
Penicylina-G (sól sodowa)	P3032	†					100,000 U/L
Roztwór penicylina-streptomycyna (5,000 jednostek penicyliny-G i 5 mg streptomycyny na ml)	P4458	†	†				20 ml/L
Roztwór penicylina-streptomycyna (10 000 jednostek penicyliny-G i 10 mg streptomycyny na ml)	P0781 . P7539  P4333	†	†				10 mg/L
Roztwór penicylina-streptomycyna-neomycyna (5000 jednostek penicyliny-G, 5 mg streptomycyny i 10 mg neomycyny na ml)	P4083	†	†				10 ml/L
Kwas fenoksymetylopenicylinowy (sól potasowa) [Penicylina V]	P4807	†		&			100,000 U/L
Siarczan polimyksyny B	P4932		†				50 mg/L
Spectinomycin dihydrochloride pentahydrate	S4014	†	†				7.5-20 mg/L
Siarczan streptomycyny	S9137	†	†				10 mg/L 100 μg/ml
Chlorowodorek tetracykliny	T7660	†	†				10 mg/L
Tylosin Tartrate(8 mg/ml soln.)	T3397	†				†	1 ml/L

Antybiotyki dla hodowli komórek roślinnych

Nazwa produktu	Nr produktu	Gram.	Gram (+)bakterii	Gram (-)bakterii	Mycobacteria	Drożdże	Pleśnie	Mycoplasma	Sugerowane stężenie robocze.
Carbenicillin	C3416	‡	†						10-500 μg/ml
Cefotaxime	C7039	‡	†					do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Chloramfenikol	C1919	†	†	‡			‡	10-35 μg/ml (TS)
G 418	G1279							do 250 μg/ml (CC)
Siarczan gentamycyny	G1264	‡	†				†	do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Hygromycyna B	H9773							do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Kanamycyna	K1377	†	†				†	16 (SSC); do 40 μg/ml (CC, PR, EC)
Paromycyna	P8692	†	‡
Penicylina G, Potas	P7794	†	‡				.	do 100 μg/ml
Penicillin G, Sodium	P8431	†	‡					do 100 μg/ml
Pentachloronitrobenzen	P8556			&			†
Rifampicyna	R7382	†	†	†				50 (TS); do 25 μg/ml (PC, TEC)
Tiabendazol	T5535					†
Vancomycin	.V1130	†				&		do 10 μg/ml (PC); do 40 μg/m (CC, EC, STM)

† = Skuteczny wobec większości gatunków
‡ = Skuteczny wobec niektórych gatunków

¹Klucz zastosowania: CC = hodowla kalusa; PR = regeneracja roślin; EC = hodowla liścieni, hipokotyli lub tarcz liściowych; TS = selekcja transformantów; SE = embriogeneza somatyczna; SSC = hodowla selekcyjna łodyg; PC = hodowla protoplastów; TEC = hodowla eksplantatów bulw;
STM = mikrorozmnażanie wierzchołków pędów

Środki selekcji antybiotyków do hodowli komórkowych

Nazwa produktu	Nr produktu	Sposób działania	Sugerowane stężenie robocze.
Aktynomycyna D	A9415	Kompleksuje się z DNA i zakłóca syntezę RNA	1 µg/ml
siarczan bleomycyny	B8416	Kompleksuje z DNA, powodując rozszczepienie nici	10-100 µg/ml
Chloramfenikol	C3175	Hamuje elongację transferazy peptydylowej	5 µg/ml
G 418	A1720	Blokuje syntezę polipeptydów i hamuje wydłużanie łańcucha	100-800 µg/ml
G 418 (roztwór 50 mg/ml)	G8168	Blokuje syntezę polipeptydów i hamuje wydłużanie łańcucha	1 µg/ml
Hygromycyna B	H3274	Blokuje syntezę polipeptydów i hamuje wydłużanie łańcucha
Mitomycyna C	M4287	Hamuje syntezę kwasów nukleinowych	10-50 µg/ml
Kwas mykofenolowy	M3536	Blokuje dehydrogenazę monofosforanu inozyny w szlaku monofosforanu guanozyny	25 µg/ml
Puromycyna HCl	P8833.	Hamuje syntezę białek	10-100 µg/ml