Testy angiogenezy
Angiogenesis Tube Formation Assays
Microfluidic Angiogenesis Assays
Endothelial Adhesion, Invasion and Migration Assays
Scratch Wound Healing Assays
Charakterystyka komórek śródbłonka
Komórki śródbłonka i podłoża hodowlane
Angiogeneza jest procesem generowania nowych kapilarnych naczyń krwionośnych i jest podstawowym składnikiem wielu normalnych (reprodukcja i gojenie się ran) i patologicznych procesów, w tym wzrostu guza i przerzutów. Nieprawidłowy wzrost naczyń krwionośnych może być przyczyną wielu śmiertelnych i wyniszczających chorób, w tym raka, chorób sercowo-naczyniowych, udaru mózgu, cukrzycy i ślepoty związanej z wiekiem.
W nowotworach rozregulowana sygnalizacja i warunki niedotlenienia prowadzą do trwałej niekontrolowanej angiogenezy, niezbędnego składnika wzrostu guza i przerzutów. Przewlekłe mechanizmy zapalne, takie jak produkcja reaktywnych form tlenu (ROS) i wydzielanie cytokin prozapalnych, mogą również sprzyjać angiogenezie w progresji nowotworu. Sygnalizacja angiogeniczna w nowotworach jest podobna do normalnej angiogenezy, w której pośredniczą rozpuszczalne czynniki wzrostu, receptory związane z błoną oraz interakcje komórka-komórka i komórka-matryca. Taka sygnalizacja reguluje migrację komórek, która ma kluczowe znaczenie dla angiogenezy. Istnieje jednak wiele różnic między angiogenezą nowotworową a normalnym tworzeniem naczyń krwionośnych. Komórki śródbłonka guza proliferują szybciej niż nienowotworowe komórki śródbłonka. Naczynia nowotworowe różnią się od prawidłowych naczyń krwionośnych morfologią, zwiększoną nieszczelnością i nieprawidłowościami strukturalnymi. Wreszcie, naczynia nowotworowe często nie są w stanie transportować tlenu i usuwać produktów odpadowych ze wszystkich tkanek nowotworowych, co powoduje częstą martwicę komórek nowotworowych.
Rysunek 1. Angiogeneza w chorobach nowotworowych.Guzy mogą stymulować pobliskie normalne komórki do produkcji cząsteczek sygnalizujących angiogenezę, co prowadzi do tworzenia nowych naczyń krwionośnych. Te nowe naczynia krwionośne z kolei zaopatrują rosnące guzy w tlen i składniki odżywcze, umożliwiając komórkom nowotworowym inwazję pobliskich tkanek, przemieszczanie się po całym organizmie i tworzenie nowych kolonii komórek nowotworowych, zwanych przerzutami.
Rysunek 2.Test angiogenezy HUVEC.
Komórki HUVEC tworzą rozległe rurowe sieci naczyniowe po inkubacji przez 6-10 godzin w temperaturze 37 °C na matrycy ECM dostarczonej w zestawie do badania angiogenezy In Vitro (nr produktu ECM625).
Microfluidic Angiogenesis Assays
Badanie, w jaki sposób związki wpływają na angiogenezę, promując lub hamując tworzenie nowych naczyń włosowatych, może prowadzić do terapii wpływających na gojenie się ran, regenerację tkanek, choroby sercowo-naczyniowe, udar, progresję nowotworu i wiele innych. Zestawy Millicell μ-Angiogenesis do aktywacji i hamowania angiogenezy zapewniają potężną, ilościową platformę do monitorowania na żywo zmian w tworzeniu kanalików z niespotykaną dotąd rozdzielczością optyczną.
Rysunek 3.Zwiększenie stężenia sulforafanu spowodowało zmniejszenie zarówno średniej długości rurki, jak i średniej liczby punktów rozgałęzienia, jak pokazano poniżej na mikrografiach HUVEC w jasnym polu i kalceinie-AM.
.Testy adhezji, inwazji i migracji komórek śródbłonka
Komórki śródbłonka wnikają przez błonę podstawną, tworząc kiełkujące naczynia krwionośne w obrębie guzów. Proces inwazji składa się z wydzielania metaloproteaz macierzy (MMP) w celu degradacji błony podstawnej, aktywacji komórek śródbłonka i migracji komórek przez błonę podstawną. Zrozumienie inwazji jest ważne dla zbadania mechanizmu angiogenezy w uszkodzonej tkance, a także w chorobach takich jak rak.
QCM™ testy inwazji komórek w komorze Boydena umożliwiają wygodne i czułe ilościowe określenie inwazji komórek, przepuszczalności naczyń, adhezji i migracji przez warstwę komórek śródbłonka.
.Scratch Wound Healing Assays
Test zadrapań jest popularną metodą badania migracji komórek i angiogenezy. W skrócie, komórki śródbłonka są hodowane do konfluencji, a rana jest wprowadzana poprzez oczyszczenie obszaru monowarstwy za pomocą końcówki pipety, igły lub skrobaka do komórek. Komórki wypełniają oczyszczoną przestrzeń początkowo poprzez migrację, choć komórki w oczyszczonym obszarze również ulegają proliferacji. Skalowanie tej techniki okazało się jednak wyzwaniem, utrudniając analizę biochemiczną zdarzeń molekularnych pośredniczących w naprawie rany. Cell Comb™ scratch assay zaspokaja potrzebę prostego narzędzia zdolnego do tworzenia wielu ran zadrapań w sposób o wyższej przepustowości.
Przeczytaj naszą notę aplikacyjną w Nature
.
Rysunek 4.Testy gojenia się ran po zadrapaniu
Komórki śródbłonka i podłoża hodowlane.
Komórki pierwotne zachowują znaczenie fizjologiczne, ponieważ są pozyskiwane bezpośrednio z żywej tkanki i dlatego znajdują coraz większe zastosowanie w badaniach nauk przyrodniczych i lekach farmaceutycznych. Mamy przyjemność zaoferować komórki pierwotne firmy Cell Applications Inc., w tym komórki śródbłonka i zoptymalizowane podłoża hodowlane z tkanek mikronaczyniowych, aorty, naczyń wieńcowych, płuc i pępowiny (HUVECs).
Rysunek 5 (A)Morfologia kostki brukowej ludzkich komórek śródbłonka żyły pępowinowej, HUVEC; (B) HUVEC znakowane immunologicznie przeciwciałami VEGFR2 (zielony); (C) HUVEC barwione DiI-Ac-LDL (czerwony), acetylowaną apoproteiną specyficznie rozpoznawaną i endocytowaną przez komórki śródbłonka; (D) HUVEC tworzą naczynia krwionośne CD31/PECAM dodatnie (zielone), gdy są hodowane z ludzkimi fibroblastami skórnymi w obecności VEGF.
Referencje
Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.
Nie masz konta użytkownika?